酸枣仁汤对失眠大鼠睡眠时相的影响

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1、酸枣仁汤对失眠大鼠睡眠时相的影响【关键词】失眠大鼠脑电图睡眠时相酸枣仁汤　　AbstractObjectiveTostudytheeffectofsuanzaorendecoctiononsleepphaseofinsomniarats.MethodsUndertheconditionsofconstanttemperature,constanthumidity,auto-lightandelectromagicshielding,entalratssuanzaorendecoctionatdifferentdosesan

2、dadoptedchronicityelectrodeembedmenttechnologytotracetheEEGofhypodermallayeroffreerunningrats,ulation.Thenniaratsiddledoseofitniaratsandtheeffectaredifferentniarats;Electroencephalogram;Sleepphase;Suanzaorendecoction　　酸枣仁汤源自《金匮要略》“虚劳虚烦不得眠，酸枣仁汤主之”。长期临床观察结果表明酸枣仁汤或其加

3、减方对各种失眠均有明显的改善作用。近几年来，开展了酸枣仁汤的现代药理实验研究，实验结果表明酸枣仁汤具有显著的镇静催眠作用［1～5］。为了进一步验证酸枣仁汤的改善睡眠作用，为临床应用酸枣仁汤治疗失眠提供实验依据，我们观察了酸枣仁汤对电刺激所致失眠大鼠的睡眠时相的影响。　　1器材　　1.1动物　　ill.var.spinosa(Bunge)HuexH.F.Chou)、茯苓Poriacocos(SchchuanxiongHort.、知母AnemarrhenaasphodeloidesBge.、甘草Glycyrrhizaurale

4、nsisFisch.(以上中药材购于哈尔滨宝丰药店,均经黑龙江中医药大学生药教研室孙慧峰老师鉴定)。　　1.4仪器　　ND－97数字化脑电图仪（上海医疗器械高技术公司）；大鼠脑立体定位仪（美国Stoelting公司）；有机玻璃笼（自制）。　　2方法　　2.1药液的制备　　（酸枣仁汤的制备）按酸枣仁汤配比:炒酸枣仁18g，茯苓5g，川芎10g，知母10g，甘草5g，称取5味药材共454g，加8倍量水，浸泡1h后煎煮，沸后30min滤过，药渣加6倍量水煎煮，沸后20min，滤过，合并滤液,浓缩成0.648g/ml的高剂量药液。

5、将高剂量药液分别稀释成0.324g/ml的中剂量药液和0.162g/ml的低剂量药液，备用。　　2.2环境控制　　实验环境为通风、避光、电磁屏蔽状态，采用自动定时光控系统对大鼠生活环境实行12h/d的明暗光照周期处理，实验温度(23±2)℃，相对湿度45%～50%。　　2.3时间每天上午8：30将大鼠脑部电极插座与仪器相连，开机运行30min，并于上午9：00正式开始描记实验。在记录皮层脑电时以视频监控系统观察大鼠状态。　　2.4ND－97数字化脑电图仪运行参数在脑电图描记前设置低频滤波截止频率为0.5Hz，高频滤波为35

6、Hz。通过同时对10只大鼠脑电图描记预实验观察，设定仪器增益为200，速度为2（每屏20s）时，各通道脑电信号清晰且未见重叠。　　2.5大鼠睡眠时相区分标准和定量分析指标根据大鼠脑电图，并参考有关文献［6～12］，将大鼠觉醒－睡眠周期分为觉醒（S）4个时相。规定任何一个独立的睡眠时相持续时间至少在20s以上，并以每20s作为一个分析单元。　　2.6电极埋置将实验动物置于上述实验环境中适应7d后，采用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉（40mg/kg）后，脑立体定位仪固定，头部剪毛，消毒后，剪去头部皮肤，充分暴露颅骨，剥离骨膜。分别于颅

7、骨上（AP－2，R2；AP+2，R2）钻孔，将2个直径1mm不锈钢螺丝钉植入颅骨内，使之与硬脑膜接触，但不穿透硬脑膜，作为皮层电极；在额骨正中（AP+5，R0）钻孔安置接地电极，并将电极螺丝钉制成微型插座，以牙科水泥固定［13～16］。术后将实验动物置于特定的环境中，单笼饲养，连续3d腹腔注射4万单位青霉素，恢复7d，并于术后第7天将附有导线的插头与大鼠头部电极插座相连，进行大鼠对电极插座连接的适应性训练，训练4.5h。　　2.7大鼠失眠模型的复制术后第8天将大鼠置于失眠刺激器内，通过笼底部的电栅刺激大鼠足底部8h（刺激参

8、数：电流0.5mA，波宽15ms，频率1Hz，在刺激期间，EEG和EMG记录线路可自行中断。电刺激可被两个可调定时器自动启动。这样，每刺激30s间隔30min,以造成大鼠失眠），同时进行皮层脑电的描记，描记时间从9：00～17：00共计8h。　　实验结果见表1。表1不同剂量酸枣仁汤对失眠大鼠睡眠时相的影