异基因造血干细胞移植后受者骨髓的间充质干细胞来源

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1、异基因造血干细胞移植后受者骨髓的间充质干细胞来源【摘要】为了研究造血干细胞移植植活患者骨髓源间充质干细胞（MSC）的，选择临床上供受者性别不同的造血干细胞移植后临床植活的34例患者作为研究对象，抽取骨髓，进行间充质干细胞培养传代，利用流式细胞术(FCM)检测患者MSC的表面抗原表达特征，利用聚合酶链反应(PCR)分析患者MSC的釉基质基因表达情况以确定其性别，利用荧光原位杂交(FISH)技术进一步证实患者MSC的性别。结果表明：34例患者中有31例患者的MSC原代培养能达到融合，其中24例患者成功传代5代以上，且可进行PCR及FISH检测；FC

2、M结果显示，第5代MSC的CD14+CD45+细胞表达低于0.04%；PCR结果显示，移植后患者的MSC源于患者本人；FISH结果显示，移植后患者的MSC100%源于患者本人。结论：造血干细胞移植后患者骨髓中的MSC仍源于患者本人。【关键词】造血干细胞移植　　OriginofMesenchymalStemCellsinBoneMarroCellTransplantation　　AbstractTheaimofthisstudyarroesenchymalcellsin34patientsismatchedhematopoieticstemcel

3、lstransplant(HSCT).Themesenchymalstemcells(MSC)from34patientsetry(FCM)torevealthecellsurfaceantigenexpression.Thepolymerasechainreaction(PCR)analysisoftheamelogenin(AMEL)geneshostcells.TheculturedMSCosomesX(Xp11.1-Xq11.1)andY(Yq12)todistinguishdonorcellsfromhostcells.Theresu

4、ltsindicatedthat31outof34casesshoaand24outofthese31casesorethan5generationsberofCD14+CD45+cells，onocyte/macrophagefromtheculturedMSC(passage5)arrothepassage5onstratedthatmarrothepassage5arrocelltransplantationedtobederivedstillfromtherecipientstheirootopoieticstemcelltranspl

5、antation;allogeneichemotopoieticstemcelltransplantation;mesenchymalstemcells　　源于人骨髓的间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSC），占骨髓中有核细胞的0.01%-0.001%。从骨髓中分离出的MSC能在体外大量扩增且具有自我更新的能力［1］。MSC能产生多种细胞因子、化学因子及细胞外基质蛋白，在造血细胞的生长、成熟、归巢及增殖中均具有重要的作用［2-5］。在异基因造血干细胞移植(allogeneichematopoieticstemcelltr

6、ansplantation，allo-HSCT)临床植活的患者中MSC是否为供者植活一直存有争议［6-11］，目前对SCT后患者MSC的问题尚无定论。本研究选择临床上供受者性别不同的allo-HSCT后临床造血植活的34例患者作为研究对象，对allo-HSCT　　后造血植活患者中骨髓源的MSC的植活，进行了研究。　　材料和方法　　病例　　病例来自北京大学人民医院或北京道培医院，为供受者性别不同、造血植活的allo-HSCT患者共34例，其中男性17例，女性17例，年龄介于16至48岁之间。预处理包括马利兰（busulfan，Bu）/环磷酰胺（c

7、yclophosphamide，CTX）或Bu/CTX加抗胸腺细胞球蛋白（antithymocyteglobulin，ATG）。造血干细胞为：骨髓移植者3例，动员的外周血干细胞移植者2例，骨髓加动员的外周血干细胞移植者19例，骨髓加动员的外周血干细胞再加第三者脐血混合移植者10例。移植后给予的免疫抑制剂：氨甲喋呤（methotrexate，MTX），霉酚酸酯（mycofenolatemofitile，MMF）及强的松等。利用荧光原位杂交（fluorescenceinsituhybridization，FISH）、人类白细胞抗原(humanleu

8、cocyteantigen，HLA)分型及短串联重复序列聚合酶链反应（shorttandemrepeat-polymerasechainreactio