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1、甲氧滴滴涕对小鼠颗粒细胞的毒性损伤及其卵巢组织线粒体的氧化应激机制作者：王博，陈必良，马向东，马佳佳【摘要】 目的：观察甲氧滴滴涕（MXC）对雌性小鼠颗粒细胞的毒性损伤及其卵巢组织的氧化应激机制.方法：将40只雌性昆明小鼠随机分为16,32,64mg/(kg·d)组及溶剂芝麻油组（对照组），连续20天经腹腔注射染毒MXC，末次注射MXC24h内处死小鼠，TUNEL法、透射电镜观察卵巢颗粒细胞凋亡情况；激光共聚焦显微镜检测小鼠卵巢线粒体活性氧簇(ROS)、线粒体膜电势，紫外分光光度法检测线粒体呼吸链复合物Ⅰ活性变化.
2、结果：TUNEL法显示32,64mg/kg组凋亡细胞数(40.87±3.31),（47.12±7.20）较16mg/kg组(14.00±1.85)及对照组（13.25±1.67）增加，电镜下见凋亡小体等典型凋亡形态学改变，卵巢组织线粒体膜电势，呼吸链复合物Ⅰ活性在32,64mg/(kg·d)组低于对照组（P<0.01），线粒体ROS水平则较对照组增高（P<0.01）.结论：MXC可以通过引起卵巢组织的氧化应激诱导颗粒细胞凋亡发挥其促进卵泡闭锁的毒性作用.【关键词】甲氧氯颗粒细胞细胞凋亡线粒体氧化性应激
3、【Abstract】AIM:Toinvestigatethetoxicdamageofmethoxychlor(MXC)onmicegranulosacellsandthemechanismofoxidativestressintheovarytissue.METHODS:MXCinistratedtothe39-dayfemalemiceatdosesof0(control),16,32and64mg/(kg·d)viaintraperitonealinjectionforconsecutive20d,thenmi
4、ceissionelectronmicroscope.Thegenerationofreactiveoxygenspecies(ROS)andthemitochondrialmembranepotentialofmouseovaryicroscopeandtheactivityofrespiratorychainplexⅠofmitochondriaeasuredbyanultravioletspectrophotometer.RESULTS:Thenumberofapoptoticcellsin32and64mg/
5、(kg·d)groupsg/(kg·d)(14.00±1.85)andcontrolgroups（13.25±1.67,P<0.01).Thetransmissionelectronmicroscopyshog/(kg·d)group.TheactivityofplexⅠandthemembranepotentialofmitochondriag/(kg·d)groupsg/(kg·d)andcontrolgroups（P<0.01）,g/(kg·d)groupsparedg/(kg·d)andcontr
6、olgroups（P<0.01）.CONCLUSION:MXCcouldcauseoxidativestressinmitochondriaofmouseovary,ayinducetheapoptosisofgranulosacells,andfinallyfollicularatresia. 【Keyethoxychlor;granulosacells;apoptosis;mitochondria;oxidativestress 0引言 甲氧滴滴涕(MXC)是一种替代滴滴涕的有机氯杀虫剂,体内外研究证
7、实甲氧滴滴涕能够引起雌性大鼠动情周期延长［1］，卵巢萎缩，卵泡闭锁以及降低卵巢组织细胞合成和分泌类固醇激素的能力［2-3］,另有研究表明卵泡闭锁过程中发生的颗粒细胞凋亡通常也可以由氧化应激引起，且这种凋亡可以被超氧化物岐化酶（SOD）、抗坏血酸等氧化应激抑制剂所阻断［4］.本次实验拟通过对雌性小鼠腹腔染毒MXC,观察其对卵巢组织线粒体氧化应激及颗粒细胞凋亡的影响，探讨MXC对卵巢组织毒性作用的可能机制. 1材料和方法 1.1材料①动物：32日龄雌性昆明小鼠20只购于第四军医大学实验动物中心，体质量32～38g，自
8、由饮食，饲养温度(22±1)℃，12h光照－黑暗交替.经适应性饲养7d后，随机分为对照组,MXC每日16,32,64mg/kg4组，每组5只.自小鼠39日龄起每日腹腔注射MXC染毒，连续20d［3,5］.②试剂与仪器：MXC购自美国Sigma公司（纯度99％，编号：49054），芝麻油为市售纯正芝麻油；甘露醇、蔗糖、EDTA、HEPES及tri
