山药种质资源离体保存及dna指纹图谱构建

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1、JIJflllIXIJllrlllIIJllJillⅢY18126华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文是否保密／f乎罾如需保密，解密时间弘lQ年f1具引B独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果．尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定．与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。愀张膨确每帆纱∥

2、年／月／日学位论主作者签名：獬导师签名：棚．签名眦硝年／月∥日签名吼矽柝／月彦日注：请将本表直接装订在学伊论文的扉页和目录之问华中农业人学2008届博士学位论文目录．．摘要．．Abstract．缩略词表1前言目录．1．6．811121．1问题的提出⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．121．1．1植物种质资源保存及遗传多样性研究的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．1．2山药种质资源保存及遗传多样性研究的重要性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．1．3我国山药种质资源保存现状及存在的问题⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．1．3

3、．1我国山药种质资源保存现状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．141．1．3．2我国山药种质资源保存存在的问题⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．151．2前人研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．151．2．1植物种质资源离体保存方法的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．2．1．1常温继代保存⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。161．2．1．2缓慢生长保存⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．161．2．1．3超低温保存⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯181．2．2植物种质资源遗传多样性的研

4、究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯251．2．2．1植物种质资源遗传多样性研究的方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。251．2．2．2RAPD分子标记技术及其在植物种质研究中的应用⋯⋯⋯⋯261．2．2．3DNA指纹图谱在植物种质研究中的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．281．2．3山药种质资源离体保存研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯301．2．4山药种质资源遗传多样性研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3l1．3本研究的目的和内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．332材料与方法2．1材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯342．2方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯352．2．1山药无菌培养体系的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯352．2．1．1无菌材料的获得⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．35山药种质资源的离体保存及DNA指纹图谱的构建2．2．1．2试管苗的繁殖和生根⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一352．2．1．3微型块茎的诱导形成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。352．2．1．3．1培养方式对微型块茎诱导形成的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、352．2．1．3．2蔗糖浓度对微型块茎诱导形成的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．362．2．1．3．3植物生长物质组合对微型块茎诱导形成的影响⋯⋯⋯⋯362．2．1．3．4光周期对微型块茎诱导形成的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯362．2．1．3．5数据处理与统计分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯362．2．2山药种质资源的离体保存研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯372．2．2．1试管苗常温继代保存⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。372．2．2．2试管苗缓慢生长法保存⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。372．2．2．3微型块茎离体保存

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．372．2．2．4超低温保存⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯372．2．2．4．1分步冷冻法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯382．2．2．4．2玻璃化法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．392．2．2．4．3包埋玻璃化法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯392．2．2．5数据处理与统计分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一402．2．3山药种质资源DNA指纹图谱的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。402．2．3．1供试材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯⋯⋯．．402．2．3．2山药基因组DNA的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4l2．2．3．2．1DNA提取方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯412．2．3．2．2DNA浓度和质量的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4l2．2．3-3砒廿D反应条件⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯