清洁水体与污染水体中微生物群落分布的测定

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1、清洁水体与污染水体中微生物群落分布的测定谢玫佳20092400147环境科学摘要：对官洲河段水体中微生物群落的种类和数量分布以及河段水体污染情况相联系进行了取水样和实验。结果表明:在不同采样点的水体中微生物的群落种类和数量从2号（控制断面）到3号（消减断面）采样点随着污染程度的减轻有减少的趋势;水体中微生物的分布与水体受污染前后所含有机污染物质的含量密切相关。关键词：微生物，群落分布，清洁水体，污染水体前言：微生物以群落的形式存在于自然环境中,微生物群落是地球生物化学循环的主要驱动者。微生物群落的生态特征

2、可分为结构特征和功能特征,其中结构特征描述微生物群落成员的种类、丰度及其在不同环境条件下的更替。[1]水体受到污染后,由于物理、化学、生物等因素的作用,使污染物的浓度和毒性逐渐降低,经过一段时间,恢复到受污染以前状态的自然过程。[2]因此，同一条河流的对照断面、控制断面、消减断面的微生物的种类和数量是不同。本实验通过对清洁水体与污染水体中微生物的测定，了解自然界中的清洁水体与污染水体中存在的微生物的种类和数量，分析两种水体中微生物群落的分布特点，了解污染物对水体中微生物群落的影响。1、研究方法1.1采样点

3、研究区域为大学城官洲河段到入珠江段，如图1所示，在官州河段共选择了三个采样点，并于同一天时间段分别在对照断面，控制断面，消减断面取水样。图11.2微生物的培养1.2.1培养基的配备本实验采用肉汤蛋白胨培养基，其配方为：牛肉膏3g，蛋白胨10g，蒸馏水1000mL，NaCl5g,Ph:7.0~7.2,琼脂15~20g/L。灭菌条件：0.101MPa(121oC，15~20min)。1.2.2稀释水样以无菌操作按十倍稀释法用无菌吸量管和无菌水将所取三个水样（取1mL）分别稀释至10-1、10-2、10-3倍。

4、稀释过程如图21.2.3倒平板将上述肉膏蛋白胨琼脂培养基的平板培养皿分别用记号笔写上水样1，10倍；水样1，100倍；水样1，1000倍；水样2，10倍；水样2，100倍；水样2，1000倍；水样3，10倍；水样3，100倍；水样3，1000倍；然后用无菌吸管分别由已稀释好的水样中各吸取1ml对号放人已写标记的培养皿中。顺时针和反时针来回转动培养皿，使培养基和菌液充分混匀，冷凝后即成平板，倒置于37°C恒温培养箱内培养24~48h。1.3微生物菌落形态的观察将培养的细菌菌落逐个辨认并编号，按号码顺序将各细

5、菌的菌落特征描述、记录。应注意菌落的形状、大小、表面结构、边缘结构、菌丛高度。颜色、透明度、气味、粘滞性、质地软、硬等情况。表面光滑与粗糙情况等。1.4平板菌落数法计数培养48h后，取出平板，算出同一稀释度三个平板上的菌落平均数，并按下列公式计算：每毫升中菌落形成单位(CFU)=同一稀释度三次重复的平均菌落数×稀释倍数，一般选择平均菌落数在30-300之间的稀释度计算较为合适。1.5个体形态特征的观察选取其中一个培养皿，用接种环取培养皿中的2~3种优势菌种（单菌落）少许做涂片，进行革兰氏染色，并作镜检，确

6、定其革兰氏染色反应，并绘其形态图。革兰氏染色操作过程如下：涂片干燥固定草酸铵结晶紫染色约60秒水洗革兰氏碘液媒染约30秒95%酒精脱色水洗蕃红复染（30~60秒）水洗干燥镜检应注意，碘液媒染30秒钟后，直接用95%酒精从载玻片的一端冲洗脱色，直到留下的酒精无明显的紫色为止。酒精的浓度、用量及涂片厚度都会影响脱色速度。脱色是革兰氏染色中关键的一步。只有仔细操作，反复实践才能获得满意的实验结果。2、结果与分析2.1不同取样点水体中微生物的种类从实验可以得到各个取样点水体中微生物的种类分布，控制断面的微生物种类

7、最多，如表2所示，污染最严重，这是由于控制断面采样点的上游有排污口和污水处理厂的排水口，使水体受到污染，水质变差。对照断面采样点的微生物种类相对较少，如表1所示，这是由于此采样点位于排污口的上游，水体未受到污染。而消减断面采样点的微生物种类最少，如表3所示，这是由于此采样点离排污口已经较远，且水流动过程中复氧自净，水质逐渐变好。表1水样一菌落特征表编号123456颜色红棕色土黄色白色蛋清色蛋清色淡黄色边缘特征圆形不规则规则，放射状规则圆形不规则圆形纵剖面特性边缘齐整，高凸起边缘波浪边缘波浪，扁平边缘齐整，

8、扁平边缘波浪，隆起边缘齐整，扁平菌体大小菌体小中等较小中等较小较小表明粗糙/光滑 光滑粗糙光滑光滑粗糙光滑表2水样二菌落特征表编号12345678颜色底部透明中间泛黄微发白透明点状红棕色土黄色乳白色白色乳白色边缘特征圆形圆形圆形圆形圆形规则放射状，表面有粗糙菌丝状圆形圆形纵剖面特性边缘整，扁平边缘花瓣形，扁平边缘齐整，高凸起边缘齐整，低凸起边缘整，高凸起边缘花瓣状，低凸起边缘齐整，低凸起边缘齐整，低凸起菌体大小中等中等十分微小