陕西部分地区屠宰场猪蛔虫感染情况调查和猪蛔虫体内细菌分离及分析

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1、分类号：S855.9学校代码：10712UDC：579.6研究生学号：2016051643密级：公开级2018届专业学位硕士研究生学位（毕业）论文陕西部分地区屠宰场猪蛔虫感染情况调查和猪蛔虫体内细菌分离及分析类型兽医硕士领域、方向预防兽医学研究生李璐瑶指导教师林青副教授完成时间2018年5月中国陕西杨凌Classificationcode:S855.9Universitycode:10712UDC:579.6Postgraduatenumber:2016051643Confidentialitylevel:PublicThesisforMaster’sDegreeNort

2、hwestA＆FUniversityin2018INVESTIGATIONONTHEINFECTIONOFASCARISSUUMINABATTOIRSANDTHEISOLATIONANDANALYSISOFBACTERIAINASCARISSUUMINSHAANXIPROVINCEMajor:MasterofveterinarymedicineResearchfield:PreventiveveterinarymedicineNameofPostgraduate:LiLuyaoAdviser:AssociateProf.LinQingDateofsubmission:Ma

3、y2018YanglingShaanxiChina陕西部分地区屠宰场猪蛔虫感染情况调查和猪蛔虫体内细菌分离及分析摘要猪蛔虫（Asarissuum）是寄生于猪小肠的一种大型线虫，全世界范围内广泛流行，尤其是欠发达地区和饲养环境差的养殖地区，感染率极高，人也可感染猪蛔虫。猪蛔虫病虽然死亡率低，但长期摄取宿主营养，给养猪业带来重大损失。寄生虫体内病毒的研究早有报道，但寄生虫体内细菌的研究报道甚少，猪蛔虫体型大，便于进行多种试验，是优选的寄生虫模型。为了解陕西省屠宰猪蛔虫的感染情况，并初步探索猪蛔虫肠道细菌与猪蛔虫以及猪肠道菌群之间的相互关系，为进一步深入研究猪蛔虫在细菌病传播方

4、面的作用等，论文采用小肠完全剖检法操作技术，通过对陕西省陕北、关中和陕南部分地区的屠宰猪进行调查，统计并分析猪蛔虫感染情况；用传统细菌培养法分离猪蛔虫肠道内细菌，同时用细菌16SrDNA基因PCR扩增、克隆、筛选、测序分析的方法鉴定猪蛔虫肠道内的细菌；利用滤纸法检测猪蛔虫体腔液的抑菌活性，以及基于CecropinP1基因对猪蛔虫抗菌肽的PCR扩增，从猪蛔虫总DNA内通过PCR扩增出CecropinP1基因片段。获得以下结果：1．从陕西陕北（神木）、关中（杨凌、周至）、陕南（城固）三个地区5个屠宰场的共885头屠宰猪，采用小肠完全剖检法技术，收集并统计猪蛔虫检出率和感染强度

5、，分析陕西不同地区屠宰猪的猪蛔虫感染情况，并对陕西周至屠宰猪在不同季节的感染情况进行差异性分析。结果显示，陕西不同地区猪蛔虫检出率分别为神木4.29%（10/233）、杨凌50%（25/50）、杨凌本香0%（0/53）、周至11.22%（45/401）、城固4.05%（6/148），差异极显著（P＜0.01），猪蛔虫平均感染强度分别为神木1.30条、杨凌9.00条、周至4.77条、城固1.67条。陕西周至不同季节屠宰猪蛔虫检出率分别为秋季9.94%（16/161）、冬季12.71%（23/181）、春季10.00%（3/30）和夏季10.34%（3/29），差异不显著（P

6、＞0.05），猪蛔虫平均感染强度分别为秋季4.12条、冬季4.96条、春季6.67条、夏季5.00条。结果表明，猪蛔虫病在陕西地区流行普遍，且存在地方性差异。2．从猪蛔虫肠道共分离到7株细菌（编号为HC1～HC7），鉴定可知，HC1和HC2相同，HC3、HC4和HC5相同，HC6和HC7相同，经生化试验和16SrDNA基因的PCR扩增鉴定，代表菌株HC1、HC3、HC6均为大肠埃希菌；利用细菌16SrDNA分子克隆测序鉴定细菌，从猪蛔虫肠道内共鉴定出4种菌，分别是黄热厌氧芽孢杆菌（Anoxybacillusflavithermus）、Romboutsiatimonensi

7、s、乙二醇梭菌（Clostridiumglycolicum）和藤黄单胞菌（Luteimonaspadinae）。蛔虫体壁鉴定出4种菌，分别是Romboutsiatimonensis、Ralstoniainsidiosa、Pasteurellaaeroqenes和Rombinsoniellapeoriensis。将猪蛔虫体壁鉴定出的细菌和肠道内与体壁相同的菌排除后，共确定蛔虫肠道存在3株菌，即Anoxybacillusflavithermus、Clostridiumglycolicum和Luteimonaspadinae，均为厌