多黏芽孢杆菌hd

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1、多黏芽孢杆菌HD程爱芳,邓政东,黄芳一,陈文,周念波(武汉生物工程学院生命科学与技术学院,武汉430415)摘要:采用DNS比色法,通过单因素试验和正交试验对多黏芽孢杆菌(Bacilluspolymyxa)HD-1产β-甘露聚糖酶的培养基主要成分和培养条件进行优化。结果表明,该菌种产β-甘露聚糖酶的最适培养基为魔芋粉0.75%、酵母膏1.00%、磷酸二氢钾0.04%、硫酸镁0.05%,培养基初始pH9.0;最适培养条件为接种量6%,培养温度31℃,培养时间27h。在此优化条件下,多黏芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶活性可达72.6U/mL。.jyqkannanasefromBa

2、cilluspolymyxaHD-1CHENGAi-fang,DENGZheng-dong,HUANGFang-yi,CHENWen,ZHOUNian-bo(SchoolofLifeScienceandTechnology,WuhanInstituteofBioengineering,Wuhan430415,China)Abstract:ThecolorimetricmethodofDNS,singlefactorandorthogonalexperimentswereusedtooptimizethefermentationmediumandculturecondit

3、ionsofBacilluspolymyxaHD-1toimprovetheproductionofβ-mannanase.Theresultsshowedthattheoptimalmediumcontained0.75%konjac,1.00%yeastextract,0.04%KH2PO4·3H2O,0.05%MgSO4·7H2O,withtheinitialpH9.0.Theoptimalcultureconditionswere6%inoculation,culturetemperatureof31℃,andculturinglength27ofhours.U

4、ndertheseconditions,theβ-mannanaseproducedfromBacilluspolymyxaHD-1L。2.1.5接种量对发酵产酶的影响  接种量对发酵产酶的影响结果如图7所示,多黏芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的最适接种量为6%,因为过大的接种量引起短时间内菌体大量生长繁殖,从而使溶氧不足,不利于产酶。2.1.6培养温度对发酵产酶的影响  温度对多黏芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的影响结果如图8所示,多黏芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的最适培养温度为33℃,超过33℃菌体提前衰老,酶活迅速下降。2.1.7摇床转速对发酵产酶的影响  摇床转速对多黏芽孢杆菌

5、产β-甘露聚糖酶的影响结果如图9所示,多黏芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的最适摇床转速为240r/min。转速太小,影响通气量,不利于产酶;转速太大,气体停留时间缩短从而使得溶氧量减低,同时剪切力过大,不利于产酶。2.1.8发酵时间对发酵产酶的影响  发酵时间对多黏芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的影响结果如图10所示,多黏芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的最适发酵时间为30~48h。发酵时间过短,微生物没有充分生长,时间过长,微生物发生自溶,均不利于产酶。2.2正交试验结果2.2.1培养基成分正交试验结果由表3可知,影响多黏芽孢杆菌HD-1产β-甘露聚糖酶的培养基成分因素由大到小顺序为A、

6、B、C、D,优化组合为A2B2C3D1,即魔芋粉0.75%、酵母膏1.00%、磷酸二氢钾0.04%、硫酸镁0.05%。2.2.2培养条件正交试验结果由表4可知,影响多黏芽孢杆菌HD-1产β-甘露聚糖酶的培养条件因素由大到小顺序为H、E、G、F,最优组合为E1F3G2H2,即培养温度31℃、初始pH9.0、接种量6%、发酵时间27h。3小结通过单因素和正交试验对多黏芽孢杆菌HD-1的培养基成分和培养条件进行了优化,得到其产β-甘露聚糖酶的最优发酵条件为魔芋粉0.75%、酵母膏1.00%、磷酸二氢钾0.04%、硫酸镁0.05%、培养基初始pH9.0,培养温度31℃、接种量6

7、%、发酵时间27h。在此条件下,β-甘露聚糖酶活力可达72.6U/mL。另外,从2个正交试验结果可以看出,魔芋粉用量、酵母膏用量、培养温度和发酵时间对产酶影响较大,严格控制有利于产酶。..

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