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时间:2018-11-03
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1、转化生长因子┐β1对骨形态发生蛋白诱导成骨的促【关键词】转化生长因子 关键词:转化生长因子;骨形态发生蛋白;诱导成骨 摘要:目的我们通过观察转化生长因子β1(transforminggroorpho-geicprotein,BMP)共同修复骨缺损,达到进一步阐明BMP诱导成骨机制的目的.方法实验采用日本大耳白兔左尺骨中段12mm骨缺损实验模型,分为实验组、对照组和空白组,缺损内分别植入BMP/TGF-β1/载体、BMP/载体、载体.通过X线、组织学及电镜对比观察三组骨缺损修复情况.结果实验组骨缺损无
2、论是骨痂出现还是骨连接发生时间均较对照组明显提前,空白组骨缺损形成骨不连.实验组成骨细胞和软骨细胞无论出现的时间、数量和功能活跃程度均优于对照组.电镜观察见成骨细胞、软骨细胞内线粒体丰富、内质网增多,而对照组则相对较少.结论TGF-β1具有促进BMP诱导成骨的作用.TGF-β1通过促进间充质细胞分裂增殖为BMP提供靶细胞、促进成骨细胞及软骨细胞的分裂增殖、促进骨细胞合成产生Ⅰ型胶原、促进基质钙化、减少骨吸收等作用来促进BMP的诱导成骨. Keyinggroorphogeicprotein;induci
3、ngosteogenesis Abstract:AIMToclarifythemechanismofBMPinducingosteogenesis.METHODSAnexperimentalmodelof12mmbonedefectintheleftulnaoftherabbitentalgroup,controlgroupandblankgroupatrandom.BMP10mg/TGF-β110μg/carrier,BMP10mg/carrierandcarrieralone-plantedint
4、othebonedefectofeachgrouprespectively.Roentgenography,histologicalandelectronicmicroscopeex-aminationentalgrouphadabetterosteogenesiseffectthancontrolgroup,eitherincallusforma-tionorboneuniongenesisappearing;osteoblastandchondro-cyteappearedearlierinexpe
5、rimentalgroupthanincontrolgroupandnonuniontakenotinginducingosteogenesisofBMP.Throughtheeffectofpromotingdiffer-entiationandproliferationTGF-β1leadsmesenchymalcells,chondrocyteandosteoblasttodifferentitionandproliferation;osteoblastproducetypeⅠcollagen;c
6、alcificationofbonema-trixisenhancedbyTGF-β1. 0引言 研究表明,一些生长因子在骨的生长发育,骨损伤修复等方面起着重要作用[1-3].TGF-β尤其重要,它不仅调节骨的生长发育,对骨的改建塑形也起着重要作用,因而被认为是一种重要的骨生长调节因子.骨形态发生蛋白(bonemorphogeicprotein,BMP)诱导成骨效果已被大量的实验研究和临床应用所证明,但实验研究表明BMP并不能使体外培养的间质细胞转化为骨组织,这表明BMP的诱导成骨需要体内特定的环境
7、和条件,我们在实验研究中也发现BMP诱导成骨中可以检测到TGF-β1的高效mR-NA表达,并且,还有实验研究表明生长因子具有促进BMP基因表达的作用[4,5],提示BMP诱导成骨可能还需要其他生长因子的参与和协同,或者说BMP和其他生长因子间具有相互促进的作用.我们通过观察TGF-β1对BMP诱导成骨的作用,以探讨TGF-β1在BMP诱导成骨中的作用. 1材料和方法 1.1材料 实验用BMP为本科实验室按Urist方法提取的牛BMP粗提物,活性实验证明具有诱骨活性;TGF-β1由美国马里兰州国家癌
8、症中心化学防护实验室MichaelB.Sporn教授提供;载体为脱脂脱钙脱蛋白后经高温、高压(121℃0.11MPa)消毒灭活1h的牛松质骨基质颗粒(直径约0.4mm).复合方法为:将BMP240mg用2mg・L-1的盐酸胍溶液10mL溶解,分成两等份,一份中加入适量载体(供12只兔使用),另一份再加入TGF-β112μL(用BSA液稀释,含TGF-β1120μg)后加入适量载体(供12只兔使用),充分混匀、真空冻干,环氧乙烷
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