乳腺癌中bmi―1、mel―18的表达及病理意义

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1、乳腺癌中Bmi—1、Mel-18的表达及病理意义摘要：目的：探讨Bmi-1、Mel-18在乳腺癌组织中的表达，以及与病理特征的意义。方法：选取36例乳腺癌患者病理组织与36例健康人群乳腺组织，对两组组织标本进行处理，观测Bmi-l、Mel-18的mRNA、蛋白表达，分析与病理特征的关系。结果:两组Bmi-1、Mel-18的mRNA、蛋白表达对比，差异均有统计学意义（P0.05）。结论:当Bmi-1表现为高表达时，Mel-18呈现为常低表达，两者与乳腺组织恶性病变存在关联，故对两者进行联合测定，在临床诊治中具有一定的应用价值。关键词:乳腺癌；Bmi-1；Mel-18B细

2、胞特异的莫罗尼白血病插入位点1基因（Bmi-1）作为多梳基因家族（PcG）的重要成员，属于原癌基因，定位于染色体畸形相关区域，在各种肿瘤疾病的形成和发展中，都起到了非常重要的作用。黑色素瘤核蛋白质（Mel-18）同样被称之为多梳基因环指蛋白2（PCGF2）,Mel-18蛋白与Bmi-1蛋白有着93%的同源性，而基因则与Bmi-1有着70%的同源性。有报道指出Mel-18可能属于一种癌基因，但同时也有报道证实其属于抑癌基因，但其在肿瘤发展中发挥了重要作用［1］。鉴于此，本研究通过实验，对Bmi-1、Mel-18在乳腺癌组织中的表达进行了解，并分析其病理意义，旨在为乳腺癌

3、的临床诊治提供新方向。1材料与方法1.1材料选取广东药学院附属医院2014年1月-2015年3月接诊的乳腺癌手术治疗患者，选取36例，患者年龄为24-66岁，平均年龄为(50.22±13.05)岁；根据AJCC第6版分期标准［2］对乳腺癌进行分期:4例IV期，7例III期，11例II期，14例I期；所有患者术前均未接受任何治疗，且经术后病理组织标本确诊。另从同期健康女性中，选取36例作为对照组，取正常乳腺组织，且经病理学诊断均为正常组织。所有标本均在离体30min内完成采集，分别取2份，1份采用10%福尔马林溶液对其进行固定处理，经石蜡包埋处理和切片备用；1份置于液氮

4、内，放置于-80°C环境下保存。两组均签订知情同意书。1.2方法1.2.1RT-PCR实验运用Trizol对各乳腺组织总RNA进行提取。购入Bmi-1、Mel-18上下游引物。PCR反应条件：经94°C行2min预变性，同温度下行30s变性；经48°C行30s退火；经72°C行45s延伸；再次经94°C行30s变性；经48°C行30s退火；经72°C行45s延伸。按照上述方法连续进行35个循环处理后，再进行lOmin延伸处理;对PCR反应后产物进行电泳处理，同时采用凝胶显像对结果进行分析，同时通过3-actin片段灰度值和基因片段的比值，来作为相对表达水平。1.2.2

5、免疫组织化购入Bmi-1抗体、Mel-18抗体，浓度设定为1:100o对组织切片进行脱蜡水化处理;运用3%对其行灭火内源性过氧化物酶处理；采用拧檬酸修复抗原，血清封闭，向其中加入一抗，置于4°C环境内过夜。采用磷酸盐缓冲液对抗体进行替代，并将其作为空白对照，在经过二氨基联苯胺行显色处理后，采用苏木素进行反复的复染和水洗，使其能够完全透明，并通过中性树胶封片，进行镜检。根据染色强度进行计分，标准为：4分（重度染色）；3分（中度染色）；2分（弱染色）；1分（阴性）；对两者相乘结果作为判断依据，若结果＞4分，即可判定为阳性表达，反之则为低表达。根据着色细胞数/视野细胞总数X

6、100%进行计分，标准为：4分（＞75%）；3分（51%-75%）；2分（11%-50%）;1分（彡10%）。1.3统计学方法选取统计学软件SPSS20.0对本研究数据进行统计分析。以均数土标准差（X+S）表示RT-PCR结果，运用LSD法对组间结果进行检验；采用卡方对蛋白表达进行检验；若P0.05）；乳腺癌组织中Bmi-1与Mel-18蛋白表达，在病理特征中对比，差异均无统计学意义（P>0.05）,见表1。3讨论Bmi-1属于PcG家族中具有代表性的基因。已有研究者通过动物实验证实［3］，Bmi-1可对INK4a/ARF位点进行调控，致使p53与pRb受到影响。且与

7、Bmi-1在一系列肿瘤中的研究报道也在逐渐被公开。Bmi-1在乳腺癌、鼻咽癌、卵巢癌等恶性肿瘤的发生、发展中均有参与。本研宄通过对Bmi-1在乳腺癌与正常乳腺组织中的表达进行观察，结果显示，Bmi-lmRNA表达量与蛋白表达率在乳腺癌中表现为明显升高（P