浅析高频电磁辐射对大鼠血脑屏障的影响及参力胶囊防护作用

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1、浅析高频电磁辐射对大鼠血脑屏障的影响及参力胶囊防护作用电磁辐射作为一种污染的方式越来越引起社会的广泛关注。其标准界定300MHz以上即为高频与微波频段的辐射。、微波炉、电磁炉、电视等家电皆为高频范围。电磁辐射可引发中枢神经系统认知能力障碍，使海马神经元受损，造成学习、记忆能力下降。血脑屏障(BBB)是由基膜、脑毛细血管内皮细胞(BCECs)和毛细血管周围的神经胶质膜构成的。其中BCECs及其之间的紧密连接(TJ)是构成BBB的主要结构。本实验通过对SD大鼠海马区血脑屏障的观测，探讨抗辐射类的中药制剂参力胶囊的保护作用。　　材料与方法

2、　　1.研究对象:鼠龄8周的健康SD大鼠80只，体重220～280g，雄性，由大连动物中心实验室提供。大鼠随机分为4组，分别为正常对照组(A组)，模型组(B组)、参力低浓度组(C组)、参力高浓度组(D组)，每组20只。每组按辐照后取材时间点又分为2个亚组:6小时组和24小时组，每组各10只。　　2.方法:在实验室条件下，适应性喂养7天，以颗粒型大鼠饲料喂养(含蛋白质23%、脂肪4.7%、钠盐0.24%)，饮用水为纯净水，室温控制在21℃左右，相对湿度40%～55%。各组按剂量给药，用药10天。采用灌胃给药法用药后除A组外，其余各组均

3、给予高频辐射:大鼠自由体位，装于塑料制整理箱中，置于辐射源医科达公司Precise医用直线加速器(佳木斯大学附属医院核医学科)定点辐照，照射时间:200min，辐射功率:10k2。辐射后观察大鼠行动、对刺激的反应。　　3.检测血脑屏障通透性:于辐射后6h和24h时，用10%的水合氯醛将大鼠麻醉，开胸暴露心脏，剪开右心耳，再从左心室插入注射针头，用生理盐水缓慢冲洗大鼠体内的血液，直至冲出清澈液体。此时换装有40ml固定液硝酸镧-戊二醛的注射器快速固定，断头取脑，放入硝酸镧-戊二醛固定液中继续固定。标本采集:把灌注好的鼠脑切成1mm3的

4、小块泡到前固定液中固定，用含2%的硝酸镧-四氧化锇进行后固定，0.1mol/L二甲胂酸钠缓冲液(pH7.2～7.4)漂洗，丙酮梯度脱水，丙酮+包埋剂(1∶1)浸透过夜，812环氧树脂包埋，超薄切片，醋酸铀和枸橼酸铅双染后，在JEM22000EX型透射电镜(佳木斯大学电镜室提供)下观察，拍片。　　结果　　1.辐射后大鼠一般情况观察结果:各组大鼠造模前和造模后比较，辐射后的大鼠毛发没有发生变化，B组与A组相比B组大鼠行动迟缓，较A组出现对各组刺激反应迟钝的现象。C组及D组与A组比较，大鼠行动基本没有差异，对轻微刺激反应较为灵敏，C组、D

5、组对刺激的表现没有明显差异。　　2.透射电镜(TEM)检测结果:A组:TEM下可见BBB结构完好，间隙正常，硝酸镧颗粒主要沉积在基膜外侧，未穿过TJ。B组:TEM下可见BCECsTJ间隙明显增宽，间隙内可见镧颗粒沉积，TJ处也可见镧颗粒沉积。镧颗粒甚至可达星形胶质细胞周围。C组:TEM下可见硝酸镧颗粒主要沉积在BCECsTJ，少量镧颗粒穿过TJ。星形胶质细胞周围亦见少量镧颗粒沉积。D组:TEM下可见硝酸镧颗粒主要沉积在基膜外侧，未穿过TJ。星形胶质细胞周围亦未见有镧颗粒沉积，与A组相仿。6h时和24h时的电镜图片相比较，只有B组有区

6、别，24h时可见硝酸镧扩撒出血管的量明显比6h时的多，其他组无明显差异。　　参力胶囊，主要成份为黄芪、人参、灵芝孢子粉，有增强免疫力，抗辐射的功用。是一种无毒副作用的纯中药制剂。有研究表明，参力胶囊对辐射损造成的造血功能障碍有修复作用，并对辐照中的胸腺和脾脏有一定的保护作用。　　因此我们选用了参力胶囊作为实验中药物防护的方法。BBB正常生理状态下TJ是致密的，可使神经系统内环境相对稳定。本实验通过TEM观察结果发现，高频辐射可以使海马BBB通透性增加，导致大鼠行为学发生改变，说明大鼠学习记忆受到损伤。当BBB被破坏时，微循环结构渗透

7、压平衡失调，产生血管性源性脑水肿，主要因为调节BBBTJ功能的信号转导机制造成的，如Ca2+调控，蛋白激酶途径、胶质细胞的调节以及蛋白磷酸化调节等原因。　　当这些原因引起信号转到发生变化时，海马组织中的一些受体会发生变化，导致通透性的改变。有研究证明NMDA受体变化与BBB的通透性变化有关。表明电磁辐射可能导致大鼠海马组织中NMDA受体发生变化，而NMDA受体可以介导Ca2+的通透性，当Ca2+的通透性发生变化时，BBB的通透性发生变化。而NMDA变化与学习记忆的变化有关。辐射可以导致BBB通透性的变化，可以使细胞发生凋亡导致学习记

8、忆损坏。　　本实验通过高频辐射辐射大鼠后，可见硝酸镧颗粒透过TJ有所沉积，TJ处也可见镧颗粒沉积，有些硝酸镧颗粒甚至已经达到星形细胞周围，说明TJ连接间隙的增大，BBB通透性增强。通过TEM对海马BBB的超微结构的观察，可以得出高频辐