白细胞介素6对hl

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1、白细胞介素6对HL【关键词】白细胞介素　　摘要:目的研究白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）对粒细胞白血病细胞系HL-60核因子-κBp65（NF-κBp65）活性的影响，以探讨IL-6在白血病发生、发展中的作用。方法指数生长期HL-60细胞置于96孔培养板内RPMI-1640培养液培养2h后，分为A、B2组。A组加PBS液继续培养3h;B组分别加0.5、5、50μg.L的IL-6继续培养3h。用流式细胞仪（FCM）检测HL-60细胞NF-κBp65的活化率。结果IL-6浓度为5、50μg.L时诱导的HL-60细胞NF-κBp65活化率分别为（16.81±2.

2、73）%、（22.37±4.29）%，与对照组（8.44±2.20）%相比差异有统计学意义（P<0.05）;IL-6浓度在0.5μg.L时NF-κBp65活化率为（8.69±1.61）%，与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05）;3种IL-6浓度组间的NF-κBp65活化率比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论IL-6有诱导HL-60细胞NF-κBp65活化的作用，且存在剂量依赖趋势。　　关键词:白细胞介素6;HL-60细胞;核因子-κBp65;活化　　Abstract:ObjectiveToexploretheeffectsofinterleuki

3、n-6（IL-6）ontheactivityofnuclearfactorkappaBp65（NF-κBp65）inHL-60cells.MethodsAfterbeingculturedinRPMI-1640for2h，theHL-60cellsediaofgroupA，andIL-6.0.5，5and50μg.LaddedinthemediaoftherespectivesubgroupsofgroupB.TheactivationofNF-κbp65ofHL-60cellsinedbyfloetry（FCM）.ResultsTheratesofactivationofN

4、F-κBp65inHL-60cellsculturedthecontrolinsignificantly（P>0.05）.ConclusionIL-6increasestheactivationofNF-κBp65ofHL-60cellsindose-dependentmanner.　　Keyg.L葡萄糖，青、链霉素各200U.L）中传代培养，每3～4天传代1次。培养条件:5%CO2，饱和湿度，37℃。　　1.2.2HL-60细胞NF-κBp65活化指数生长期HL-60细胞1×106.L，置于96孔培养板内，每孔各1ml培养2h后，分为2组。A组加PBS液0.1ml;B

5、组又分为3组，分别加入终浓度为0.5、5、50μg.L的IL-6各0.1ml，各组继续培养3h后待测NF-κBp65活化率。实验重复3遍。　　1.2.3流式细胞仪检测NF-κBp65活性分别取各组样本1ml，1500r.min离心10min，弃上清;PBS洗涤2次;加1∶50稀释的NF-κBp65一抗（兔抗人单抗）100μl，室温孵育30min，PBS洗涤2次;加1∶50稀释的FITC标记的二抗（鼠抗兔单抗），室温避光孵育30min，PBS洗涤2次;1%副醛固定细胞，4℃冰箱保存，3天内用流式细胞仪检测。每组实验均设阴性对照，阴性对照组只加二抗，不加一抗，余处理同实验组。　　

6、1.3统计学处理采用SPSS11.5分析统计软件处理数据，试验数据首先进行方差齐性检验和两两比较SNK法检验，两独立样本均数采用t检验，试验数据用ˉx±s，检验水准:α=0.05。　　2结果　　IL-6在浓度为5、50μg.L时诱导的HL-60细胞NF-κBp65活化率与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）;在浓度为0.5μg.L时与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。3种IL-6浓度组间HL-60细胞NF-κBp65活化率方差齐性检验F=165.15，P=0.000;3组间两两比较P均<0.05。见表1。　　表1各组HL-60细胞NF-κBp

7、65活化率的比较（略）　　与A组比较:#P>0.05，*P<0.05;IL-6组两两比较:P均<0.05　　　3讨论　　NF-κB是一种多效性的转录因子，参与炎症、免疫、应激、细胞的增殖和细胞凋亡等多种生理、病理过程的基因调节。NF-κB家族由NF-κB.Rel（p65）蛋白家族中的成员以同源或异源二聚体形式存在。1996年，国外3个实验小组报道NF-κB是肿瘤坏死因子（TNF）和化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡耐受的重要因子［1～3］。通常情况下，NF-κB和其抑制因子IκB以非活性形式存在