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时间:2018-10-30
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1、硕士学位论文论文题目:铜对三角褐指藻电子传递干扰与氧化损伤的研究作者姓名才旨导t师钱海千教授学科专业生物化学与分子生物学所在学院生物与环境工程学院提交日期2014年4月I学位论文原创性声明本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的研究成果。除文中已经加以标注引用的内容外,本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得浙江工业大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献。的个人和集体,均己在文中以明确方式标明本人承担本声明的法律责任。_作者签名:
2、曰期月2夕曰学位论文版权使用授权书、本学位论文作者完全了解学校有关保留使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权浙江工业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于1、。保密口,在年解密后适用本授权书.2、不保密口。“”(请在以上相应方框内打V)’^'?作者签名?冰条岁日期:?推5月%曰?5导师签名:日期办仍#月4日浙江工业大学硕士学位论文铜对三角褐指藻电子传递干扰与氧化损伤的
3、研究摘要一由于人为活动加剧,铜已成为最为严重的重金属污染之,对水—生浮游植物产生毒害。作为水生系统的初级生产者藻类,被广泛用于污染物水生毒理评估。本研究以海洋模式藻三角褐指藻作为铜毒、生性测试对象,评价铜对其生理化、细胞、亚细胞结构以及基因水平所产生的影响。研究表明,铜抑制三角褐指藻的生长,并具有浓度依赖性。藻细胞暴露在10、20、40、60、80、100和150pMCu中96h后,抑制率分别°°、.。、4..。.8.1%20、为.1%、0.3%321/89%、552/、60%和63,我们1选取40和60aMCu进行后续研究。通过测定藻细胞中各
4、种金属离子含量,|与对照组相比,发现Fe、Na、M、K和Ca在40和6〇nM铜处理组中显g著增加,Mn在所有铜处理组中均显著下降,而Zn则在所有铜处理组中都无明显变化,表明铜破坏了藻细胞内的离子平衡。通过激光共聚焦显微镜观察及荧光强度检测表明,铜导致藻细胞产生大量ROS,造成藻细胞氧化损伤。同时MDA含量的增加,表明铜处理导致藻细胞膜结构受损。为证实Cu抑制藻生长与藻细胞分裂的相关性,我们通过流式细胞。/仪分析铜对藻细胞周期的影响研究发现,铜可以诱导藻细胞G0G1期向G2/M期过渡,加速藻细胞分裂;荧光定量PCR结果表明,铜诱导藻细胞分裂相关基因/
5、^H的表达。因此,铜抑制藻细胞数量的生成是通。过氧化损伤而破裂,而并没有抑制其细胞分裂而造成I浙江工业大学硕士学位论文铜可以扰乱电子传递,通过实时荧光定量PCR分析铜对呼吸及光合电子传递链相关基因iSD/G、cox3、“炉八、/w&D、waB、/pdF和AcL)表达影响。发现在20和40nM铜处理48h后所有基因表达均显著下调,而在铜处理%h后,所有基因表达显著上调,且呈浓。。度依赖性研究同时发现,Fe可以有效缓解铜对藻细胞产生的毒害关键词:铜毒性,三角褐指藻,氧化损伤,电子传递链,基因表达n浙江工业大学硕士学位论文COPPERDIS
6、TURBELECTRONTRANSFERANDINDUCEOXIDATIVEDAMAGEINPHAEODACTYLUMTRICORNUTUMABSTRACTBecauseoftheanthrooenicactivitiessuchasindustrialandpg,domesticwastesdisosalcoerminedrainaeandantifoulinaintsp,ppg,gpmininetccoeruhasbeenraduallaccumulateinauaticg,pp(C)gyqenvi
7、ronmentsandbecomeoneofthemosttoxicmetalsinhtolankton.pypJAlgaearetherimarroducersofauaiicsstemandhavebeenwidelpypqyyusedinecoloicalriskassessmenttoevaluatetheimactsofcontaminat
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