洪泽外国语中学备课笔记

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1、南京市秦淮中学高二生物备课人：俞志茹课　　题多聚酶链式反应扩增DNA片段备课时间2016.4.17上课时间2016.4.19总课时数1课程目标知识与技能1、了解PCR技术的基本操作2、理解PCR的原理3、讨论PCR的应用过程与方法在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中，应避免外源DNA污染，严格控制温度等反应条件情感态度与价值观通过对PCR实验的操作及结果分析，培养学生严谨的科学态度和实事求是的科研精神教学重点PCR的原理和PCR的基本操作教学难点PCR的原理教学过程一．课前准备学生复习DNA的结构和体内DNA复制的过程，填空并完成表格。1.DNA的结构：DNA的基本组成单

2、位：；DNA的结构模型，由脱氧核苷酸遵循形成，具有的特点。2.细胞内DNA复制条件分析：条件组分作用模板原料酶能量引物3.体内DNA复制的过程：、、。二．导入新课在现代生物技术中，DNA技术可谓是尖端技术。人类基因组计划、基因工程、基因诊断、基因检测、古生物鉴定等都离不开对DNA分子碱基序列的分析。而分析DNA5南京市秦淮中学高二生物备课人：俞志茹碱基序列，就需要一定量的DNA片段。怎样迅速获得足够量的DNA片段呢？今天我们来研究学习DNA分子的扩增技术――PCR技术。一．新课研学1.PCR技术简述（1）什么是PCR技术？这项技术的特点是什么？2.PCR技术的原理PCR技术扩增

3、DNA片段的过程，其实质就是在体外完成DNA片段的复制，这与体内DNA复制过程相似。学生展示课前准备的内容。1．1细胞内DNA复制条件分析：（投影展示学生作业）1．2细胞内DNA复制过程（1）DNA的反向平行结构：（结合教材图4－15）核苷酸分子的结构与方向性：（分子结构模式图）由核苷酸通过3,5-磷酸二酯键连接形成核苷酸长链：（模式图，体现方向性）。DNA双螺旋结构的反向平行结构：（2）DNA的复制过程:解旋：解旋酶、ATP，DNA两条链打开，，形成两条DNA单链。合成子链（延伸）：引物在DNA单链3’端与DNA配对结合，确保引物3’端与DNA单链准确配对；DNA聚合酶结合；

4、子链合成：DNA聚合酶从引物3’端开始，将配对的脱氧核苷酸连接起来。复旋：新合成的子链和母链重新形成双螺旋结构，形成新的DNA分子。［思考］DNA分子能准确复制的原因有哪些？3.PCR技术的基本过程学生观察教材P84的图Ⅳ―Ⅴ，基本了解PCR技术的基本过程。学生分组讨论交流，总结PCR技术的基本过程。（1）加入各种原料是什么？（2）PCR技术的过程哪三个步骤？分别是什么？5南京市秦淮中学高二生物备课人：俞志茹教师小结：变性复性延伸变性：在95℃时DNA解旋复性：在50℃时引物与DNA单链结合延伸：在72℃时合成DNA子链（两个引物间的序列）［思考］1.PCR技术中子链合成的方向

5、？2.PCR技术中的DNA聚合酶有什么特点？3.PCR技术中的引物种类有几种？作用是什么？4.缓冲液相当细胞内的什么成分？功能是什么？5.PCR体系中加入的Mg2+的作用是什么？6.PCR技术中，DNA的扩增方式是什么？三、当堂反馈1.标准的PCR过程一般分为变性、退火、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是（）A.94℃、55℃、72℃B.72℃、50℃、92℃C.50℃、92℃、72℃D.80℃、50℃、72℃2.关于DNA的复制，下列叙述正确的是（）A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5’端延伸DNA链B.DNA复制不需要引物C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进

6、行结合D.DNA的合成方向总是从子链的3’端向5’端延伸3.PCR过程中引物的作用是（）A．打开DNA双链B．催化合成DNA子链C．使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始复制D．提供模板4.TaqDNA聚合酶的特点是（）A．耐高温B．耐盐酸C．耐强碱D．不耐热5南京市秦淮中学高二生物备课人：俞志茹5.近十年来，PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如下图)，在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答：（1）加热使DNA双链打开，这

7、一步是打开________键，称为__________。 (2)当温度降低时，引物与模板________端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成两个DNA分子，此过程中原料是__________，遵循的原则是__________。 (3)PCR技术的必要条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还需要三个条件，即液体环境、适宜的________和________。(4)PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可分为、、三个步骤。课后反思：在本节课的教学设计上，可以先引导学生回忆