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时间:2018-10-30
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1、目录第1章前言11.1多糖11.1.1多糖概述11.1.2多糖提取11.1.3多糖分离41.1.5多糖纯度及相对分子质量的测定51.1.6多糖结构分析61.1.7多糖生物活性61.2本课题立题背景、研究意义及主要研究内容91.2.1立题背景、研究意义91.2.2研究内容10第2章虎眼万年青和刺五加多糖的提取工艺研究122.1实验材料122.1.1原料122.1.2试剂122.1.3仪器122.2实验方法122.2.1多糖含量测定方法122.2.2虎眼万年青多糖提取工艺考察142.2.3刺五加多糖提取工艺考察152.3结果与讨论152.3.1虎
2、眼万年青多糖提取工艺152.3.2刺五加多糖提取工艺262.4小结34第3章虎眼万年青和刺五加多糖的分离纯化及理化性质分析363.1实验材料363.1.1原料363.1.2试剂363.1.3仪器363.2实验方法373.2.1虎眼万年青和刺五加多糖分离纯化工艺流程373.2.2分级沉淀373.2.3除蛋白质383.2.4脱色383.2.5透析383.2.6离子交换柱层析393.2.7凝胶过滤柱层析393.2.8纯度鉴定403.2.9一般物理性质分析413.2.10多糖及糖醛酸含量测定413.2.11分子量测定423.3结果与讨论423.3.1
3、分级醇沉结果423.3.2DEAESepharoseFastFlow柱层析分离结果433.3.3SephadexG-75柱层析结果453.3.4纯度鉴定结果453.3.5一般物理性质分析结果463.3.6多糖及糖醛酸含量测定463.3.7分子量测定结果分析473.4小结47第4章虎眼万年青和刺五加多糖的结构初步分析484.1原料、仪器与试剂484.1.1供试材料484.1.2仪器484.1.3试剂484.2实验方法484.2.1红外光谱分析484.2.2单糖组成分析494.3结果与讨论504.3.1红外光谱分析504.3.2GC-MS测定单糖
4、组成结果514.3.3毛细管电泳测定单糖组成结果524.4小结54第5章虎眼万年青和刺五加多糖活性研究555.1仪器及药品555.2实验方法555.2.1总抗氧化活性测定555.2.2对羟基自由基的清除作用565.2.3对O2-抑制作用565.2.4对有机自由基DPPH的清除作用565.2.5对脾细胞增殖的影响575.3结果与讨论585.3.1多糖总抗氧化活性测定结果585.3.2对羟基自由基的清除作用测定结果595.3.3对O2-抑制作用测定结果615.3.4多糖对有机自由基DPPH·的清除作用结果625.3.5多糖对脾细胞增殖影响测定结果
5、635.4小结65参考文献66致谢72攻读学位期间研究成果73中文摘要I英文摘要III第1章前言1.1多糖1.1.1多糖概述多糖又称多聚糖,是由多个单糖基及糖苷键相连接而形成的高聚物,一般是由20个以上的单糖聚合而成,广泛存在于动物细胞膜、高等植物和微生物的细胞壁中,是构成生命的四大基本物质之一,与维持生命活动密切相关。蛋白质、核酸和多糖是重要的生物大分子,由于多糖的结构难以控制,再加上人们早期只是把多糖看作细胞结构成分和食物来源,使得人们对多糖的研究成为“生物化学中最后一个前言”。目前,以多糖结构、功能和药用价值为核心的糖工程被认为是继蛋白
6、质工程、基因工程之后生物化学和分子生物学领域中最后一个巨大的科学前沿[1-4]。至今,几百种天然多糖的发现已给人类提供了丰富的生物多聚体的宝库。多糖不但是动植物的主要结构支持物质(如甲壳动物中的几丁质、植物中的纤维素),而且也是生物体的主要能量来源(如淀粉、糖原),同时多糖也是工业上重要多聚体的原料来源(如食品工业上不可缺少的卡拉胶,工业上应用的田菁胶等等)。不但如此,多糖还具有复杂的多方面的生物活性与功能,多糖的糖链能控制细胞的分裂与分化,调节细胞的生长与衰老,特别是多糖作为广谱免疫调节剂在免疫疾病治疗上的应用[5]。现在国际上多糖研究以日
7、本、美国、德国和加拿大处于领先地位,我国多糖的研究虽然起步较晚,但在全国第一次糖的生化学术会议后,《糖复合物的生化研究技术》的出版,标志着我国在糖化学方面的研究工作已经有了一个较好的开端。1996年我国将“糖生物学”列为国家重点课题。研究对象包括植物类、动物类、真菌类、细菌等。研究范围涉及多糖的分离纯化、理化性质、结构分析、免疫学、药理学以及临床应用等。经过半个多世纪的发展,活性多糖的研究取得了重大进展,建立了一系列活性多糖的提取、纯化方法、生物活性测试方法、结构分析方法,发现了许多具有重要生理活性的多糖,研究的广度和深度在不断的发展。随着多
8、糖化学和多糖生物学的深入研究,活性多糖将会进入一个新的时代,将为人类的健康和安全提供更为有力的帮助。1.1.2多糖提取多糖作为一大类天然产物,广泛存在于植物、动物、
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