现代农业生物技术对转基因

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1、现代农业生物技术对转基因（GM）植物对增强的抗虫或抗除草剂，抗逆，或营养改善方而的发展开辟了新的途径（Sthrestha，HWU,王，刘，张和，2008年）。在许多国家，转基因作物根据这些国家的标准进行安全评估，以批准用作食品和/或饲料。为了便于快速审批和风险评佔在20世纪90年代早期转基因食品的’实质等同性”概念由联合国（FAO）和世界卫生组织（WHO）的粮食和农业组织推出。1993年，该组织的经济合作与发展组织（OECD）制定1实质等同性性概念（Gayen,萨卡，达塔，和达塔，2013年）。比较评

2、估的一个主要重点一直是作物纟II成（赫尔曼，Chassy,与帕洛特，2009年）的全面的评估。转基因（GM）作物的组成分析仍是过所有的评价中对这些材料的安全性评估的一个重要组成部分。本研究的目的是检测遗传修饰和调查比对转基因玉米与非转基因玉米含有的多个基因性状的成分分析（NK603,MON88017?MON810和MON89034?MON88017）。3、4（三种转基因介绍）草甘磷玉米（RR玉米，事件NK603）是转基因玉米耐受对除草剂草甘膦通过导入一个（EPSPS）编码5-enolpymvyl莽草酸

3、-3-磷酸合酶的修饰基因（EPSPS）,参与莽草酸生物化学酶的产生通路，用于生产芳香族氨基酸。VT3玉米（MON88017MON810）是玉米白交系的杂种FIresultingfrom交叉MON810MON88017.The混合堆叠MON88017MON810表示threenovel蛋白：CP4EPSPS赋予耐草廿膦theherbicide和6-内毒素Cry1Ab蛋白，whichconfers抵抗欧洲玉米螺和otherlepidopterans，和Cry3Bbl,其赋予抗CornRootworm。的杀

4、虫蛋内质的Cry1Ab,产生bythe从MON810cry1Ab基因的基因。杀虫proteinCry3Bbl,巾cry3Bbl基因产生和CP4EPSPSprotein由CP4EPSPS基因都从MON88017生产的。VT3PRO（MON89034MON88017）是玉米耐受toglyphosate基于除草剂和能抵抗鞘翅目和鱗翅目的昆虫，还含有CrylA.105,Cry2Ab2,和Cry3Bbl蛋白。这种特定的转基因玉米中含有5种不同的转基因特性:抗鱗翅目，鞘翅目对抗草甘膦耐受性和一定量的任抗生素，对t

5、ance卡那霉素和相关抗生素的Bt毒素的两种转基因毒素。非转基因杂交玉米对照（B73?MO17）2.1玉米（玉米）样本转基因玉米样品从2011年中的所有转基因玉米样品进行现场试验采集生长在美国的推广试验（得克萨斯A&MAgrilife研究与推广屮心在科珀斯克里斯蒂，得克萨斯州南部，USA）的儿个分开的地块。非转基因（近等基因）玉米B73XMO17是从两个相关的非转基因的自交系，B73和MO17,这两者都缺乏所有的转基因玉米样品屮发现的转基因元件的交叉形成的混合体，用作通过PCR进行组成分析对照。G2.

6、2.TransgenesdetectionbyPCR2.2转基因PCR检测干种子磨碎，并储存在-20°C直到使用。使用的DNeasy植物小型试剂盒（QiagenGmbH公司希尔登，德国）进行DNA的提取。的DNA的纯度和浓度，使用的是超微呈分光光度计测定（2000型，ThermoScientific,威尔明顿，DE,USA）。对每个玉米样品进行三个独立的DNA提収法进行提取。两个降压多重PCR（2SD-多重PCR）用于最佳扩增35S启动子，NOS终止子和醇溶蛋白基因的靶片段。玉米醇溶蛋白组成基因用作阳

7、性对照。对于事件特异性引物（NK603,MON810,MON88017和MON89034）,单重PCR反应被使用。PCR测试一式三份进行。川于PCR分析所有引物序列列于表lo7>82.2.ProteinanalysisbySDS—PAGE2.3.通过SDS-PAGE蛋白质分析按照Laemmli的方法（1970）进行十二烷基硫酸钠（SDS）聚丙烯酰胺凝胶电泳。玉米粉样品直接在SDS-PAGE样品缓冲液中溶解（含P-巯基乙醇）并在65C加热30分钟。样品进行13000转离心以除去不溶物。每个加样控加蛋白3

8、0ug。进行SDS-PAGE分析一式两份。92.4.成分和营养分析2.4.1。近似成分和矿物质分析玉米样品的近似组分在沃德实验室测定（AOAC）的程序丨20051。水分含量通过在100C烘箱中干燥至恒重时损失重量进行测定。灰分通过在马弗炉中（550°C）焚化已知重量的样品（方法号930.05）[AOAC,2005]测定。粗脂肪在索格利特萃取器中经石汕醚彻底提取己知重量的样品进行测定（沸点40〜60°C）（方法号930.09）[AOAC,20051。蛋白质