牡丹籽油脂和蛋白的提取、精制和性能研究

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1、牡丹籽油脂和蛋白的提取、精制和性能研究-->1绪论1.1牡丹及牡丹籽概况刘建华等[8]用溶剂萃取获得牡丹籽油，甲酯化后经毛细管气相色谱-质谱联用法(GC-MS)分析油脂肪酸的组成，发现其主要成分为亚麻酸和亚油酸，其相对含量分别为57.931%和28.121%，另有众多研究也得出相似结论[3,9-13]。亚麻酸和亚油酸作为人体的必需脂肪酸，在人体不能合成，必须依靠食物供给，早在1982年就有研究提出，人类缺乏亚麻酸会导致神经系统的异常[14]。另有众多研究表明，亚油酸和亚麻酸具有降低血脂、预防动脉粥样硬化和心脑血管疾病的功能[15-17]。而牡

2、丹籽油作为一种罕见的富含亚麻酸的植物油，具有很高的开发价值。另外，瞿文婷等[18]利用小鼠模型，证明牡丹籽油对急性肝损伤有保护作用。而朱文学等[19]对牡丹籽油的毒理学研究进一步表明，牡丹籽油无急性毒性、遗传毒性和亚急性毒性，具有很高的食用安全性。目前对于牡丹籽蛋白的研究尚少，庞雪风等[21,22]研究了超声波辅助法和糖化酶辅助法提取牡丹籽蛋白的工艺，采用超声波辅助法提取牡丹籽蛋白的最优工艺为：料液比1:10，超声波功率180G和碱性蛋白酶Alcalase3.0T，均由诺维信（中国）生物技术有限公司生产；大孔树脂：BS-80-1,BS-80-

3、2,BS-67-1和D201-C，均购自辽源新材料有限公司；SDS-PAGE凝胶电泳试剂盒，购自江苏碧云天生物技术研究所；二苯代苦味肼基自由基（DPPH），Sigma公司生产石油醚（沸程30-60℃）、石油醚（沸程60-90℃）、正己烷、乙酸乙酯、丙酮、硼酸、氢氧化钠、盐酸、苯酚、浓硫酸、无水乙醇、乙酸铅、硫酸钠、乙醚，碘，硫代硫酸钠，碘酸钾，冰醋酸，碘化钾，氢氧化钾，氯仿，甲醇，三氟化硼乙醚，氯化钠，考马斯亮蓝、十二烷基硫酸钠，磷酸，硫酸亚铁，双氧水，邻苯三酚，邻二氮菲等均为分析纯2.2实验仪器DL-5低速大容量离心机（上海安亭科技仪器厂）

4、；DL-360B智能超声波清洗器（上海之信仪器有限公司）；BC-R202旋转蒸发仪（上海贝凯生物化工设备有限公司）；FW-80高速万能粉碎机（天津泰斯特仪器有限公司）；DZF-6050真空干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）；JA103电子分析天平（上海精科天平厂）；UV2000紫外分光光度计（尤尼柯仪器有限公司）；S3500激-->光粒度分析仪（美国Microtrac公司）；DELTA320pH计（上海梅特勒-托利多仪器有限公司）；恒温水箱（常州荣冠实验分析仪器厂）；气相色谱-质谱联用仪（日本岛津）；UltraScanPro1166高精度分光

5、测色仪（美国Hunterlab公司）；Scientz-10冷冻干燥机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；J-715圆二色性仪（日本JASCO公司）；恒温磁力搅拌器（金坛市医疗仪器厂）；BS-1E温控摇床（金坛市瑞华仪器有限公司）；凝胶成像仪（美国BIO-RAD公司）；Agilent1100氨基酸自动分析仪（美国安捷伦公司）；in时达到顶峰。提取时间过短，油脂溶出不完全造成得率偏低，而提取时间过长，可能使得籽粉中蛋白质和油脂相互作用增强，反而影响油脂分子的溶出，且长时间超声波作用对于油脂品质也不利，故选择提取时间15min进入下一步实验。四种不同

6、树脂吸附所得的牡丹籽水解蛋白粉中蛋白质含量均达到80%以上，其中D201-C吸附所得水解蛋白的蛋白纯度高达91.64%，其次是BS-80-2；而水解蛋白中的糖含量，BS-80-2最低，为2.59%，201-C为3.58%，而其他两种均高于5%，由于水解液中糖含量较高，故所得水解蛋白粉中不可避免的会存在一些糖，而蛋白粉中含糖量太高会限制其在糖尿病、高血压等患者以及婴幼儿、老年人食品中的应用，故应尽量降低水解蛋白粉中的糖含量。四种树脂所吸附的水解蛋白的相对分子质量主要分布在1000以下，由于分子量小于1000的多为寡肽，而分子量在180-480之

7、间的为寡肽中的超低分子量肽，仅由2-4个氨基酸构成，多为高活性肽，故结合四种树脂对水解液的吸附率，D201-C所吸附的水解蛋白活性肽含量最高，是四种树脂中最适合吸附牡丹籽水解蛋白的。主要结论与展望主要结论1、超声波辅助溶剂萃取法可以有效的提高溶剂萃取法的提取效率，且油得率高于水酶法。2、水酶法提油条件温和，高效简单，无污染，无残留，是一种绿色环保的提油方法，且所得油脂品质较高，对于不饱和脂肪酸的保护性较好，易于精炼。3、碱溶酸沉法提取的牡丹籽蛋白纯度较高，氨基酸组成丰富，且具有良好的功能性，适于开发。4、水酶法可以同时提取牡丹籽油脂和蛋白，对

8、于牡丹籽的综合利用意义重大，且采用大孔树脂吸附法回收的牡丹籽水解蛋白纯度较高，具有较强的体外抗氧化活性展望-->牡丹籽油是植物油中罕见的富含亚麻酸的油脂，具有良好的