紫外可见近红外分光光度仪

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1、紫外可见近红外分光光度仪培训教材目录基本原理概述朗伯比尔定律检测分类仪器知识及使用仪器基本组成及类型Lambda950介绍仪器操作指南基本原理光谱分析法是指在光（或其它能量）的作用下，通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。吸光光度法是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。概述概述在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法，主要有:紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸

2、收光波长范围200400nm（近紫外区），可用于结构鉴定和定量分析。可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围400750nm，主要用于有色物质的定量分析。红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围2.51000m,主要用于有机化合物结构鉴定。紫外-可见分光光度法通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。在吸收曲线中，通常选用最大吸收波长λmax进行物质含量的测定。对甲苯乙酮的紫外光谱图概述朗伯-比尔定律设入射光强度为I0，吸收光强度为Ia,透射光强

3、度为It，反射光强度为Ir，则I0=Ia+It+Ir由于反射光强度基本相同，其影响可相互抵消，上式可简化为：I0=Ia+It吸光度和透光度吸光度:为透光度倒数的对数，用A表示，即A=lg1/T=lgI0/It透光度：透光度为透过光的强度It与入射光强度I0之比，用T表示：即T=It/I0朗伯-比尔定律当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即A=κ·c·l式中比例常数κ与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度，l为透光液层厚度。当l以cm，c以g/L为单位，κ称为吸

4、光系数，用a表示，a的单位为L/(g·cm)。A=a·c·l当l以cm，c以mol/L为单位，κ称为摩尔吸光系数，用ε表示，ε的单位为L/mol.cm，它表示物质的浓度为1mol/L，液层厚度为1cm时，溶液的吸光度。A=ε·c·l配制不同浓度的标准溶液，由低浓度至高浓度依次测定其吸收光谱，作一定波长下浓度与吸光度的关系曲线，在一定范围内应得到通过原点的直线，即标准曲线。通过标准曲线可求得未知样品的浓度。朗伯-比尔定律偏离朗伯-比耳定律的因素（1）入射光为非单色光（2）溶液的不均性实际样品的混浊，加入的保护胶体，蒸馏水中的微生物，存在散射

5、以及共振发射等，均可吸光质点的吸光特性变化大。（3）光程的不一致性光源不是点光源，比色皿光径长度不一致，光学元件的缺陷引起的多次反射等，均造成光径不一致，从而与定律偏离。目前仪器检测分类有机分析中的应用：络合物组成、推测化合物的分子结构等，在医药和有机合成领域有较大作用可以采用不同的化学分析方法，对钢铁、合金及其它金属中锰、磷、硅、镍、钼、铬、钛、铜、铅、锌、铁、铝、镁、稀土等无机金属元素进行定量及定性分析模拟部分太阳光的波长范围，对玻璃、镀膜、织物等进行比较分析例如：太阳镜镜片有机化合物的紫外-可见吸收光谱与紫外-可见吸收光谱有关的电子

6、有三种，即形成单键的σ电子、形成双键的π电子以及未参与成键的n电子。跃迁类型有：σ➔σ*、n➔σ*、π➔π*、n➔π*四种。其相对能量大小次序为：σ→σ*>n→σ*>π→π*>n→π*有机化合物的电子跃迁不饱合机化合物的电子跃迁类型为n→π*，π→π*跃迁，吸收峰一般大于200nm。饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ→σ*，n→σ*跃迁，吸收峰一般出现在真空紫外区，吸收峰低于200nm，实际应用价值不大。有机化合物的紫外-可见吸收光谱生色团：是指分子中可以吸收光子而产生电子跃迁的原子基团。人们通常将能吸收紫外、可见光的原子团或结构系统定义为

7、生色团。有机化合物的紫外-可见吸收光谱助色团：是指带有非键电子对的基团，如-OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等，它们本身不能吸收大于200nm的光，但是当它们与生色团相连时，会使生色团的吸收峰向长波方向移动，并且增加其吸收强度。有机化合物的紫外-可见吸收光谱吸收带：在紫外光谱中，吸收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分子轨道的种类，可将吸收带分为四种类型。R吸收带R带是共轭分子的含杂原子基团的吸收带，如C=O，N=O，N=N等基团，有n→π*跃迁产生，为弱吸收带，摩尔吸光系数K一般小于100L·mol-1·cm-1K吸收

8、带共轭体系的π→π*跃迁所产生的吸收带，如共轭烯烃，烯酮等。K带的吸收强度很高，一般K大于10000L·mol-1·cm-1。B吸收带芳香和杂环化合物π→π*的特征吸收带。例如：苯的B吸收带在