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时间:2018-10-27
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1、肉苁蓉组织培养研究进展及应用前景摘要:肉苁蓉由于采挖过度而濒临灭绝,组织培养是合理利用肉苁蓉,防止其资源枯竭的有效方法。组织培养研究较多的是荒漠肉苁蓉和盐生肉苁蓉,分别对这两种肉苁蓉愈伤组织的诱导、培养基的优化和药用成分的诱导条件等方面的研究进行综述,介绍了应用组织培养生产肉苁蓉药用成分的经济价值和生态效益,以及利用组织培养进行肉苁蓉快速繁殖的实践意义,浅析了肉苁蓉大规模细胞培养的产业化前景。关键词:肉苁蓉;组织培养;荒漠肉苁蓉;盐生肉苁蓉;苯乙醇苷类化合物肉苁蓉为列当科多年生寄生草本植物,全球分布
2、火约有22种[1],我国共有4种和1变种[2],分别为荒漠肉苁蓉Cis-tanchedeserticolaY.C.Ma>盐生肉灰蓉C.salsa(C.A.Mey.)Benth.etHook.f.、管花肉灰蓉C.tubulosa(Schenk)R.Wight、沙灰蓉C.sinensisG.Beck和白花盐灰蓉C.salsa(C.A.Mey.)Benth.etHook.f.var.albiflo-raP.F.TuetZ.LLou。肉灰蓉是中药复方中用量最大的中药材之一,特别是荒漠肉苁蓉、盐生肉苁蓉和管花
3、肉苁蓉被大景应用,并且大景出口日本、韩国及东南亚地区。近年来由于狂采滥挖,肉苁蓉野生资源遭到严重破坏。目前,虽然肉苁蓉人工种植已取得重要进展,但受各种条件的限制,仍不能足市场需求。应用组织培养的方法,可以在不受寄主和季节气候等条件影响的情况下大量生产肉苁蓉细胞,是解决市场需求和保护野生资源的有效途径,具有很高的经济价值和生态效益。近年来研究人员在肉苁蓉愈伤组织的诱导、愈伤组织最佳培养条件的探索和提高愈伤组织中药用成分等方面进行了不少工作,本文对相关的研究进行概述,并指出肉苁蓉大规模产业化的应用前景。
4、1肉苁蓉组织培养的研究进展肉苁蓉组织培养的主要0的是产业化生产肉苁蓉细胞及其药用成分,或者通过愈伤组织诱导植株再生为高产栽培提供种质资源。通过大规模细胞培养生产愈伤组织,从中提取药用成分,需要摸索诱导愈伤组织的培养条件、适宜愈伤组织快速生长的培养条件和提高药用成分量的培养条件,以分。作为另一个主要用途,体外培养种苗主要是通过组织培养的方法使种子在体外条件下萌发,再通过激素诱导愈伤组织发芽,产生人工种苗。这种方法可以提高种子的发芽率,大大提高人工栽培生活能力。苯乙醇苷类化合物(phenylethano
5、idglycosides,PhGs),是肉从蓉的次生代谢产物,也是其主要药效成分。肉苁蓉中PhGs的种类很多,有松果菊苷、麦角留苷、海胆苷、顺式麦角绍苷、昇麦角绍苷、乙酰基麦角绍苷、肉苁蓉苷等[3]。目前组织培养肉苁蓉的研究大多数都集中在提高PhGs产量方面。近年来兴起的生物转化系统生产药用成分的研宄在肉苁蓉PhGs的生产中也有应用。生物转化是利用生物体系,将加入到反应系统中的外源有机底物某一特定部位或功能基团进行特异性的结构修饰,以获得有价值的不同化学产物的工艺[4]。这方面的研宄对于产业化生产肉
6、苁蓉药用成分具有重要的意义。不同种肉苁蓉的愈伤组织中PhGs的种类和质量分数不同。在我国作为药用植物使用的主要有荒漠肉苁蓉、盐生肉苁蓉和管花肉苁蓉。研宄证明3种肉苁蓉均右补肾壮阳的作用[5]。其中荒漠肉苁蓉是《中国药典》规定的正品肉苁蓉,自古以来就作为药用植物大量使用。盐生肉苁蓉所含的PhGs与荒漠肉苁蓉类似,而管花肉苁蓉中所含PhGs的种类比前两种要少,但某些成分的量却比荒漠肉苁蓉要高[5],总体药用功效与荒漠肉苁蓉类似。目前组织培养中使用的外植体基本都来自荒漠肉苁蓉和盐生肉苁蓉。以下分别对这两种
7、肉苁蓉组织培养的研宄现状进行概述。1.1荒漠肉苁蓉组织培养的研究进展:目前已从荒漠肉苁蓉的茎、幼芽、鳞片、花瓣、子房、雄蕊和种子等多种组织和器官中诱导得到愈伤组织。对其诱导条件和继代培养条件进行研宄发现,温度、培养基、激素配比、pH值、光照和诱导子等对愈伤组织的培养和PhGs的合成都有影响。利用高温处理可以提高种子的愈伤组织诱导率并诱导其分化出芽[6]。1.1.1愈伤组织的诱导:影响愈伤组织诱导率的主要因素有外植体的种类和培养基、激素配比、温度、光照、pH值等培养条件。不同外植体诱导愈伤组织时,诱导
8、率和诱导条件都不相同。通过荒漠肉苁蓉茎、幼芽、鳞片、花瓣、子房、雄蕊和种子等多种组织和器官的比较发现,子房、茎无论在脱分化的时间,还是在愈伤组织的诱导率及生长状况上都比鳞片、幼芽好[7],而用种子进行愈伤组织的诱导较难,诱导率非常低[8]这可能是由于肉苁蓉的寄生性造成的,自然条件下肉苁蓉种子具有一个近球形胚,只有在宿主梭梭根穿入之后才能够萌发[9],因此从种子中诱导出愈伤组织需要克服其对寄主的依赖性。欧阳杰等研究了用荒漠肉苁蓉种子诱导愈伤组织的条件,发现在接种前剥去种
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