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时间:2018-10-27
《基质金属蛋白酶9在宫颈癌中的表达及意义.doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、关于建立企业年金制度的若干问题探讨论文联盟编辑。摘要:随着风,王晓敏,王英【摘要】目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP9)蛋白在宫颈癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测丽P9蛋白在18例正常宫颈上皮、20例宫颈原位癌、55例宫颈浸润癌中的表迗。结果MMP9在宫颈浸润癌中的表达率明显高于正常宫颈组织和宫颈原位癌(P)。丽P9的表迗与宫颈鳞癌不同临床分期、肿瘤大小、病理分级无显著性差异(P〉),而在宫颈浸润不同深度间及有无淋巴转移的差异有显著性(P【关键词】基质金属蛋白酶9(丽P9);宫颈癌;免疫组化TheexpressionandsignificanceofMMP
2、9incervicalcancerABSTRACT:ObjectiveTostudytheexpressionandsignificanceofmatrixmetalloprotEinase9(MMP9)incervicalcancer.MethodsTheexpressionofMMP9protEInwastestedbyusingimmunohistochemicalSPmethodinl8casesofnormalcervicalepithelium,20casesofcarcinomainsitusofcervix,and55casesofinvasivecer
3、vicalcancer.R9proteininesultsTheexpressionofMMPinvasivecervicalcancerwashigherthanthatinnormalcervicaltissueandcarcinomainsitusofcervix(P).TheexpressionofMMP9proteinwasnotrelatedtoclinicalstages,thesizeoftumoadingofinvasivecertitwasassociatedwivecervicalandlymphYWORDS:matrixmetal9);cervi
4、calcancer;randpathologicalgrvicalcancer(P>),buththedepthofinvasinodemetastases(PKEloproteinase9(IWMPimmunohistochemistry在肿瘤侵袭、转移过程中,细胞外基质(extracelluiarmatrix,ECM)的降解是肿瘤侵蚀正常组织和开始转移的重要途径。ECM的降解依靠蛋白水解酶,这些蛋白水解酶主要可分为4类,基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)是其中较为重要的一类。MMP9是丽Ps家族中的重要一员,又称IV型胶原酶
5、或明胶酶B,在MMPs家族中分子量最大,无活性的前体分子的分子量为92ku,具有酶学活性的蛋白质分子量为82ku,人类MMP9位于染色体20ql2-ql3,基因全长4506bp。大量研究表明,MMP9在多种恶性肿瘤中呈过度表迗,降解破坏ECM中最主要组份IV型、V型胶原和明胶,与肿瘤的浸润转移密切相关[1]。本研究通过免疫组织化学SP法检测丽P9在正常宫颈组织、宫颈原位癌、宫颈浸润癌中的表达,以探讨匾P9在宫颈癌浸润和转移中的作用及其临床价值。1材料与方法临床资料18例正常宫颈组织、20例宫颈原位癌及55例宫颈浸润鳞癌标本均来源于陕西省肿瘤医院2001年1月-XX年11
6、月手术标本或宫颈活检标本,均未行放疗或化疗,临床及病理资料完整,年龄32-64岁,平均年龄岁。按国际妇产科联盟(FIG0)的标准,55例宫颈浸润癌I期22例(%),II期33例(%)。病理分级I级8例(%),II级33例(%),III级14例(%)。肿瘤直径>4cm者32例(%),肿瘤直径主要试剂兔抗人丽P9多克隆抗体(浓缩型,用时稀释为1:100)、免疫组织化学染色试剂盒、浓缩型DAB试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。实验方法标本经lOOmL/L福尔马林固定,常规石蜡包埋,连续切片,厚5um,并行常规HE染色经病理科专家阅片复诊。免疫组织化学SP法按试剂盒说明
7、书进行。组织切片脱蜡至水,PBS缓冲液振洗3minX3;置于耐高温切片架上,放入已沸腾的高压锅中进行组织抗原热修复,盖上锅盖,扣上压力阀,继续加热至喷气,从喷气开始计时,2min后压力锅离开热源,冷却至室温,取出玻片,蒸馏水冲洗两次,PBS液振洗3minX3;30mL/LH202去离子水消除内源性过氧化物酶活性,室温下孵育lOmin,PBS缓冲液振洗3minX3;正常山羊血清封闭,室温孵育15min;加适当比例稀释的第一抗体,37°C孵育2h,PBS缓冲液振洗3minX3;加生物素标记的第二抗体,37°C孵育15min,PBS缓冲液振洗3
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