实验二 细菌基本形态及特殊结构观察

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1、实验二细菌基本形态和特殊结构观察一目的要求1了解普通光学显微镜原理及构造。2学习并掌握普通光学显微镜油镜的正确使用方法。★3用油镜观察细菌基本形态。4了解负染色原理、细菌芽孢染色基本原理，油镜观察细菌的荚膜、芽孢形态。5细菌运动性观察。二基本原理１　普通光学显微镜的结构２　普通光学显微镜的光学成象原理3荚膜染色4芽孢染色１　普通光学显微镜的结构（1)　机械系统包括镜座、镜臂、载物台、物镜转换器、镜筒及调节器等（2)　光学系统包括反光镜、聚光器、物镜、目镜等。２　普通光学显微镜的光学成象原理（1）显微镜

2、的放大倍数放大倍数：目镜的放大倍数与物镜的放大倍数之乘积。目镜：物镜低倍镜：10X高被镜：40X油镜：100X10X100X目镜物镜⑵　显微镜的分辨率油镜比低倍镜、高倍镜观察物体更清晰。原因：◆油镜分辨率高于低倍镜、高倍镜◆油镜汇聚光线的能力大于低倍镜、高倍镜◆分辨率是指显微镜能够分辨的最小距离即鉴别限度（R）R=λ∕（2NA）(λ为入射光波波长；NA为显微镜数值孔径)NA=η.sinθη为标本、物镜之间介质的折射率。θ为光轴上物点发出的光线与物镜有效直径两端最大夹角角度的一半。η低倍镜=η高倍镜=η空

3、气=1.0，η油镜η香柏油=1.52θ低倍镜<θ高倍镜<θ油镜，sinθ低倍镜

4、力的染料（孔雀绿）处理，并同时加热，使菌体以及芽孢均着色，后使菌体脱色，而芽孢保留原色，经复染（蕃红），菌体与芽孢分别以不同颜色显现。芽孢菌体菌体芽孢对有芽孢的菌体进行简单染色（只用一种染料染色）。菌体和芽孢着色情况如何？菌体芽孢三实验材料▲细菌基本形态标本片：大肠杆菌片枯草杆菌片八叠球菌片▲细菌特殊形态标本片：枯草芽孢杆菌芽孢片▲示范片观察：荚膜片观察悬滴法观察活细菌的运动四实验内容及步骤1细菌基本形态观察2细菌特殊结构观察3悬滴法观察活细菌运动1细菌基本形态观察学习油镜的正确使用方法。用油镜观察——

5、大肠杆菌枯草杆菌八叠球菌2细菌特殊结构观察学习油镜的正确使用方法。用油镜观察细菌特殊结构——枯草芽孢杆菌芽孢（油镜）钾细菌荚膜（高倍镜）（示范）荚膜菌体菌胶团菌体芽孢3悬滴法观察活细菌运动悬滴片制好后，用低倍镜调焦，换高倍镜观察。注意：视野中暗光观察。运动的菌体发亮。▲观察前准备：显微镜的准备和调试视野明亮▲低倍镜观察▲高倍镜观察（此步可以省略）▲油镜观察：加香柏油，油镜头浸入香柏油中后调焦▲显微镜油镜头的清洗和归位（二甲苯清洗）油镜使用主要步骤注意！！！——显微镜调焦方法五实验报告绘大肠杆菌枯草杆菌八

6、叠球菌形态示意图绘枯草芽孢杆菌芽孢形态示意图菌名：大肠杆菌放大倍数：16×100X细菌形态示意图绘图要求：①选择形态典型的部分细菌细胞绘图。②仅绘出细菌细胞轮廓，但不同细菌的细胞大小比例应适宜，且形态上应有所区分。③细菌与视野相对大小应符合实际，应将细菌细胞排布在视野中离开中心的部位（即绘空心图）。必须注明菌名、放大倍数。思考题（1）观察细菌染色片时应如何调节光线？（即如何调亮光，如何调暗光）（2）油镜观测时，是否可以用除香柏油以外的其它液体作介质？