化妆品微生物检验方法

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1、WORD文档下载可编辑一、总则1.范围本规范规定了化妆品微生物检验的基本要求。本规范适用于化妆品样品的采集、保存及供检样品制备。2.仪器和设备2.1天平。2.2高压灭菌器。2.3振荡器。2.4三角瓶，250mL。2.5玻璃珠。2.6琉璃棒。2.7刻度吸管，1mL、10mL。2.8研钵或均质器。2.9恒温水浴箱。3.培养基和试剂3.1生理盐水成分：氯化钠8.5g蒸馏水加至1000mL溶解后，分装到加玻璃珠的三角瓶内，每瓶90mL，103.43kPa(121℃15lb)20min高压灭菌。3.2SCDLP液体培养基成分：酪蛋白胨17g大豆蛋白胨3g氯化钠5g磷酸氢二

2、钾2.5g葡萄糖1g吐温807g蒸馏水1000mL制法：先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后，再与其它成分混合，加热溶解，调pH为7.2～7.3分装，103.43kPa(121℃15lb)20min高压灭菌。注意振荡，使沉淀于底层的吐温80充分混合，冷却至25℃左右使用。注：如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。3.3灭菌液体石蜡。3.4灭菌吐温80。4.样品的采集及注意事项4.1所采集的样品，应具有代表性，一般视每批化妆品数量大小，随机抽取相应数量的包装单位。检验时，应分别从两个包装单位以上的样品中共取10g或10mL。包装量小于20g的样品，采样量可适当增

3、加样品包装数量。4.2供检验样品，应严格保持原有的包装状态。容器不应有破裂，在检验前不得打开，防止样品被污染。4.3接到样品后，应立即登记，编写检验序号，并按检验要求尽快检验。如不能及时检验，样品应放在室温阴凉干燥处，不要冷藏或冷冻。4.4若只有一个样品而同时技术资料专业分享WORD文档下载可编辑需做多种分析，如细菌、毒理、化学等，则宜先取出部分样品做细菌检验，再将剩余样品做其它分析。4.5在检验过程中，从打开包装到全部检验操作结束，均须防止微生物的再污染和扩散，所用器皿及材料均应事先灭菌，全部操作应在无菌室内进行，或在相应条件下，按无菌操作规定进行。4.6如检

4、出粪大肠菌群或其它致病菌，自报告发出之日起该菌种及被检样品应保存一个月。5.供检样品的制备5.1液体样品5.1.1水溶性的液体样品，可量取10mL加到90mL灭菌生理盐水中，如样品少于10mL，仍按10倍稀释法进行。如为5mL则加到45mL灭菌生理盐水中，混匀后制成1：10检液。5.1.2油性液体样品，取样品10mL,先加5mL灭菌液体石蜡混匀，再加10mL灭菌的吐温80,在40℃～44℃水浴中充分混合，制成1：10检液。5.3固体样品称取10g，加到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡混匀，使其分散混悬，静置后，取上清液作为1：10的检液。如有均质器，上述水溶性膏

5、、霜、粉剂等，可称10g样品加入90mL灭菌生理盐水，均质1min～2min；疏水性膏、霜及眉笔、口红等，称10g样品，加入10mL灭菌液体石蜡，10mL吐温80,70mL灭菌生理盐水，均质3min～5min。二、菌落总数1.范围本规范规定了化妆品中菌落总数的检验方法。本规范适用于化妆品菌落总数的测定。2.定义本规范采用下列定义菌落总数（Aerobicbacterialcount）是指化妆品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等），1g(1mL)检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温

6、的需氧性菌落总数。测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进行卫生总评价的综合依据。3.仪器和设备3.1三角瓶，250mL。3.2量筒，200mL。3.3pH计或精密pH试纸。3.4高压灭菌器。3.5试管：15×150mm。3.6灭菌平皿：直径9cm。3.7灭菌刻度吸管，10mL、1mL。3.8酒精灯。3.9恒温培养箱：36℃±1℃。3.10放大镜。4.培养基和试剂4.1生理盐水：见总则中3.1。技术资料专业分享WORD文档下载可编辑4.2卵磷脂、吐温80-营养琼脂培养基4.2.1成分：蛋白胨20g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15g卵磷脂1g吐温807g蒸

7、馏水1000mL4.2.2制法：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温80,将其他成分（除琼脂外）加到其余的蒸馏水中，溶解。加入已溶解的卵磷脂、吐温80,混匀，调pH值为7.1～7.4,加入琼脂，103.43kPa(121℃15lb)20min高压灭菌，储存于冷暗处备用。4.30.5%氯化三苯四氮唑（2,3,5-triphenylterazoliumchloride,TTC）成分：TTC0.5g蒸馏水1000mL溶解后过滤，103.43kPa(121℃15lb)20min高压灭菌，装于棕色试剂瓶，置4℃冰箱备用。5.操作步骤5.1用灭菌吸管吸取1：10稀

8、释的检液2mL,分别注入