2010.11.3培训

《2010.11.3培训》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、微生物培训集团质量管理部孙英丽2010年11月3日主要内容金黄色葡萄球菌的检测沙门氏菌的检测志贺氏菌的检测单核细胞增生李斯特氏菌的检测金黄色葡萄球菌的检测金黄色葡萄球菌(StaphyloccocusaureusRosenbach)是人类的一种重要病原菌，隶属于微球菌科葡萄球菌属（Staphylococcus），可引起皮肤炎症及产生毒素。金黄色葡萄球菌的检测形态与染色：典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、无鞭毛，无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌的检测培养特性：金黄色葡萄球菌营

2、养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH7.4。耐盐性强，可在10-15%氯化钠培养基中生长。金黄色葡萄球菌的检测致病性：金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。其产生的肠毒素可引起食物中毒，呕吐和腹泻。金黄色葡萄球菌的检测抵抗力：金黄色葡萄球菌80℃加热30min能被杀死。其产生的肠毒素100℃加热30min不被破坏。要使其完全破坏需煮沸2h。金黄色葡萄球菌的检测检验流程25g(ml)样品+225m

3、l7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤，均质Baird-Parker平板（18~24h或45~48h），血平板（18~24h）36±1℃18~24h36±1℃涂片染色观察溶血BHI肉汤和营养琼脂小斜面血浆凝固酶试验报告金黄色葡萄球菌的检测增菌：耐盐性强（金黄色葡萄球菌适宜生长的盐浓度为5-7.5%）——7.5%氯化钠肉汤：呈混浊生长；——10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤：呈混浊生长。金黄色葡萄球菌的检测分离：——血平板36℃±1℃培养18h～24h——Baird-Parker平板（卵黄亚碲酸钾、胰蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、丙酮酸钠、甘

4、氨酸、氯化锂(LiCl·6H2O)、琼脂)36℃±1℃培养18h～24h或45h～48h。金黄色葡萄球菌的检测Baird-Parker平板：§菌落直径为2mm～3mm；§颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈；§用接种针接触菌落有似奶油至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落，但无混浊带及透明圈；§长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥；金黄色葡萄球菌的检测金葡菌在BAIRD-PARKER平板上金黄色葡萄球菌的检测血平板：§菌落较大，圆形，光滑凸起，湿润；§

5、颜色呈金黄色，有时呈白色；§菌落周围有透明溶血圈；§有些菌需要经过再次传代后才有透明溶血圈。金黄色葡萄球菌的检测金葡菌在血平板上注意：有些金葡菌菌落首次分离并不表现溶血和明显色素，若菌落形态像，镜下形态可疑，建议转种血平板一次，则会出现典型形态。金黄色葡萄球菌的检测涂片染色金黄色葡萄球菌的检测新鲜配置的兔血浆0.5mlBHI培养物0.2ml~0.3ml振荡摇匀，置36℃+1℃温箱或水浴箱；间隔30min观察，共6h；血浆凝固酶试验金黄色葡萄球菌的检测血浆凝固酶试验－结果判定如呈现凝固(即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块)或凝固体积大于原体积

6、的一半，被判定为阳性结果；同时以已知血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培养物作为对照。结果如可疑：挑取营养琼脂小斜面的菌落到5mLBHI，36℃±1℃培养18h～48h，重复前面的凝固酶试验。金黄色葡萄球菌的检测冻干血浆（北京陆桥）每支安瓿管中加0.5ml灭菌生理盐水置完全溶解，然后加入0.3ml待检液，于37℃培养，在6h内定时观察凝血情况。金黄色葡萄球菌的检测结果报告：报告在25g(mL)样品中检出或未检出金黄色葡萄球菌。格式：金黄色葡萄球菌(25g)：检出或未检出金黄色葡萄球菌(25mL)：检出或未检出沙门氏菌的检测沙门菌

7、属是肠杆菌科中最重要的病原菌。它是一群抗原结构、生化特性相似的革兰氏阴性杆菌。血清型繁多，目前已发现的沙门氏菌有2500多个血清型和变种。沙门氏菌的检测形态与染色性：革兰氏阴性杆菌，无芽胞,一般无荚膜。除鸡瘟沙门菌（S.pullorum)和鸡沙门菌(S.gallinarum)外均有动力。为周身鞭毛，并多数有菌毛。大小：1-3μm×0.5-1μm。培养与生化特性营养需求不高，需氧或兼性厌氧。普通营养培养基上均能生长，能够利用柠檬酸盐作为碳源。在普通肠道选择性平板上基本上形成无色菌落。菌落中等大小，半透明，表面光滑，边缘整齐或呈锯齿状。沙门

8、氏菌的检测沙门氏菌的检测不分解乳糖，大部分菌株产H2S，发酵葡萄糖产酸不产气。最适培养温度为37℃，最适pH7.2～7.6。耐受胆盐，在粪便、土壤、食品、水中可生存5个月至二年之久。抵抗力：本菌60℃经20