药敏试验方法简介

《药敏试验方法简介》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、药敏试验方法简介耐药菌问题日益严重“目前药物失去作用的速度与科学家发现新药物的速度差不多。”摘自WHO报告抗微生物治疗面临的困境抗药性问题始终存在细菌不断获得新的耐药机制以往对付耐药性的策略收效不显一、抗菌药物敏感试验（AST）预测抗菌治疗的效果；指导抗菌药物的临床应用；发现或提示细菌耐药机制的存在，指导合理用药，避免产生或加重细菌的耐药；监测细菌耐药性，分析耐药菌的变迁，掌握耐药菌感染的流行病学，以控制和预防耐药菌感染的发生和流行。（1）抗菌药物的选择在我国主要遵循临床实验室标准化委员会（ClinicalandLaboratoryStand

2、ardsInstitute,CLSI）制定的抗菌药物选择原则A组：对特定菌群常规测试并报告的药物B组：可常规测试、选择性报告的药物C组：替代性或补充性药物U组：仅用于泌尿道感染的抗菌药物葡萄球菌属抗菌药物药敏试验推荐分组葡萄球菌属抗菌药物A组苯唑西林（头孢西丁纸片）、克林霉素、青霉素、红霉素、复方新诺明、B组四环素、万古霉素、利奈唑胺C组环丙沙星、庆大霉素、氯霉素、奎奴普汀/达福普汀U组氧氟沙星、呋喃妥因、磺胺异恶唑、甲氧苄啶肠杆菌科抗菌药物敏感试验推荐分组肠杆菌属抗菌药物A组氨苄西林、头孢唑林、庆大霉素B组阿米卡星、奥格门丁、哌拉西林+他唑

3、巴坦、头孢呋新、头孢吡肟、头孢西丁、环丙沙星、亚安培南、哌拉西林、复方新诺明C组头孢他啶、氯霉素、氨曲南、四环素U组羧苄西林、氧氟沙星、呋喃妥因假单胞菌属的抗菌药物药物敏感推荐分组假单胞菌抗菌药物A组头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林B组阿米卡星、氨曲南、头孢吡肟、环丙沙星、亚安培南、哌拉西林+他唑巴坦C组U组氧氟沙星不动杆菌属的抗菌药物药敏试验推荐分组不动杆菌属抗菌药物A组氨苄西林/舒巴坦、头孢他啶、亚胺培南、环丙沙星、庆大霉素B组阿米卡星、哌拉西林+他唑巴坦、头孢吡肟、头孢噻肟、复方新诺明、哌拉西林、四环素肠球菌属抗菌药物药敏试验推荐分组肠球菌

4、属抗菌药物A组氨苄西林、青霉素B组万古霉素、利奈唑胺C组庆大霉素(120μg)、链霉素(300μg)U组环丙沙星、四环素、呋喃妥因肺炎链球菌抗菌药物药敏试验推荐分组肺炎链球菌抗菌药物A组青霉素、苯唑西林(1μg)、红霉素、复方新诺明B组万古霉素、克林霉素、四环素、氧氟沙星C组氯霉素、利奈唑胺药敏试验的折点亦遵照每年最新公布的CLSI标准进行，分为敏感（S）、耐药（R）和中介（I）。敏感：分离菌株能被测试药物使用推荐剂量时在感染部位通常可达到的抗菌药物浓度所抑制耐药：分离菌株不能被测试药物常规剂量可达到的药物浓度所抑制；分离菌株可能存在某些特定

5、的耐药机制；治疗研究显示药物对分离菌株的临床疗效不可靠耐药＝治疗无效；敏感≠治疗有效二、抗菌药物的种类及作用机制三、药敏试验方法学纸片扩散法（K-B法）稀释法（MIC法）肉汤稀释法常量稀释法微量稀释法琼脂稀释法E-test法1.手工试验2.自动仪器药敏系统纸片扩散法（K-B法）原理：抑菌圈的大小反映受试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关。耐药中介敏感RISLog2.MICd1d2抑菌圈直径（mm)MIC与抑菌圈直径的线性关系准备抗菌药物纸片和水解酪蛋白（M-H）培养基；挑取孵育16～24小时已分纯菌落，置于生理盐水管中，

6、振荡混匀后校正浓度至0.5麦氏标准；用无菌棉拭子蘸取菌液，在试管内壁旋转挤去多余菌液，然后在MH琼脂表面均匀涂布接种3次，每次旋转平板60度，最后沿平板内缘涂抹1周；平板在室温下干燥3～5min，用无菌镊子或商品化的纸片分配器将含药纸片紧贴于琼脂表面；35℃孵育16～24小时，量取抑菌圈直径；根据抑菌环的直径，按照CLSI标准判读，报告敏感、中介、耐药。2021/7/823CLSI对K-B法的标准化规定纸片药物含量、细菌接种浓度、培养基、平皿厚度、孵育时间、环境、判定标准、质控方法等；常规测试、报告的抗生素。不同的药判定标准不同；不同的菌判定

7、标准也不同。2021/7/8扩散法药敏影响因素培养基pH值7.2-7.4营养程度（肠球菌能生长）厚度抗生素拮抗剂含量（用29212监控）钙镁离子含量、锌离子含量（用27853氨基糖苷类和亚胺配能结果监控）菌悬液浓度高抑菌环缩小（假耐药）浓度低则扩大（假敏感）细菌纯度气体环境普通细菌放CO2时由于碳酸的影响，药物活性受到影响，形成假敏感或假耐药苛养菌放普通环境生长不良，导致假敏感培养时间粘液性铜绿需48小时测量方法稀释法以一定浓度的抗菌药物与含有受试菌的培养基进行一系列不同倍数稀释（通常为双倍稀释），培养16～24h后，通过观察细菌生长现象来测

8、得药物对受试菌的最低抑菌浓度（MIC）。2021/7/8稀释法（MIC法）MIC法：分为常量法和微量法常量法：肉汤稀释法、琼脂稀释法微量法：微量肉汤稀释法简化双浓度