非洲猪瘟实验室诊断

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1、非洲猪瘟实验室诊断国家外来动物疫病研究中心中国动物卫生与流行病学中心AfricanSwineFever,ASF定义非洲猪瘟是家猪、疣猪、欧洲野猪和美洲野猪的一种传染性极强的出血性疾病。所有年龄的猪都易感。——世界动物卫生组织可表现为最急性、急性、亚急性和慢性四种形式严重程度与毒株、猪种及流行时间的长短有关急性型以高热、食欲废绝、皮肤发绀、网状内皮系统出血为特征，发病后2-10天内死亡，病死率可高达100%临床上，与古典猪瘟非常相似，难以区分目前没有疫苗！！！2017/5/15只感染猪家猪和欧亚野猪非常易感–感染后存活的猪可能变为无症状的携带者非洲的野生宿主能持续感染很长时间并且没有

2、临床症状软蜱是自然界中的贮主并且可以作为传播媒介法典中将非洲猪瘟的潜伏期定为15天。2017/5/15重要性OIE动物卫生法典要求必须报告的动物疫病我国动物疫病名录一类动物疫病我国《中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》明确重点防范的外来动物疫病病原–非洲猪瘟病毒科中唯一成员–AsfarviridaeAsfivirusASFV–兼具虹彩病毒和痘病毒的某些特性–唯一核酸为DNA的虫媒病毒–只有一个血清型特点之一：基因组大170~190kb蓝耳病病毒15kb12倍猪瘟病毒12kb15倍GenomeCSFV口蹄疫病毒8kb24倍GenomeFMDV病原病原特点之二：基因多变基因

3、组两端各有一个高变区，基因型多达22个特点之三：抵抗力强温度：60℃20分钟；56℃70分钟25-37℃数周4℃>1年冻肉数年到数十年pH：4——11.5无血清4——13.4有血清未熟肉品、腌肉、泔水中可长时间存活病原乙醚、氯仿等脂溶剂可破坏囊膜使其失活临床症状最急性型急性型亚急性型慢性型2017/5/15临床诊断最急性型无临床症状，突然死亡急性型（强毒株）发烧（41-42°C）食欲减退不愿活动局部皮肤变红或变蓝色腹泻呕吐呼吸困难流产死亡率高（10-100%）仔猪发生ASF，耳、鼻、唇、腿发红，神经症状，数小时内死亡。Mityana,Uganda,2010临床诊断亚急性型（中等毒力

4、毒株）症状同急性型，但较轻死亡率低持续时间长（3周）慢性型（低毒力毒株）消瘦或发育迟缓，体弱偶见体温升高，波状热呼吸困难，湿咳怀孕母猪流产多处皮肤局部红斑、溃疡耳部、腹部、大腿内侧可能凸起或坏死易继发感染，如继发引起肺炎和关节炎感染后能康复，但终身带毒死亡率低，可见血清转阳临床诊断各种毒力的毒株均可导致流产胎儿可能全身水肿胎盘、皮肤、心肌或肝脏可能有淤血点诊断病理诊断脾脏肿大易碎暗红色至黑色胃、肝、肾各部位淋巴结肿大、出血；水肿肺、肝、膀胱胆囊充盈结肠系膜肾皮质出血点、出血斑出血瘀点瘀斑慢性型纤维素性心包炎，并可见出血点肺局部肉变，实变肺部局部肉芽肿，形成结节图1：ASF猪尸体底部

5、的发绀病变。图2：耳尖的发绀病变。图3：血性腹泻（血痢）。图4：急性ASF死猪肺小叶间的水肿。图5：胃的基底膜淤血（急性）图6：典型肿大脆化脾。（黑浆果脾，急性ASF）图7：病猪脾（上）与正常脾大小的比较。（急性ASF）图8：急性ASF猪肿大的褐色脾。（巴西品种）图9：肾淤斑及出血点（急性）图10：肾盂及肾乳头部的出血斑（急性）图11：肾盂处散在的出血点（急性ASF）图12：肿大、出血的肝胃淋巴结，可出见有血凝块。（急性）图13：肝胃淋巴结切面，肿大并呈暗红色。（急性ASF）图14：心包积液及心包肌层有散在的出血点。（急性ASF）图15：胆囊水肿（急性ASF）图16：肺部可见肉芽肿

6、病变，形成一结节（慢性ASF）图17：肺实变区（慢性ASF）图18：心包脏层附有纤维素，而且可见出血点（慢性ASF）鉴别诊断高致病性蓝耳病猪皮炎肾炎综合征（PDNS）由PCV-2引起细菌性败血症香豆素中毒真菌毒素中毒。。。。2017/5/15VirusAb感染表现出临床症状携带者病毒血症:感染后2-3天到8天，持续很长时间（数月）特异性抗体:从感染后的7-11天至数月，甚至数年排毒:从感染早期（第2天）以后持续很长时间。甚至康复后。ASF感染的主要特征猪(野猪和家猪)软蜱实验室诊断实验室诊断病原学血清学病毒分离—血细胞吸附试验直接免疫荧光法（FAT）普通PCR和荧光定量PCR双抗体

7、夹心ELISA测定ASFV抗原间接ELISA测定ASF特异性抗体阻断ELISA检测ASF特异性抗体唯一确诊单位：国家外来动物疫病研究中心免疫印迹间接免疫荧光测抗体实验室诊断血清样品析出的血清×不合格血液样品分离好的血清单独包装，并一一编号合格血液样品实验室诊断病原学样品抗凝血淋巴结脾脏肾脏骨髓实验室诊断的安全原则保障人员的安全穿戴：眼罩、手套、实验服、口罩和鞋套等行为：洗手、禁止聊天，实验室内禁止食用食物和饮料等了解化学试剂的特性和潜在的危险保障样品的安全防止样品交叉