血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶―9在肝癌组织中的表达及其临床意义

《血管内皮生长因子与基质金属蛋白酶―9在肝癌组织中的表达及其临床意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、管内皮生长因子与基质金属蛋白酶一9在肝癌组织中的表迖及其临床意义摘要：目的：检测肝癌患者血液及组织中血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-9（画P-9）的表迗，分析比较二者在肝癌中的表迗及意义。方法：选取在我院住院行手术切除的肝癌患者40例作为实验组，非肝癌患者40例作为对照组。采用酶联免疫吸附法和免疫组织化学法检测入组患者血液及组织中VEGF、MMP-9的表迖。结果：采用酶联免疫吸附法对两组患者VEGF、MMP-9的水平进行检测，结果发现，实验组患者血液中VEGF、丽P-9明显高于对照组，差异有统计学意义（P0.05）。1.2实验方法1.2.1酶联免疫吸附法检

2、测两组患者血液中VEGF、画P-9的表迗取入组患者的静脉血，离心后冻存。计算出需要的板孔数；试剂盒常温放置30min；标准品稀释；每个浓度均设5个复孔，加样；配液；洗涤；显色；终止；酶标仪以450nm的波长处测量吸光值；绘制线性回归方程，计算样品浓度。1.2.2免疫组织化学法检测两组患者组织中VEGF,MMP-9的表达标本切除后立即取100mg标本，在-80°C超低温冰箱冻存备用。福尔马林固定；脱水、透明；浸蜡、包埋；切片、贴片、烤片；脱蜡、脱水；高压热修复；阻断：3%过氧化氢孵育lOmin；封闭：山羊血清封闭液室温孵育lOmin；加一抗50ul室温静置lh;加辣根过氧

3、化物酶标记的二抗50ul静置lOmin；加链霉亲和素-过氧化物酶50ul静置lOmin;显色；终止；苏木素复染，盐酸酒精分化；常规脱水、透明；封片；显微镜下观察1.3判断标准以已知的该指标的免疫组化染色阳性片作阳性对照，以PBS缓冲液代替一抗作阴性对照，HE切片作对照观察。VEGF、丽P-9阳性结果判定以细胞核不染色，细胞膜或胞质内出现棕色或棕黄色颗粒为阳性染色，阴性（-）:染色细胞数＜10%;弱阳性（+）:染色细胞数11%〜25%;阳性（++）:染色细胞数26%〜50%;强阳性（+++）：染色细胞数＞50%。以上均以（-）为阴性；（+）+++）为阳性。图像分析：计算机

4、图像系统拍照，每张切片随机选取5个视野，并记录。2.结果2.1酶联免疫吸附法检测两组患者血液中VEGF、MMP-9的表迗采用酶联免疫吸附法对两组患者VEGF、MMP-9的水平进行检测，结果发现，实验组患者血液中VEGF、圖P-9明显高于对照组，差异有统计学意义（P[6]ChellaiahMA，MaT.Membranelocalizationofmembranetype1matrixmetalloproteinasebyCD44regulatestheactivationofpromatrixmetalloproteinase9inosteoclasts[J].Biome

5、dResInt,2013，2013：302392.[7]CayabyabFS，GowribaiK，WalzW.Involvementofmatrixmetalloproteinases-2and-9intheformationofalacuna-likecerebralcavity[J].JNeurosciRes,2013，91(7)：920-933.[8]SunC,WangQ,ZhouH,etal.AntisenseMMP-9RNAinhibitsmalignantgliomacellgrowthinvitroandinvivo[J].NeurosciBull,201

6、3，29(1):83一93.[9]KesanakurtiD,ChettyC，RajasekharMaddirelaD，etal.FunctionalcooperativitybydirectinteractionbetweenPAK4andMMP-2intheregulationofanoikisresistance,migrationandinvasioninglioma[J].CellDeathDis,2012，3：e445.[10]ZhuangT,ChelluboinaB，PonnalaS，etal.Involvementofnitricoxidesynthase

7、inmatrixmetalloproteinase-9-and/orurokinaseplasminogenactivatorreceptor-mediatedgliomacellmigration[J].BMCCancer,2013，13：590.