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《基于液相色谱―质谱联用技术的多囊卵巢综合征患者血清脂质组学分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、基于液相色谱一质谱联用技术的多囊卵巢综合征患者血清脂质组学分析摘要多囊卵巢综合征是育龄期妇女最为常见的内分泌以及代谢紊乱疾病，是女性不孕的主要原因之一。多囊卵巢综合征患者临床存在很大的异质性，其致病机理尚未完全阐明。本研究基于反相液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱联用技术（RPLC/Q-TOF-MS），对74例多囊卵巢综合征患者和54例正常女性的血清进行了脂质组学分析，定性鉴别出15类314种脂质化合物。数据采用非参数检验寻找潜在的差异化合物，p23）和非肥胖组（BMI彡23），即4组：非肥胖正常组（36例）、肥胖正常组（18例）、非肥胖PCOS组（39例）、肥
2、胖PCOS组（35例）。2.3样本预处理配制含内标的甲醇溶液，内标质量浓度分别为：PC38:0为0.67ug/mL,PE34:0为0.33Pg/mL,LPC19:0为0.33pg/mL,SM12:0为0.17yg/mL,TAG45:0为0.53ug/mL,Cer17:0为0.53ug/mL,FFA16-d3为0.67ug/mL,FFA18-d3为0.67ug/mL。血液样本的预处理：血样于4°C下解冻后取40uL于2mL离心管中，加入300PL含有内标的甲醇溶液（冰上操作），涡旋30s，加入1基于液相色谱一质谱联用技术的多囊卵巢综合征患者血清脂质组学分析摘要多
3、囊卵巢综合征是育龄期妇女最为常见的内分泌以及代谢紊乱疾病，是女性不孕的主要原因之一。多囊卵巢综合征患者临床存在很大的异质性，其致病机理尚未完全阐明。本研究基于反相液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱联用技术（RPLC/Q-TOF-MS），对74例多囊卵巢综合征患者和54例正常女性的血清进行了脂质组学分析，定性鉴别出15类314种脂质化合物。数据采用非参数检验寻找潜在的差异化合物，p23）和非肥胖组（BMI彡23），即4组：非肥胖正常组（36例）、肥胖正常组（18例）、非肥胖PCOS组（39例）、肥胖PCOS组（35例）。2.3样本预处理配制含内标的甲醇溶液，内标质
4、量浓度分别为：PC38:0为0.67ug/mL,PE34:0为0.33Pg/mL,LPC19:0为0.33pg/mL,SM12:0为0.17yg/mL,TAG45:0为0.53ug/mL,Cer17:0为0.53ug/mL,FFA16-d3为0.67ug/mL,FFA18-d3为0.67ug/mL。血液样本的预处理：血样于4°C下解冻后取40uL于2mL离心管中，加入300PL含有内标的甲醇溶液（冰上操作），涡旋30s，加入1mL甲基叔丁基醚，室温下振荡1h。加入2501^水，涡旋308，于4°（3以12000r/min离心10min。取上清液400nL于1.
5、5mL离心管中冻干。复溶时先加入40uL二氯甲烷-甲醇（2:1，V/V），再加入120uL含5mmol/L乙酸铵的乙腈-异丙醇-水（65:30:5，V/V），涡旋30s，离心后，取60PL上清液于装有内衬管中的玻璃瓶中用于进样。质量控制样本（QC）平行地穿插在整个分析过程中，用于评价整个分析过程的重复性。QC样本来自全部74例PCOS患者和54例正常女性血样的混合。用QC样本平衡仪器，待仪器响应稳定后再进行样本的分析，每10个样本插入1个QC样本。2.4基于LC-MS的脂质组学分析条件UPLC条件:流动相A相为含10mmol/L乙酸铵的乙腈-水（6:4，V/V
6、）,B相为含10mmol/L乙酸铵的异丙醇-乙腈（9:1，V/V）o梯度洗脱程序：0〜15.5min,32%B；15.5〜15.6min,85%〜97%B;15.6〜18.1min,97%B；18.1〜20.1min,32%B。流速为0.26mL/min。柱温为55°C,样本室温度为10°C。进样量为5uL。Mass条件：在全扫获得一级谱图的同时进行数据相关采集模式（IDA）获得二级谱图。正离子模式扫描范围为100〜1500Da,质量偏差为50mDa。离子源雾化气Gasl和辅助气Gas2都为344.75Pa,气帘气CurtainGas为241.33Pa,温度为
7、500°C,喷雾电压(Ionsprayvoltagefloating,ISVF)为5500Vo去簇电压(Declusteringpotential,DP)为80V，碰撞能(Collisionenergy,CE)为35V。负离子模式扫描范围为90〜1500Da，质量偏差为50mDa。离子源雾化气Gasl和辅助气Gas2都为379.23Pa,气帘气为241.33Pa，温度为600°C，喷雾电压ISVF为-4500V。去簇电压DP为-100V，碰撞能CE为45eV。2.5数据处理原始数据采用美国ABSCIEX公司LIPIDVIEWVersionl.2软件进行定性鉴定
8、，根据保留时间、精确质量数、二级质谱进
