蒙药阿给生药及炭药中总黄酮的含量测定

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1、蒙药阿给生药及炭药中总黄酮的含量测定张婉，唐丽，谢坤，崔箭【摘要】目的对蒙药阿给生药及炭药中的黄酮类成分进行初步的定性、定量分析。方法采用显色反应进行定性检识，并以芦丁为对照品，采用紫外分光光度法测定总黄酮含量。结果阿给生药及炭药均含有黄酮类成分，但两者所含主要黄酮类成分的类型有所差异；生药与炭药的总黄酮含量分别为4.78%，2.26%，生药总黄酮含量约为炭药的2倍。结论炮制对阿给药材中黄酮类成分类型及总黄酮含量有一定的影响。分光光度法简便灵敏，重现性良好，适用于阿给总黄酮的含量测定。【关键词】蒙药阿给；总黄酮；定性检识；含量测定　　Abstract：Obje

2、ctiveToidentifyanddeterminethetotalflavonoidsinrapleseasuredthroughUVspectroscopyusingrutinascontrol.ResultsThemainspeciesofflavonoidsinraeeffectonthespeciesandthecontentoftotalflavonoidsinAgei.Spectrophotometryethodforcontentdeterminationoftotalflavoniods.　　Keyination　　阿给为菊科蒿属植物冷蒿A

3、rtemisiafrigidaETTLERTOLEDO公司）；旋转蒸发仪（德国Heidolph公司）；6202型高速粉碎机（北京环亚天元机械技术有限公司）；索氏提取器（北京博美玻璃仪器厂）。　　1.2材料蒙药阿给（冷蒿）购自内蒙古药材采购供应公司，内蒙古自治区中蒙医医院蒙药药房鉴定，炭药由北京普生霖药业有限公司按文献方法〔4〕代为炮制。芦丁标准品由北京药品生物制品检定所提供，纯度为99.2%，其他试剂均为AR级，由北京化学试剂公司提供。　　2方法与结果　　2.1样品液的制备精密称取阿给生药和炭药各1.000g，分别置索氏提取器中，加250ml70%乙醇，热回流

4、提取2h，完成虹吸5次，提取液定量转移至250ml容量瓶中，用70%的乙醇定容，待测。　　2.2黄酮类成分的定性分析　　2.2.1方法采用显色反应对阿给生药及炭药中的黄酮类成分进行定性分析，检识方法如下〔5〕：　　盐酸+镁粉实验：取供试液1ml于试管中，加入少许镁粉，再加4～5滴浓盐酸，水浴2min显色（同时做空白对照）。　　乙酸镁实验：用玻璃棒蘸取供试液涂于滤纸上，吹干，喷1%乙酸镁的甲醇溶液，加热干燥，在紫外灯下观察。　　氢氧化钠实验：取供试液1ml于试管中，加入4%氢氧化钠溶液5滴，观察现象。　　硝酸铝实验：用玻璃棒蘸取供试液涂于滤纸上，吹干，喷洒1%硝

5、酸铝溶液，观察，再置紫外灯下观察。　　浓硫酸实验：取供试液1ml于试管中，加入浓硫酸数滴，振荡混匀，观察现象。　　2.2.2结果显色反应结果见表1。　　表1阿给生药及炭药中黄酮类成分的定性检识结果（略）　　*示有荧光　　定性分析结果表明：阿给生药及炭药均含有黄酮类成分，但两者所含黄酮类成分的类型有所差异，生药以黄酮、黄酮醇、查耳酮、异黄酮为主，通过炒炭炮制后，黄酮、黄酮醇类成分减少，而主要以查耳酮、异黄酮为主。　　2.3总黄酮的含量测定〔6〕以芦丁为对照品，采用紫外分光光度法测定阿给生药及炭药中的总黄酮含量。　　2.3.1芦丁标准储备液的配制精密称取120℃减

6、压干燥至恒重的芦丁标准品10mg，置于100ml容量瓶中，加适量70%乙醇溶解并定容至刻度，摇匀，得0.1mg·ml-1的芦丁标准储备液。　　2.3.2最大吸收波长的选择分别量取2.0ml芦丁标准储备液和样品液置于3支10ml试管中，加入3ml70%乙醇,摇匀后加入5%亚硝酸钠0.3ml，摇匀，放置6min，加入10%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，放置6min，再加入4%氢氧化钠溶液1ml，摇匀，放置15min后，以相应的试剂做空白对照，在分光光度计上进行全波长扫描，比较标准品和样品的扫描曲线，确定以510nm为最大吸收波长来进行阿给总黄酮含量的测定。　　2.3

7、.3标准曲线的绘制精密量取芦丁标准储备液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，分别置于10ml试管中，加70%乙醇补足5ml，按“2.3.1”项所述的方法进行显色，以溶剂为空白对照，在紫外可见分光光度计上于510nm波长处测定吸光度。结果见表2。　　表2芦丁标准品浓度与吸光度（略）　　以吸光度（A）为纵坐标，浓度（C）为横坐标绘制标准曲线，用最小二乘法做直线回归，得回归方程A=10.942C+0.0019，R2=0.9996。结果表明芦丁在0.015～0.076mg·ml-1浓度范围内具有良好的线性关系见图1。　　2.3.4精密度实验取同一供试品

8、溶液按上述方法在波长510nm处，以试