结核杆菌特异性细胞免疫反应检测(酶联免疫法)临床应用探讨

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1、结核杆菌特异性细胞免疫反应检测（酶联免疫法）临床应用探讨［摘要］目的比较结核杆菌特异性细胞免疫反应检测（A.TB检测）和结核菌特异性抗体检测在结核诊断中的应用价值。方法选取2014年7月〜2015年12月来我院感染科就诊的结核病或疑似结核病患者113例；选取同期我院体检中心的健康志愿者20名作为对照。将其分为结核病组（65例）、非结核病组（48例）、健康志愿者组（20名），所有受试者均进行平行检测，采用A.TB检测和结核菌特异性抗体检测，非结核病组和健康对照组还要进行PPD试验。结果A.TB检测对结核病辅助诊断的敏感度为86.27%，特异度为75.15%,结核菌特异性抗体检测分别为73.91

2、%和59.46%；两种方法阳性预测值和阴性预测值比较，差异有统计学意义（x2=3.941,P=0.047；x2=5.268,P=0.022）oA.TB检测及结核菌特异性抗体检测均与PPD皮试结果呈正相关（r=0.280,0.253,均P［关键词］结核病；Y干扰素释放试验分析技术；A.TB检测［中图分类号］R52［文献标识码］A［文章编号］1674-4721(2016)10(c)-0146-03[Abstract]ObjectiveTocomparetheapplicationvalueofspecificcellularimmuneresponsetotuberculosisbacilli(

3、A.TBdetection)andMycobacteriumtuberculosisantibodyindiagnosisoftuberculosis.MethodsFromJuly2014toDecember2015，113tuberculosis(TB)suspectswhovisitedtheinfectiousdiseasesectionofourhospitalwererecruited.Duringthesameterm，20healthyvolunteerswereincludedascontrol.Ofthe133subjects，65caseswereinTBgroup,4

4、8caseswereinnon-TBgroupand20caseswereincontrolgroup.AllsubjectsweretestedbybothA.TBandTB-Ab，whiletuberculinskintest(TST)wasperformedamongsubjectsinnon-TBgroupandcontrolgroup.ResultsThesensitivityandspecificityofA.TBwere86.27%and75.15%,respectively.WhilethesensitivityandspecificityofTB-Abwere73.91%a

5、nd59.46%，respectively.ThereweresignificantdifferencesbetweenthoseofA.TBandTB-Ab(x2=3.941，P=0.047andx2=5.268,P=0.022,respectively).BothA.TBandTB-AbhadpositivecorrelationwithTSTresults(r=0.280，P纳入标准：①符合“结核病”西医诊断标准或排外诊断标准者；②年龄17〜65岁者；③依从性良好并自愿签署知情同意书者。排除标准：①合并心脑血管、肾和造血系统等严重原发性疾病及精神病患者；②对本试验用药过敏者;③有人免疫

6、缺陷病毒感染、急性病毒感染者；④有免疫抑制剂用药史者；⑤妊娠妇女P］。诊断标准：依据《中华人民共和国卫生行业标准肺结核诊断标准（WS288-2008）》《中国结核病防治规划实施工作指南（2008年版）》《临床诊疗指南?结核病分册》［8］。所有受试者均同时进行A.TB和结核菌特异性抗体检测，非结核病组和健康对照组还要进行PPD试验，所有受试者遵守赫尔辛基宣言和临床药理试验管理（GCP）规范，获得南昌县人民医院伦理委员会批准。1.2仪器与试剂水浴锅、酶标仪、A.TB试剂盒（海口维?v瑷生物研宄院）、结合抗体试剂盒、结核菌素。1.3方法采用A.TB试剂盒进行IGRA检测。将肝素钠抗凝的全血4ml颠

7、倒混匀，分别吸取1ml全血加入阴性刺激剂（N）、阳性刺激剂（P）、ESAT-6和CFP-10（T）3个反应管中，将混匀后的N、P、T管在37°C水浴箱中培养22〜24h，取上清血浆50ul分别加入己加好50U1稀释液的目标孔中，37°C孵育lh后洗板，分别加入100ul检测抗体工作液，37°C孵育30min后再次洗板，分别加入100P1亲和素-辣根过氧化物酶，37°0孵育301^11后洗板，然后加入混合好的底