大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定(实验报告)

《大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定(实验报告)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、大黄中蔥醌类成分的提取、分离和鉴定一、实验目的(丨)熟悉蔥醌类成分的提収分离方法(2)掌握pH梯度提取法的原理和操作技术(3)学习蒽醌类化合物鉴定方法二、实验器材材料及试剂：大黄粗粉、浓硫酸、NaHCO3、Na2CO3、NaOH、浓盐酸、乙酸乙酯、石油醚、乙醚、普通滤纸、薄层层析硅胶板(2.5cmX10cm)、广泛PH试纸、剪刀、铅笔、尺子、点样毛细管、样品管等。仪器：500mL圆底烧瓶、球形冷凝管(30cm)、橡皮管、烧杯、滴管、层析缸(广口瓶)、250mL分液漏斗、布氏漏斗、抽滤瓶、水浴锅、集热式磁力搅拌器、磁子、循环水式多用真空泵、铁架台等。三、实验原理大黄为蓼科植物，味苦，性寒，具有泻

2、热通肠、凉血解毒、逐瘀通经等功效。其主要成分为为蔥醌化合物，含量约为3%〜5%,大部分与葡萄糖结合苷，游离苷元有大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等。其中，大黄酸具有羧基，酸性最强；大黄素具有，酚羟基，酸性第二；芦荟大黄素连有羟甲基，酸性第三；大黄素甲醚和和大黄酚的酸性最弱。根据以上化合物的酸度差异，可用碱性强弱不同的溶液进行梯度萃取分离。大黄酸R,=Hr2=cooh大黄素Ri=CH3r2=oh芦荟大黄素r,=ch2ohR，=H大黄素甲醚Ri=CH3r2=och3大黄酚Ri=CH3r2=h四、实验内容大黄素的提取、分离流程大黄粗粉10g20%H2SO4150ml

3、加热lh，抽滤、干

4、燥滤饼

5、150ml乙醚回流提取1h乙醚层I5%NaHCO3萃取水层（紫红色）乙醚层[HC1大黄酸沉淀（粗品）5%Na2CO3水层（红色）乙酿层HC10.25%NaOH大黄素沉淀（粗品）水层（红色）芦荟人黄素、大黄鹼、人黄素甲醚沉淀（混合物）具体操作步骤1.游离蔥醌的提取（1）酸水解：称取大黄粗粉10g，加20%H2SO4水溶液150mL,在水浴上加热1小时,放冷，抽滤，滤饼用NaOH溶液洗至近中性（pH约为6），于70°C干燥后，研碎，賈250mL圆底烧瓶屮，加入乙醚150mL回流提取1小时（调45°C,回流即可），得到乙醚提取液。（2）蔥醌类成分的提取：乙醚提取液经薄层层析检杏有大黄酸、芦荟

6、大黄素、大黄素、大黄素甲醚和大黄酚。薄层板为硅胶一CMC粘合板，展开剂为石汕醚（60〜9（rc）:乙酸乙酯（7:3）近水平或直立展开，在可见光下，可看到四个斑点。其中最上面黄色斑点为大黄酚和大黄素甲醚的混合物，在此条件下，不能分开，其余3个斑点依Rf值（由大到小）的顺序是大黄素（橙色斑点）、芦荟大黄素（黄色斑点）、大黄酸（黄色斑点），记录图谱并计算Rf值。2.PH梯度萃取分离（1）将乙醚提取液加入250mL分液漏斗中（使用前先检漏），以35mL5%NaHCO3水溶液萃取三次，乙醚层经薄层层析检查（展开剂同上），指示己提尽大黄酸后，合并三次NaHCCb萃取液，用浓盐酸酸化至PH2-3左右，析出大

7、黄酸沉淀。（注意：加酸时应缓慢加入，以防酸液溢出，如出现分层现象，需将上层乙醚蒸去才能析出固体）。抽滤后，刮下颗粒并称重。（2）经5%NaHCO3水溶液萃取后的乙醚层，继以35mL5%Na2CO3水溶液萃取三次，乙醚层经薄层检查（展开剂同上），指示已提尽大黄素后，合并三次Na2CO3萃取液，用浓盐酸酸化至PH2-3左右，析出大黄素沉淀。（酸化时注意操作同前）。抽滤后，刮下颗粒并称重。（3）经5%Na2CO3水洛液萃取过后乙醚层以35mL0.25%NaOH水溶液萃取四次，乙醚层经薄层检查（展开剂同上），指示己提尽后，合并三次NaOH萃取液，用浓盐酸酸化至PH2-3左右，析出芦荟大黄素、大黄酚和大

8、黄素甲醚沉淀混合物。（酸化时注意操作同前）。抽滤后，刮下颗粒并称重。3.样品鉴定（1）碱液试验分别取各蔥醌结晶数毫克置于样品管中，加2%氢氧化钠溶液1ml,观察颜色变化。凡有互为邻位或对位羟基的蔥醌呈蓝紫至蓝色，其它羟基蔥醌呈红色。五、注意事项：（1）游离蒽醍的提取要控制温度，回流不宜太剧烈。（2）pH梯度萃取分离时，以保证提取充分，可以用薄层色谱作监测。（3）注意碱液浓度及萃収时的静置时间对实验结果的影响。:据记录、结果讨论与分析:5cmRf大黄素=3.60/5=0.72Rf芦荟大黄素=2.0%=0.41Rf大黄酸=1.4%=0.291、大黄酸沉淀2、大黄素沉淀3、芦荟大贲索、大黄酚、大贲素

9、甲醚沉淀混合物0.9mg3.2mg2.9mg分别取各上述沉淀（蔥醌结晶）数毫克置于样品管中，加2%氢氧化钠溶液lml后，观察到各样品管中溶液均呈红色、但第1根管中颜色略淡。七、思考题1、简述大黄屮5种游离羟基蔥醌化合物的酸性与结构的关系。A大黄酸R,=HR，=COOHA*B大黄素Ri=CH3R，=OHC芦荟大黄素r,=ch2ohR.=HD大黄素甲醚r,=ch3r2=och3E大黄酚酸性：A>B>C