论文-邵帅-正交试验法优选小蓬草总生物碱提取工艺

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1、正交试验法优选小蓬草总生物碱提取工艺邵帅，严铭铭*，吴程彦，刘畅，付美丽，田双，王天宁（长春中医药大学，吉林长春130117）[摘要]目的：优选小蓬草中总生物碱的提取方法与工艺。方法：采用单因素和正交试验法，考察提取次数、提取时间、提取溶剂浓度及料液比对总生物碱提取率的影响。结果：最终确定提取工艺为90%乙醇回流提取3次，每次1h，料液比为12：1。结论：该方法分离总生物碱是一种经济简便、效率较高的方法。[关键词]小蓬草；生物碱；正交试验；提取工艺OptimizationofExtractionTechnologyofTotalA

2、lkaloidsofConyzacanadensisL.Cronq.ByOrthogonalTestShaoShuai,YangMing-ming*,WanZhi-qiang,Liuchang,(ChangchunUniversityofTraditionalChineseMedicine,ChangchunJilin130117,China)[Abstract]Objective:TooptimizeextractiontechnologyoftotalalkaloidsinConyzacanadensisL.Cronq.Met

3、hod:Usingsinglefactorandorthogonaltesttoinvestigatetheeffectoftheextractiontimesandtime,theconcentrationofthesolutionandsolid-liquidratioonextractionamountoftotalalkaoids.Results：Thebestextractionconditionsasfollows:90%ethanolbackwardflowingthreetimesfor1h,liquidratio

4、is12:1.Conclusion:Themethodsofextractionofalkaloidswithalcoholareeconomy、convenientandhighlyefficient.[KeyWord]ConyzacanadensisL.Cronq.;alkaoids;orthogonaltest;extractiontechnology小蓬草为菊科植物小白酒草ConyzacanadensisL.Cronq.[1]的干燥全草，又名加拿大蓬、小白酒草、小飞蓬、祁州一枝蒿。广泛分布于中国各地。全草入药具有清热利尿、

5、散瘀消肿之功效，用于治疗肠炎、痢疾、传染性肝炎、胆囊炎、中耳炎等症[2]。近年来本课题组对该药材进行了深入研究，已分离出黄酮、生物碱、三萜、有机酸及挥发油等四十余种化合物[3-5]。本研究拟在前期工作的基础收稿日期：基金项目：国家重大新药创制专项（2009ZX09103-323）作者：邵帅（1979～），女，副教授，博士研究生，主要从事：药物化学、中药化学及新药研究开发工作。Tel:13689822307E-mail:ss36038612@163.com。通讯作者：严铭铭（1968～），女，教授。上，用乙醇从小蓬草中提取总生物碱，

6、并以甜菜碱为对照品，用雷氏盐比色法[8]测定其含量，同时采用正交试验法对提取条件进行优化。1实验材料与仪器1.1仪器UV-1700型分光光度计（日本岛津公司）；METTLER-AE240型电子分析天平（瑞士METTLER公司）；BUCHI旋转蒸发仪（瑞士BUCHI公司）1.2材料与试剂小蓬草采于吉林省长白县，经长春中医药大学姜大成教授鉴定为菊科小白酒草属植物小白酒草ConyzacanadensisL.Cronq.的干燥全草。甜菜碱对照品（购于中国药品生物制品检定所，批号110894-200503）；利英纳克盐（国药集团化学试剂有限

7、公司）；试剂均为分析纯。2实验方法与结果2.1小蓬草总生物碱的含量测定采用雷氏盐比色法。原理是利用小蓬草总生物碱在酸性条件下转化成生物碱阳离子B+，该离子与雷氏盐反应，生成不溶于水的生物碱雷氏铵盐沉淀，分离沉淀，以丙酮溶解，此生物碱雷氏铵盐丙酮溶液在521nm处有最大吸收，通过紫外分光光度计测定吸光度（A），计算雷氏铵盐含量，并换算成总生物碱含量。2.1.1对照品溶液制备精密称取甜菜碱对照品133.1mg，置于100ml容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度,摇匀即得。2.1.2供试品溶液制备精密称取小蓬草粗粉10g，加入乙醇100m

8、l，加热回流提取2次，每次1h，合并提取液，过滤，滤液蒸干，即得小蓬草总生物碱提取物。取上述提取物2g，置于100ml容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度,摇匀即得。2.1.3检测波长的确定精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2ml，置于100ml烧杯中