hplc常见问题

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1、HPLC常见问题和对策一对实验人员十分有用HPLC色谱常见问题1.用HPLC进行分析时保贸时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？2.液相色谱中峰fli现拖尾或fli现双峰的原因足什么？3.HPLC灵敏度不够的主耍原囚及解决办法4.做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在？如何解决？5.我域近更换丫另一种牌号的ODS柱，虽然分离情况仍可以，但保留时间不重现，为什么？6.我购买的HPLC柱验收测试时柱压过髙，请问为什么？7.色谱双峰产屯的可能及判断和处理8.色谱柱中的流动相会排干呵？9.使用PEEK(polyetheretherketone)管

2、路和接头需变注意什么问题？10.液相色谱梯度洗脱中柱温的影响有那些？11.为何基线会漂移12.规则的基线噪音是如何产生的13.不规则的基线噪音是如何产生的14.保留时间漂移的故障排除15.力何出现肩峰或分叉？16.为何出现鬼峰？17.为何出现峰拖尾？18.为何出现峰展宽?19.除丫流速外，还有哪些因尜能引起压力改变？20.什么是强溶剂、弱溶剂？21.怎样冰会使峰位发生重排？22.除丫在线脱气常用的实验室脱气人式还冇哪些？23.评价一个色谱柱的蝻基本指标有那些？24.什么是时间常数？25.力什么在实验过程中有时会出现倒峰？26.为何会出现“胖”峰和平头峰？怎

3、样避免？27.什么是次级保衔效应？28.前延峰的发生及处理？29.峰变宽的原因？30.柱下•衡慢的常见原因仓哪些？31.用内柚法实验时对内称物的要求有哪些？32.管子切割与安装注意祺项？33.什么是HPLC的“无限直径效应”？34.如何评价一台检测器？35.如何简单判断比例阀是否内漏？1.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？欠丁漂移问题：①温度控制不好，解决A法足采用恒温装置，保持柱温恒定②流动相发生变化，解决办法足防止流动相发生蒸发、反应等③柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡欠丁•快速变化问题①流速发生变

4、化，解决办法足重新设定流速，使之保持稳定②泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。③流动相不合适，解决办法力改换流动相或使流动相在控制室内进行适当浞合2.液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？①筛板堵塞或柱失效，解决办法足反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。①存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子5.我最近更换了另一种牌号的ODS柱，虽然分离情③可能柱超载，减少进样量。况仍可以，但保留时间不能重现，为什么？这足因为被分析物可能具冇形成氢键的能力。尽管过去几年來，填料的制造技术有了极人的提髙，但3.HPLC灵敏度不够的主要原

5、因及解决办法不同的厂商的ODS填料表面硅醇基的浓度不同。正①样品量不足，解决办法为增加样品量足这些硅醇基可能与样品发生相互作川。凶此，同一②样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性被分析物中的各组分在不同牌号的ODS柱卜.的相对质改变流动相或柱子保留时间就可能不同。在流动相中加入少量竞争物，③样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调如三乙基胺（TEA）,将会使硅醇基的成键能力饱和，整波忪或改换检测器从而能保证不同牌号柱子卜.的相对保留时间具冇较④检测器衰减太多。调整衰减即可。好的重现性。⑤检测器时间常数太人。解决办法力降低时间如分离情况可以，系统稳定，达到系统

6、适用性耍参数求，就不必保留时间的重现。⑥检测器池窗污染。解决办法力清洗池窗。⑦检测池中冇气泡。解决办法力排气。⑧记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。6.我购买的HPLC柱验收测试时柱压过高，请问为什⑨流动相流量不合适。调整流速即可。么？⑩检测器与记录仪超出校iEilh线。解决办法力柱压过髙足HPLC柱用户敁常碰到的问题。其原检斉记录仪与检测器，重作校正Ilh线。因有多方面，而且常常并不足柱子木身的问题，您可按下面步骤检斉问题的起因。①拆去保护预柱，看柱压足否还髙，否则足保4.做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在？如何解护柱的问题，若柱压仍髙，再检斉;决

7、？②把色谱柱从仪器卜.取下，看压力足否下降，①泵内有空气，解决的办法足清除泵内空气，否则足管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检斉；对溶剂进行脱气处理；③将柱子的进出口反过來接在仪器卜.，用10倍②比例阀失效，更换比例阀即可；柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不耍连接检测器，③泵密封垫损坏，更换密封垫即可；以防固体颗粒进入流动池）。这时，如果柱压仍不下④溶剂中的气泡，解决的办法足对溶剂脱气，降，再检斉；只用子使川过的柱子。必耍时改变脱气人法；④更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的⑤系统检漏，找出漏点，密封即可；溶剂或样品含冇颗粒杂质，正足这些杂质将筛板堵塞⑥梯度

8、洗脱，这时压力波动足正常的。引起压力卜.升。若柱压还髙，请与厂商联