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《quantity one定量分析和成像系统使用说明》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、Bio-RadQuantityOne软件应用讲义GELEQ凝胶成像使用指南1.打开主机电源与计算机电源.2.点击凝胶成像软件,进入QUANTITYONE操作界面.3.在FILE菜单中,选择GELEQ菜单,进入图像采集界面4.点击LIVE/FOCUS菜单,采集图像.(根据被扫胶的要求,在凝胶成像主机面板上选择UV/WHITE紫外光/白光).(如需使用透射白光,则把白光台电源打开,把白光台放在底板上,把胶放在白光台上.)5.调节光圈大小,点击IRIS下OPEN/CLOSE;调节聚焦,点击FOCUSE下NEAR/FAR按钮;调节远近即大小,点击ZOOM下相
2、应按钮,直到满意为止.6.爆光时间一般选择自动AUTOEXPOSE即可.7.若图像上有高亮红点,说明爆光过度,则须缩小光圈.8.图像调好后,点击SAVE键保存.若需保存为其他格式,则在FILE菜单下选择导出,保存为JPEG/TIFF格式文件.9.关于分析处理见QuantityOne应用讲义QuantityOne应用讲义本讲义介绍QuantityOne的两个重要分析功能：定量分析和分子量确定。QuantityOne软件HelpàQuickGuide快捷指南提示如何实现一个功能，如定量分析(VolumesQuickGuide)，电泳条带分析(BandAn
3、alysis)，差显分析(DifferentialDisplayAnalysis)，克隆计数(ColonyCountingAnalysis)等。快捷指南下有1，2，3…步骤，根据提示完成。一．定量分析功能快捷指南VolumesQuickGuide，此功能能对任意所选区域进行定量分析,此分析可以报告2个结果：相对浓度和绝对浓度（如有浓度标准样品）6-6Bio-RadQuantityOne软件应用讲义1．选择成像系统或打开已保存的文件(软件可以控制Bio-Rad所有的成像系统如GelDoc,ChemiDoc,VersaDoc,GS-800,FX,如不是B
4、io-Rad成像系统所摄取的图象，将图象保存为Tiff文件格式，软件也可进行分析处理)2．ZoomBox，缩放，对图象进行放大观察3．Transform转化，调节图象的对比度黑白4．VolumeRectTool矩形区域选择，如U15．VolumeFreehandTool自由画笔选择区域，可以勾勒出无规则形状,如U26．VolumnContourTool等高线勾勒区域，自动连接浓度浓度相同的点，如U3上面3种方法选择需要定量的区域。双击所选区域，出现如下窗口，定义样品类型，如未知样品Unkonwn(U1,U2…即待计算样品)，背景Background(
5、B1,B2…，软件在算浓度时会将此区域的浓度自动扣除)或标准样品Standard（Std1,Std2,如果该样品是浓度标准样品，即定量标准，需在浓度concentration一栏输入该样品的浓度）。6-6Bio-RadQuantityOne软件应用讲义1．SelectTool选择不同区域2．PrintImage打印图像3．VolumeAnalysisReport定量报告结果，打开出现如下窗口，选择要报告的参数，主要有2个参数Volume和Concentration。Volume为相对浓度，如有浓度标准样品（Std），软件可报告Concentratio
6、n绝对浓度。二．条带分析功能BandAnalysis介绍用此功能对泳道内的所有条带进行分子量确定，相对浓度分析6-6Bio-RadQuantityOne软件应用讲义1，2，3同上4，5，6确定泳道lane,并可对泳道进行各种调整（实际实验中泳道往往不是垂直的而出现各种变形。在软件的工具栏中有一LaneTool图标，包含有更多泳道编辑工具。BandTool条带编辑工具包LaneTool泳道编辑工具包7．LaneBackground去除泳道背景，建议不做8．DetectBand，检测泳道内的条带，打开出现如下窗口，一般可通过调节sensitivity灵敏
7、度来调节检测出的条带，或通过人工编辑来增加/减少条带。打开工具栏中BandTool条带编辑工具包可看到更多编辑工具（如上图）6-6Bio-RadQuantityOne软件应用讲义10.Standard输入分子量标准，软件自带有许多Bio-Rad的分子量标准，如你用的是自己的标准，进入NewStandard建立新的分子量标准，软件可以选择标准单位是MW（蛋白质）还是BP（核酸）等（左下图）。在Protein-Standard对话框中输入分子量数值，完成后单击赋值图标（右下图），回到图象文件上单击标准样品的泳道，软件自动将所输的分子量数值和泳道内的条带一
8、一对应。赋值图标：告诉软件哪条是分子量标准样品的泳道输入分子量数值10.BandAttribute条带属性，
