柴胡分子生药学研究进展

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1、柴胡分子生药学研究进展分子生药学是生药学和分子生物学相互融合形成的一门新兴的交叉学科,由黄璐琦院士在1995年首次提出［1］。分子生药学的提出，使生药学研究有了新的理论方法和技?g，使我国生药学研究又迈上了一个新的台阶。经过20多年的发展，分子生药学在屮药分子标识鉴定、屮药资源保护和利川、屮药优质高产方面都収得了很好的成果，使生药学研究不再停留于药川植物组织器官的层面，而是扩展到基因的层面，为后基因组时代研究中草药奠定了基础［2］。柴胡是我国常川的大宗屮药材之一，历代本草典籍对其药性都有明确记载。柴胡性味

2、苦寒，入肝胆经，具和解表里、疏肝、升阳之功效，主要用于感冒发热，寒热往来、胸胁胀痛、月经不调、子宫脱垂、脱肛等病证的治疗。2015年版《屮华人氐共和国药典》［3］屮规定的正品柴胡力牵形科植物柴胡BupleurumchinenseDC.或狭叶柴胡B.scorzonerifoliumWilld.的干燥根，前者习称“北柴胡”，后者习称“南柴胡”。在分子生药学发展的20多年里，关于柴胡的分子生药学方面的研宄也在持续进行。本文对近年柴胡分子生药学方面的研究进行了总结，以期为在分子水平对柴胡进行更深层次的研究提供参考

3、。1柴胡生药鉴定的分子标记研究生药鉴定是生药学的重要组成部分，生药鉴定的主要任务是研究生药的來源、品种鉴定、质量评价等。我国生药的品种繁多、来源复杂，在一定程度上制约了屮药的安全应川。柴胡作力我国常用的大宗屮药材，具有来源复杂、品种丰富等特点［4］，而利用传统的理化鉴别和性状鉴别的方法不能准确鉴别柴胡药材的来源和种属，因此，利川分子标记技术研究柴胡的种属鉴别逐渐成为研究热点。分子标记技术以1974年Grozdicker首创RFLP（限制性片段长度多态性）力开端，到2003年PaulHebert提出DNA条

4、形码技术，短短30年的时间里各国的科学家提出Y十几种分子标记技术，其屮常川的有RFLP、RAPD（随机扩增多态性DNA）、SSR（简单重复序列）、AFLP（扩增片段长度多态性）、ISSR（简单重复序列区间）和DNAbarcoding（DNA条形码）等。1.1RAPD技术RAPD是笫二代分子标记技术，该技术在梢物屮的应川比较广泛,但其不足之处是稳定性相对较差，不同的物种需要使川不同的反应条件，即使同-•物种的同一引物在实验条件改变时产生的谱带也会发生改变。AFLP技术与RAH）技术相似，其特点也是可以简单快

5、速的鉴定植物，但其稳定性也不佳。2002年，梁之桃等［5］对柴胡属的物种梢物进行了RAPD分析和分类鉴别，这是对柴胡进行RAH）研宄的开始。2003年，王秀全等［6］对柴胡种源的道地性进行了RAPD分析，发现利用RAPD可以准确的鉴定柴胡的道地性。随着对柴胡研究的深入，全国柴胡的主产区都开展了柴胡品种的RAPD鉴定［7-10］，同时，对RAPD的技术进行了一些优化［11］,使其更适合柴胡的分析。在资源鉴定的基础上，对柴胡的干根药材、愈伤组织、试管植株等进行了RAPD分析［12-14］。1.2SSR和TSS

6、R技术SSR又称力微卫星DNA或短串联重复，TSSR是在SSR的基础上发展起来的•-•种分子标记技术。SSR和TSSR可揭示更高的多态性，而且快速、简便，因此在屮药材鉴定屮得到了广泛应川。2008年，隋春等［15］首次以北柴胡为过魁进行了TSSR分析，这力利用TSSR技术鉴定柴胡种质资源、分子标记辅助育种以及遗传多样性研究奠定了基础。2010年，战晴晴等［16］利川SSR和TSSR技术构建了北柴胡的遗传图谱，使对柴胡的研究进一步深入。2013年，杨?F等［17］利用综合评分法对柴胡的ISSR-PCR反应体

7、系进行Z优化。2015年，马艳芝等［18］对不同柴胡种质资源的TSSR和ITS进行了序列分析，认为将ISSR和TTS（转录间隔区）技术相结合可提高柴胡种质资源鉴定的准确性。随着SSR和TSSR技?g的不断完善，利川该技术鉴定柴胡的研究不断深入。赵香妍等［19］对北京地区野生的柴胡种质资源进行了ISSR研宄，确定了百花山山腰及山脚的柴胡适宜推广种梢，为柴胡栽培品种的选育提供Y新选择。吴素瑞等［20］对柴胡的栽培品种进行YSSR的分子标记鉴别。通过长期反复的实验摸索，采用SSR和ISSR技术成为鉴别柴胡种质资

8、源的有效方法。1.3DNA条形码DNA条形码的鉴定是分子鉴定的最新发展方向，它是通过比较物种屮的一段标准的DNA片段，对物种进行快速、准确的识别和鉴定［21］。适于植物的条形码包括psbA-TrnH、rbcL、rpoCl、rpoB、matK、ITS、ITS2等。2004年，NevesSS等［22］首次基于柴胡属植物的ITS序列对其进行了聚类分析。2005年，武莹等［23］对5种习用柴胡进行了TTS的序列鉴别。2006年，谢晖等