尿液红细胞及形态ppt课件

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1、尿液红细胞及形态学检查血尿的概念镜下血尿:以传统的尿离心沉渣玻片涂片,在高倍镜下检查10个视野后,如每高倍视野中见到红细胞超过3~5个,则定为镜下血尿。肉眼血尿:重症者尿呈洗肉水样或血色,称为肉眼血尿。尿红细胞检测方法干化学分析法显微镜检查法(镜检)自动化尿沉渣分析仪法单克隆抗体免疫法干化学法原理:利用尿液中红细胞内血红蛋白或其破坏释放出的血红蛋白均具有过氧化物酶活性,可使过氧氢茴香素或过氧化氢烯钴释放出新生态氧,后者可氧化有关色原(如邻甲苯胺)显色。因此,它既可检测红细胞,也可检测游离血红蛋白,还可作为红细胞镜检的筛选法。不足:吩噻嗪类或吩嗪类药物、肌红蛋白、对热不稳定酶、

2、氧化剂或细菌过氧化物酶、尿pH值偏高等均可使隐血出现假阳性。尿液中存在大量维生素C时,可由于竞争性抑制反应而使干化学隐血出现假阴性。显微镜检查法(镜检)尿沉渣镜检的标准是:①医生要求镜检或病人的主诉、体征可能在尿沉渣中出现除红、白细胞以外的有形成分如结晶、异常细胞等;②泌尿系统疾病或可引发肾脏并发症的疾病;③尿液颜色、浊度、蛋白、亚硝酸盐、红细胞、白细胞有任何一项异常者。对于干化学筛选后的镜检问题,国内学者有争议,有学者认为镜检是尿沉渣分析的参考标准,其重要意义是任何方法无可替代的,只要有条件,最好每份标本都镜检。单克隆抗体免疫法可将尿液中的红细胞或Hb与试剂中单克隆抗体结合

3、并显色。其优点是敏感度高、特异性好。按每个红细胞Hb含量为30pg计,尿液中含有2个红细胞/μl(相当于0.5/HFP)即可检出。其特异性体现在仅与人Hb起反应,假阳性率很低。由于其过于敏感,在正常人尿内含红细胞(0~3/HFP)时,即可发生反应。因此,不适合常规尿红细胞检查。但当常规镜检与干化学法结果不能解释时,如尿中红细胞溶解和受某些物质干扰干化学检查阳性,而镜检未找到红细胞,应用单克隆抗体免疫法可为尿中红细胞的性质提供鉴别诊断依据。综合评价尿红细胞镜检是尿液红细胞检测的参考标准,但对尿中溶解的红细胞不能检出。干化学法可检测Hb,既有助于溶血性疾病的诊断,也可弥补镜检不能

4、检出破坏的红细胞之不足,还可作为尿红细胞镜检的筛选方法。但必须注重尿液分析仪及试剂带的质量及在工作中可能出现的干扰因素。综合评价单克隆抗体免疫法检查尿液红细胞具有很好的敏感性和特异性,但由于其过于敏感,不能用于常规检测;在镜检和干化学法检测结果不可解释时,其有重要的鉴别诊断价值。尿流式细胞仪检查不仅对尿红细胞定量分析有意义,而且还能对尿红细胞形态进行分析,以确定血尿来源。但分析过程易受某些因素的干扰,如酵母菌、精子等,当仪器出现报警时,必须用镜检确认。尿红细胞形态学检查主要用于鉴别肾性血尿和非肾性血尿。主要方法有:普通光镜、相差显微镜、扫描电镜、血液分析仪、尿液有形成分分析仪

5、等。普通光镜检查通常,在高倍镜下(400倍)识别非染色细胞形态,此法由于缺乏色泽对比和立体感,常要求观察者有丰富熟练的尿形态学经验。改用染色法(甲基绿染色,结晶紫-沙黄染色,或瑞氏染色)可增加形态鉴别特征。相差显微镜检查1968年,Kark研究小组开始应用相差显微镜观察尿细胞等形态,1979年澳大利亚的肾病学家Birch和Fairly应用于临床。相差显微镜反映红细胞立体感强,是目前检查尿红细胞形态最常用的方法。扫描电镜1983年,Fasseff用扫描电镜观察尿红细胞。由于立体感强,可敏感地观察到红细胞表面的细微变化。但因价格昂贵而难以普及于临床。尿液有形成分分析仪1995年,

6、日本推出流式细胞技术为原理的尿液分析仪SysmexUF-100,可将尿中成分作荧光染色后识别,如为肾性红细胞,散射光分布在图像左侧,非肾性红细胞在图像右侧,能有效地区别血尿来源。血液分析仪测定尿红细胞平均体积(MCV):肾性红细胞以小型为主,MCV小于血MCV;MCV<72fl;非肾性红细胞以正常为主,MCV大于血MCV。但用MCV时,要注意排除其他微粒的干扰。观察红细胞体积分布图(RDW):具有客观、快速、准确、重复性好的特点。畸形红细胞分类大红细胞:细胞体增大,中心淡,无双盘凹陷感。小红细胞:胞体小,外膜增厚,折光增强。棘形红细胞:胞质常向一侧或多侧伸出、突起,如生芽样。

7、环形红细胞(面包圈红细胞):因细胞内血红蛋白丢失或胞浆聚集,形似面包圈样空心环状。新月形红细胞:红细胞如半月形。颗粒形红细胞:胞质内有颗粒状的间断沉积,血红蛋白丢失。皱缩红细胞:高渗尿中多见。影红细胞:低渗尿中多见。红细胞碎片尿异形红细胞形态形成机制①红细胞通过有病理改变的肾小球滤膜,受到挤压损伤;②红细胞受到不同pH和渗透压持续变化的肾小管滤液的影响:肾性血尿中由于红细胞本身受损,其形态已经发生变化,因此极易受肾小管滤液pH和渗透压变化的影响而发生形态畸变。非肾性血尿则不存在红细胞通过肾小球滤膜挤压损

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