体外抗菌实验课件

《体外抗菌实验课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第二十章药物的体外抗菌试验药物的体外抗菌试验药物的体外抗菌试验是在体外测定微生物对药物敏感程度的试验，已广泛地应用于科研、生产和临床。如抗菌药物的筛选、提取过程中的追踪、抗菌谱的定、药物含量的测定、药物血浓度测定、指导临床用药的药敏试验等。抗菌试验包括抑荫试验和杀菌试验。抑菌：即抑制微生物的生长繁殖，但不能杀死微生物，在药物除去后微生物又能生长.杀菌：即能杀死微生物，当药物除去后，微生物也不能再生长繁殖。第一节常用的体外抑菌试验连续稀释法：可用于测定药物的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。可以用液体培养基，也可用固体培养基。1．液体培养基连续稀释

2、法2．固体培养基连续稀释法分平板法和斜面法。琼脂扩散法：是利用药物可以在琼脂培养基中扩散，在药物有效浓度的范围内形成抑菌圈或抑菌距离，以抑菌圈直径或抑菌距离的大小来评价药物抗菌作用强弱。1、滤纸片法适用于新药的初筛试验。2．打孔法适于药物血浓度的监测。3．挖沟法适用于在一个平板上试验一种药物对几种试验菌的抗菌作用。第二节杀菌试验用以评价药物对微生物的致死活性。最低杀菌浓度：指该药物能杀死细菌的最低浓度。从对微生物广义而言，也可称之为最低致死浓度(MLC)。是将待检药物先以合适的液体培养基在试管内进行连续稀释，每管内再加入一定量的试验菌液，培养后可得该药物的MI

3、C，取MIC终点以上未长菌的各管培养液，分别移种于另一无菌平板上，培养后凡平板上无菌生长的药物最低浓度即为该药物的MBC(或MLC)。活菌计数法是在一定浓度的定量药物内加入定量的试验菌，作用一定时间后，取样进行活菌计数，从存活的微生物数计算出药物对微生物的致死率。石炭酸系数（又称酚系数）是以石炭酸为标准，在规定的试验条件下，作用一定时间，将待测的化学消毒剂与石炭酸对伤寒沙门菌或金黄色葡萄球菌的杀菌效力相比较，所得杀菌效力的比值。棋盘格法是由于在试验时，含两种不同浓度药物的试管排列呈棋盘状而得名，用以评价两种药物同时用不同浓度进行联合试验时的抗菌活性。第三节联合

4、抗菌试验在药学上作中，常需检查两种抗菌药物在联合应用时的相互作用以及抗菌药物与不同pH值或不同离子溶液的相互影响。如加强药物抗菌作用的为协同(synergism)；减弱药物作用的为拮抗(antagonism)；相互无影响的为无关(indjfference)；作用为二者之和的为累加(addition)。纸条试验即在已接种试验菌的平板表面垂直放置两条各浸有一种药液的滤纸条，培养后根据抑菌区的加强、减弱或无影响来判断它们在联合应用时的效应。梯度平板纸条试验需先制备含药的梯度平板。将试验菌悬液涂布于平板表面，取滤纸条浸透另一待检药液，按梯度平板中药物浓度递减的方向置于

5、平板表面。培养后，如该待检药液对平板内的药物有加强作用，则可见沿纸条两边的抑菌区被扩大。第四节体外抗菌试验的影响因素1．试验菌在抗菌试验中所用试验菌一般应该用标准菌株。2．培养基培养基的质量须加控制。3．抗菌药物药物的浓度和总量直接影响抗菌试验的结果，需要精确配制。第二十一章药物制剂的微生物学检查药物制剂的微生物学检查药物制剂的微生物学检查主要包括无菌检验，细菌总数测定，霉菌总数测定，以及病原菌的检验与螨的检测等。第一节无菌制剂的无菌检查（一）一般药品的无菌检查一般药品的无菌检查法属于直接接种法，即将检品按规定量直接分别接种于适宜需氧菌、厌氧菌和真菌生长繁殖的

6、一定量的培养基中，同时以同样的培养基作阳性对照试验。我国药典规定以金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003、生袍梭状芽胞杆菌CMCC(B)64941、白假丝酵母菌CMCC(F)98001作为需氧菌、厌氧菌和真菌的阳性对照菌株。（二）特殊药品的无菌检查法如果阳性对照管不长菌，则必须进行特殊处理后方可按照一般药品的无菌检查法进行。1．油类药物的无菌检查一般油剂因与常规培养基不混溶，药品中的微生物不易生长，所以一般可采用吐温培养基，其余同一般药品无菌检查法。2．抗菌药物或含防腐剂药物的无菌检查如果被检药品具有抗菌作用，阳性对照管及试验管均可能不长菌。因此在进行无菌检查

7、前必须采用一些方法除去药物本身的抗菌作用，然后再依上述方法进行无菌检查。(1)加入灭活剂(2)微孔滤膜法(3)稀释法(4)离心沉淀法第二节口服药及外用药物的微生物学检查目前对口服药及外用药物的微生物学检验主要是微生物限量检验，即限制口服药及外用药的微生物总数和限制病原微生物种类的系列测定项目。我国规定的项目有：细菌总数测定，霉菌总数测定。病原菌(大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙门菌和破伤风梭菌)的检验和活螨的检验等。判断合格与否的标准是：口服药及外用药中微生物总量须低于规定限量外，并须在口服药物每克或每毫升中不得含有大肠埃希菌、沙门菌；外用药物每克

8、或每毫升中不得含有铜绿假单胞菌、金黄色