温度、ph、激活剂和抑制剂对酶活性的影响

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1、(一)、温度、PH对酶活性的影响一、实验目的了解温度对酶活性的影响。了解酶活性的最适PH及掌握一种检测最适PH的方法。二、实验原理三、实验步骤1、温度对酶活性的影响取3支试管,编号后按下表加入试剂试剂试管编号1230.2%淀粉溶液1.51.51.5稀释唾液/ml11无煮沸过的稀释唾液/ml无无1摇匀后,将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中,2号试管放入冰水中。10min后取出,将2号试管内的液体分为两半,用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min后,再用碘液检验,结果如何?记录并解释结果。

2、注意事项:1、唾液制备时,先用蒸馏水漱口,以清除食物残渣,再含一小口蒸馏水,0.5~1min后,使其流入量筒,并稀释到50ml。2、PH对酶活性的影响取4个标有号码的20ml试管。用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液以制备PH=5.0~8.0的4种缓冲液。试剂试管编号12340.2mol/L磷酸氢二钠/ml5.156.057.729.720.1mol/L柠檬酸/ml4.853.952.280.28PH55.86.88从4个试管中各取缓冲液3ml,分别注入到4支带有号码的试管中,随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。向各试

3、管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。将各试管内容物混匀,并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。第四管加入唾液2min后,每隔1min由第二管取出一滴混合液,置于白瓷板上,加1滴碘化钾-碘溶液,检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时,向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第一管起,均为1min。观察各试管内容物呈现的颜色,分析PH对唾液淀粉酶活性的影响。注意事项:1、从第三管中取混合液,是因为它的PH接近唾液淀粉酶的最适PH。2、间隔1min,是为了有足够的时间去加稀释唾液和足够时间观察颜色,保证各试管反应时间相同。四、实验结果1、温度12

4、3浅蓝一半暗褐一半浅蓝深蓝2、PH1234深蓝浅蓝浅紫深紫分析:酶的催化作用受温度的影响,在最适温度下,酶的反应速度最高。唾液淀粉酶的最适温度为37摄氏度。低温抑制酶的活性,高温使酶失活。淀粉遇碘显蓝色,按其分解程度由低到高会依次出现蓝色、紫色、暗褐色、无色。所以可用碘来检验其水解程度。PH也能影响酶的活性,在最适PH下,酶的活性最大,偏酸、偏碱都降低酶的活性,唾液淀粉酶的最适PH为6.8。(二)、激活剂和抑制剂对酶活性的影响一、实验目的了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。二、实验原理三、实验步骤取4支试管按下表加入试剂,观察现象并记录。试剂试管编号12340.1%淀粉溶液/ml1

5、.51.51.51.51%CuSO4溶液/ml0.5无无无1%Nacl溶液/ml无0.5无无1%Na2SO4溶液/ml无无0.5无蒸馏水/ml无无无0.5稀释唾液/ml0.50.50.50.537摄氏度恒温水浴5min碘化钾-碘溶液/滴2222四、实验结果1234深蓝浅蓝中蓝中蓝分析:酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的激活剂,铜离子为其抑制剂。激活剂使酶的活性升高,抑制剂使酶活性降低。加入Na2SO4是为了消除Na+和SO42-对酶活性的影响。

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