微生物发酵设备总结

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1、(名词解释10x1.5=15填空:20x1=20图注题1x10=10问答题5x8=40综合题1x15=15)1.微生物工程的工业生产水平的决定要素:①生产菌种的性能②发酵及提纯工艺条件③生产设备。其中第一步也就是优良菌种是最重要的。2.一般菌种分离纯化、筛选菌种的一般步骤:标本采集→标本材料的预处理→富集培养→菌种初筛→菌种复筛→性能鉴定→菌种保藏。标本采集(要求)•来源广泛的天然材料。•已适应相当苛刻的环境压力的微生物类群•更新的生态环境有待开发标本材料的预处理:(方法)•物理方法:加热、膜过滤、离心等•化

2、学方法:加碳酸钙提高pH值等。•诱饵法:将固体基质加到待检的土壤或水中,待其菌落长成后再铺平板。富集培养(名词解释):指从微生物混合群开始,对特定种的数量比例不断增高而引向纯培养的一种培养方法。3.自然选育、诱变选育、抗噬菌体菌种的选育、杂种育种、原生质体融合技术、基因工程技术等都是被用于优良生产菌种的选育方法(填空)自然选育(名词解释):不经人工处理,利用微生物的自然突变进行菌种选育的过程。诱变选育(名词解释):杂种育种(名词解释):将不同菌株的遗传物质进行交换、重组,使不同菌株的优良性状集中在重组体中,得

3、到具有新性状的菌株。原生质体融合技术(名词解释):将遗传性状不同的两种菌(包括种间、种内及属间)融合为一个新细胞的技术。即实现遗传重组。基因工程技术(名词解释):将一个含有目的基因DNA片段经体外操作与载体连接,并转入一受体细胞(通常多为细菌),使之扩增、表达的操作过程。4.常用的各种诱变剂诱变育种的方法和步骤。基本方法:诱变+筛选诱变剂:化学诱变剂、物理诱变剂、生物诱变剂诱变育种一般包括诱变和筛选两个部分。诱变部分成功的关键包括出发菌株的选择、诱变剂种类和剂量的选择,以及合理的使用方法。筛选部分包括出筛和复

4、筛来测定菌种的生产能力。诱变育种的基本过程:出发菌株的选择→制备菌悬液→诱变处理→筛选→保藏和扩大试验。5.原生质体融合技术的主要步骤有哪些?()解释各步骤选择亲株、原生质体的制备、原生质体的融合、原生质体再生和融合子的筛选骤①选择亲株:1.遗传性状稳定且具有优势互补的两个亲株•2.了能明确检测到融合子,参与融合的亲株一般都需要带有可以识别的遗传标记,如营养缺陷型或抗药性等②原生质体的制备:1.细胞壁是制备原生质体的关键2培养基中添加甘氨酸,可以使菌体较容易被酶解;3菌体生长阶段添加蔗糖也能提高细胞壁对溶菌酶

5、的敏感性4菌体生长对数期加入适量青霉素,就能使细胞对溶菌酶更敏感5龄:对数生长中期细胞的细胞壁中肽聚糖含量很低,对溶菌酶敏感。6般是将原生质体放在高渗的环境中以维持它的稳定性③原生质体的融合:1.二醇(PEG)能有效地促进原生质体融合2.般PEG的使用浓度范围在25-40%④原生质体再生:1.使原生质体重新长出细胞壁,恢复完整的细胞形态结构;2.不同微生物的原生质体的最适再生条件不同,最重要的一个共同点是都需要高渗透压。⑤融合子的筛选:1.通过两亲株遗传标记的互补而得以识别2.如两亲株的遗传标记分别为营养缺陷

6、型A+B-和A-B+,融合重组子应是A+B+或A-B-。6.常用菌种保藏的方法()填空。1、斜面冰箱保藏法2、土管保藏法3、菌丝速冻法4、石蜡油封存法5、真空冷冻干燥保藏法6、氮超低温保藏法7.培养基的主要成分有哪些?(填空和问答题)碳源、氮源、无机盐、微量元素、特殊生长因子、促进剂、前体、水等几大类。碳源:糖类、油脂、有机酸、低碳醇等。氮源:1、无机氮源(铵盐、硝酸盐和氨水)2、有机氮源(尿素、酵母粉)无机盐:磷酸盐、硫酸镁、钾盐等。微量元素:(锰、铁)特殊生长因子:生物素、氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等促进

7、剂:巴比妥前体:青霉素、苯乙酸。水:前体(名词解释):某些化合物加入到发酵培养基中,能直接被微生物在生物合成过程结合到产物分子中去,而其自身的结构并没有多大变化,却能提高产物的产量的一类小分子物质。促进剂(名词解释):是一类刺激因子,这类物质的加入或可以影响微生物的正常代谢,或促进中间代谢产物的积累,或提高次级代谢产物的产量。抑制剂(名词解释):可以抑制某些代谢途径的进行,同时刺激另一代谢途径,以致可以改变微生物的代谢途径的添加剂。根据物理性状不同,分为:液体培养基、体培养基、固体培养基按照培养基的组成成分,

8、有合成培养基和天然培养基。按照培养基的状态可分,固体培养基、半体培养基、液体培养基。按用途将培养基分为孢子培养基、种子培养基、发酵培养基。(根据来源不同,分为:天然培养基、合成培养基、半合成培养基。)孢子培养基(名词解释):供菌种繁殖孢子用的培养基。制备孢子用的?种子培养基(名词解释):供孢子发芽、生长和菌体繁殖的培养基。(满足菌种生长用的。营养丰富,氮源、维生素比例较高。课件?)发酵培养基(名词解

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