全自动染色机在常规HE染色中的应用体会.doc

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1、全自动染色机在常规HE染色中的应用体会【关键词】HE染色；全自动染色机；手工染色　　近年来，随着病理学检验技术的快速发展，全自动组织切片染色机正以其卓越的性能与良好的切片处理效果。特别是其稳定、高效，逐渐被各大医院及相关实验室所接受并使用。逐步替代目前的人工染色。我科自2004年中将该染色机应用于常规HE染色，切片的处理效率明显提高，染色效果稳定，染色质量显著改观。在使用过程中对染色程序及染色剂的选择与更换进行比较并选用最适于本科室的方案，进一步提高了染色效率及染色质量。　　1材料与方法　　1．1仪器与设备英国ShandonVaristainRGemi

2、ni自动染片机及附带设备。　　1.2试剂改良Lily’s苏木素，0．5%水溶性伊红，80%乙醇，95%乙醇，无水乙醇，二甲苯，1％盐酸乙醇，Sottc促蓝液，苯酚(石碳酸)二甲苯混合液。　　1．3染色过程：　　1．3.1常规石蜡切片HE染色［1］石蜡切片裱贴在载玻片上，在载玻片的磨砂面标出组织块的编号，放入染色机配套的玻片篮中并在65℃～70℃恒温烤箱中烤片15min后置入染色机中，见表1。　　表1常规石蜡切片HE染色步骤（略）　　程序完成后自二甲苯中取出切片，去掉玻皮篮手柄后置入自动封片机中，中性树胶封固。　　1.3.2脱落细胞学涂片HE染色涂片经9

3、5%乙醇固定后放在玻片篮中置入染色机中，按下表步骤处理。　　表2脱落细胞学涂片HE染色步骤（略）　　程序完成后自二甲苯中取出切片，去掉玻片篮手柄后置入自动封片机中，中性树胶封固。　　2结果2　　石蜡切片及脱落细胞学涂片HE染色鲜艳、均匀，胞核、胞质着色良好、对比清晰。　　3体会　　在2年多来应用自动染色机的过程中，通过摸索和实践，得出如下几点体会。　　3.1传统的染色方法多为手工染色，费时、费力，尤其在大的综合性医院中，工作量大，此缺点尤为突出，而该自动染色机有以下的优点，高效率：可进行大批量玻片的染色，每个玻片篮20张载玻片，每张载玻片上可裱贴两个组

4、织块切片，一次最大量可放进19个玻片篮。这在制作教学玻片或读片用玻片时尤为方便;稳定：使用相同的染色程序，同一批次的组织切片，HE染色效果稳定；不同的人操作也不会出现明显的波动；省时省力：可同时编制多个染色程序，石蜡切片与脱落细胞学涂片的HE染色可同时进行。玻片在进入染色机程序后，操作人员可进行别的工作，可节省人力；安全：使用密封式铅酸充电池，电后仍可工作40min，保证染色工作的完成；而且在相对密闭的空间中进行染色工作，减少了挥发性化学试剂对工作环境的污染。　　3.2使用Socct促蓝液对细胞胞进行蓝化，可缩短流水冲洗蓝化的时间；在0．5％的伊红液中

5、加入一滴冰醋酸，可促进伊红的着色而且使颜色更为鲜艳，与苏木精的蓝色对比鲜明。使用改良的Lily苏木索染液，配制好后即可应用，无需放置成熟。　　3.3在脱水透明的过程中，在最后一道无水乙醇与第一道二甲苯之间加入一道苯酚二甲苯混合液(比例为1：3)［2］，因苯酚有吸水的作用，具有加强脱水的作用，使组织切片脱水更为充分，透明效果更好。　　3.4根据我科的具体情况对试剂进行定期的更换苏木素每周更换，更换时不必全部更换，可用多层纱布过滤后，加入等量的新的液染后继续使用。伊红液每周进行过滤，可连续使用2周～3周。其他的液体每周进行更换。以保证脱蜡与脱水的充分和彻底

6、。　　3.5仪器的保养机器外部每天进行常规的清洁，内部染色缸之间的溢液应及时用纱布或卫生纸吸干后用酒精擦拭。染色缸每2周倒出液体后用自来水冲洗，再用漂白液浸泡以清除染液在外部的残留。冲洗干净后晾干后使用。水槽每周清洗，水槽底部的进水孔要定时进行清理，以防堵塞；水槽的水每天要放出，以防有霉菌生长，影响染色质量。【参考文献】　　［1］孙淑芬，马福成，李江，等．染色的基本原理、生物染料和苏木精伊红染色方法［M］．见：王伯沄，李玉松，黄高升，等．病理学技术［M］.北京：人民卫生出版社，2000：130134.　　［2］张哲，陈辉．实用病理组织染色技术［M］．

7、沈阳：辽宁科学技术出版社，1988：3242.2