分子生物学整理资料

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1、第一章1、证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是什么?1944年肺炎球菌转化实验1952年噬菌体侵染实验2、请阐明1953年Watson和Crick提出的DNA双螺旋模型内容。(1)主链:由二条相互平行而走向相反的脱氧核苷酸链围绕一共同中轴以右手方向盘旋,形成双螺旋构型。主链处于螺旋的外则。(2)碱基对:碱基位于螺旋的内则,碱基对以氢键维系,A与T间形成两个氢键,G与C间形成三个氢键。碱基平面与螺旋中轴垂直。(3)大沟和小沟:大沟和小沟分别指双螺旋表面凹下去的较大沟槽和较小沟槽。(4)结构参数:螺旋直径2nm;螺旋周期包含1

2、0对碱基,螺距3.4nm;相邻碱基对平面的间距0.34nm。3、请说明核小体的结构组成。核小体是由核心颗粒(H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的八聚体)和连接区DNA(大约200bpDNA)组成。DNA双螺旋沿八聚体核心的短轴旋绕1.75圈,而H1则在核小体的外面。每个核小体只有一个H1。4、原核生物与真核生物基因组的区别。第二章1、原核与真核生物中的DNA聚合酶有哪些?功能如何?DNApolⅠ功能:a5'→3'聚合作用:DNApolⅠ的聚合作用主要用于DNA的修复和RNA引物的替换。b5‘→3’外切酶活性:冈崎片段5

3、'末端RNA引物的去除依赖此种外切酶活性。c3‘→5’外切酶活性:主要功能是校对作用DNApolⅡ:具ab不具cDNApolIII:DNA聚合酶III是细胞内DNA复制所必需的酶,也是主要的酶真核:DNA聚合酶δ:催化核内染色体DNA前导链及滞后链的合成,需增殖细胞核抗原蛋白PCNA(proliferatatingcellnucleusantigen-PCNA)的参与。DNA聚合酶α:与引发酶配合,参与滞后链的合成。DNA聚合酶β:主要作用是核内缺口填充和DNA修复。DNA聚合酶γ:负责催化线粒体DNA的复制。DNA聚合酶ε

4、的结构和特征与酶α相似可能参与修复机制或与α和δ协同作用。2、DNA复制的基本特点。3、DNA复制方式有哪些?有何区别?“θ”型复制,滚环复制,D环复制滚环复制——单链环形DNA的复制D环复制的特点是两条链的复制不是同步的。第三章1、引起DNA突变的原因或来源有哪些,突变结果如何?一、DNA复制中的错误二、DNA的自发性化学变化1、碱基的异构互变2、碱基的脱氨基作用3、脱嘌呤与脱嘧啶4、碱基修饰与链断裂5、转座成分的致突变作用三、诱发突变1、物理因素引起的DNA突变2、化学因素引起的DNA突变突变或诱变对生物可能产生4种后果

5、:①致死性;②丧失某些功能;③改变基因型(genotype)而不改变表现型(phenotye);④发生了有利于物种生存的结果,使生物进化。2、阐述DNA的几种修复方式。一、光修复(DNA的直接修复)修复是由细菌中的DNA光解酶(photolyase)特异性识别紫外线造成的核酸链上相邻嘧啶二聚体,并与其结合,这步反应不需要光;结合后如受300-600nm波长的光照射,则酶被激活,将二聚体分解为两个正常的嘧啶单体,然后酶从DNA链上释放。二、切除修复切除修复是修复DNA损伤最为普遍的方式,对多种DNA损伤包括碱基脱落形成的无碱基

6、位点、嘧啶二聚体、碱基烷基化、单链断裂等都能起修复作用。同时也是人体细胞主要的DNA修复机制。步骤①首先由核酸内切酶识别DNA的损伤位点,损伤的DNA片段被切除。不同的DNA损伤需要不同的核酸内切酶来识别和切割。②在DNA聚合酶I的催化下,以完整的互补链为模板,按5’—3’方向合成一段DNA链。③由DNA连接酶将新合成的DNA片段与原来的DNA断链连接起来。这样完成的修复能使DNA恢复原来的结构。核苷酸切除修复碱基切除修复错配修复三、重组修复上述的切除修复在切除损伤片段后以原来正确的互补链为模板来合成新的段落而做到修复的。但

7、在某些情况下没有互补链可以直接利用,例如在DNA复制进行时发生DNA损伤,此时DNA两条链已经分开,其修复可用DNA重组方式:①受损伤的DNA链复制时,产生的子代DNA在损伤的对应部位出现缺口。②完整的母链DNA与有缺口的子链DNA进行重组交换,将母链DNA上相应的片段切下来填补子链缺口处,而母链DNA出现缺口。③以另一条子链DNA为模板,经DNA聚合酶催化合成一新DNA片段填补母链DNA的缺口,最后由DNA连接酶连接,完成修补。重组修复不能完全去除损伤,损伤的DNA段落仍然保留在亲代DNA链上,只是重组修复后合成的DNA分

8、子经多次复制后损伤就被“冲淡”了。四、SOS修复SOS修复是指DNA受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA修复方式。当DNA两条链的损伤邻近时,损伤不能被切除修复或重组修复,这时在核酸内切酶、外切酶的作用下造成损伤处的DNA链空缺,再由损伤诱导产生的一整套的特殊DNA聚合酶──

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