waters高效液相色谱系统操作规程

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1、Waters高效液相色谱系统操作规程1.目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。2.范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。3.职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。4.系统组成本系统由Waters600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters在线脱气机、Rheodyne7725i手动进样阀、Waters2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成，另外还包括打印机、断电保护器和通风柜等辅助设备。5.程序5.

2、1.准备5.1.1.使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用0.45μm滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。5.1.2.通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。5.2.开机和泵操作5.2.1.开机5.2.1.1.接通断电保护器的电源，依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。5.2.1.2.打开Millenniu

3、m32软件，按「Login...」，输入用户名和密码，按「OK」注册进入系统主界面。在Project档内选择所需的项目，右击『RunSamples』图标，选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet窗口。5.2.2.更换溶剂5.2.2.1.打开600E泵后，转动进口集合管阀手柄（以下简称手柄）至RUN位置；5.2.2.2.将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂，向右打开参照阀（断开柱和进样器）；5.2.2.3.按［Direct］键使其显示直接控制屏幕，设流速为1ml/min（梯度配比阀在0ml/

4、min时不工作）；5.2.2.4.选择欲使用的某一溶剂通道，设其比例为100%，其它为0%；5.2.2.5.将输液管从原有溶剂瓶中取出，放入一干净的空瓶中；5.2.2.6.逆时钟转动手柄至DRAW位置，用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml溶剂；5.2.2.7.再将输液管放入新溶剂瓶内，继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止；5.2.2.8.转动手柄至RUN位置，将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。5.2.2.9.重复5.2.2.4.~5.2.2.8.直至所有即将使用的溶剂更换完毕。5.2.3.排气泡5.2.3.

5、1.打开参照阀，换流动相为100%超纯水，设流速为10ml/min（注意：确认参照阀是打开的，否则可能损坏安装好的柱）；5.2.3.2.转动进口集合管阀手柄至DRAW位置，用启动注射器抽出约10ml水；5.2.3.3.顺时钟转动手柄至INJ位置，缓慢用力使水通过泵头从参照阀出口管排出（注意不要将气泡注入泵中）；5.2.3.4.按［Stopflow］屏幕键停泵，关上参照阀。5.2.3.5.如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下泵出口管，用塑料管连接至塑料烧杯中，设流速为10ml/min，冲洗2~5min（或更长时

6、间）后停泵，重新接上柱。5.3.平衡系统（分两种情况进行）5.3.1.等度模式5.3.1.1.每次以0.1ml/min的增量加大流速至1ml/min，以超纯水冲洗系统10min。5.3.1.2.检查管路连接、柱接口及泵头处是否漏液，如漏液应予以排除。5.3.1.3.观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应在平均值的5~10%以内。如超出此范围，可初步判断为柱前管路仍有气泡，重复5.2.3.下的步骤。5.3.1.4.压力波动平稳后，换检验方法规定的流动相比例冲洗系统。在检查基线稳定性前，让最少5~6倍柱体积的流动相通过

7、系统。5.3.1.5.在QuickSet窗口下的InstrumentMethod档内选择所需的仪器方法，按「Monitor」（此后泵由软件控制），观察基线和压力变化。如果冲洗至基线漂移<10-3Au/min，噪声为10-4Au数量级，且压力平稳时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。5.3.1.6.按「Abort」图标（左上第五个），停止监视基线。5.3.2.梯度模式5.3.2.1.按检验方法规定的条件冲洗平衡系统，并注意压力波动变化和排气泡。5.3.2.2.在进样前运行1~2次空白梯度。5.4.进样5.4.1.

8、在QuickSet窗口内左下部选〈Single〉标签，在SampleName档内填写试样名称；在Function档内选择试样类型（标准选“InjectStandards”；样品选“InjectSamples”）；在MethodSet档内选择所需的方法组；在InjectionVolume档内输入进样体积；在RunTime档内输入记录时间。5.4.2.用针头滤器过滤试样溶液（