31例负载自体胃癌细胞裂解物dc-cik细胞免疫治疗细节体会

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1、31例负载自体胃癌细胞裂解物DC-CIK细胞免疫治疗细节体会王盛崔玉忠谢秀艳（滨州医学院附属医院临淄区人民医院255400）【屮图分类号】R967【文献标识码】A【文章编号11672-5085（2013）30-0089-03【摘要】目的总结我院31例（2012年5月到2013年6月）负载自体胃癌细胞裂解物DC-CIK细胞免疫治疗全过程屮细节上的心得体会。方法31例胃癌病人术屮保存肿瘤组织，治疗前制备肿瘤抗原，用血细胞分离机采集外周血单个核细胞，体外培养DC-CIK细胞，连续给病人8次回输治疗，同时加强回输时、回输后不良反应的观察及护理。结果31例病人顺利完成抽血、回输过程，

2、回输后1例病人出现轻微寒战，3例病人在回输后l-3h发热。结论DC-CIK临床应用安全可靠。【关键词】自体DC-CIK细胞体会DetailsandexperienceofDC-CIKimmunotherapyloadedautologousGastricCarcinomacelllysatesfor31cases[Abstract]Purpose：TosummarizedetailsandexperienceinthewholeprocessofDC-CIKcellimmunotherapyloadedautologousgastriccarcinomacelllysate

3、sfor31casesinourhospitalfrom2012.5to2013.6.Methods:Thetumortissuesof31gastriccancerpatientsinsurgeryweresaved，andtumorantigenwaspreparedbeforetreatment,peripheralbloodmonocyteswerecollectedwithbloodcellseparator,DC-CIKcellswereculturedinvitroandtheninfusedforconsecutive8timesfortreatment.M

4、eanwhile,theobservationandnursingofsideeffectwascarriedoutduringandaftertreatment.Result：Bloodcollectionandcellsinjectionweresmoothlycompletedin31patients，1patientshowedaslightshiveraftercellsinjection，and3patientshadafeverl-3haftertreatment.Conclusion：TheclinicalapplicationofDC-CIKissafea

5、ndreliable.【Keywords】autologousDC-CIKcellexperienceDC细胞和CIK细胞是肿瘤免疫治疗的两个重要部分。DC细胞是体内摄取、加工、呈递抗原的最重要的专职抗原呈递细胞，它呈递抗原的能力强，且是唯一可以活化初始T细胞的抗原呈递细胞，能识别病原、激活获得性免疫系统。CIK细胞即细胞因子诱导的杀伤细胞，是一种肿瘤过继性细胞免疫治疗细胞，CIK增殖能力强，细胞毒作用强，具有一定的免疫特性；是一类非主要组织相容性复合物（MHC）和非T细胞受体（TCR）限制性的免疫活性细胞，其主要效应细胞的表面标志CD3+CD8+和CD3+CD56+ODC

6、细胞和CIK细胞两者联合能确保高效和谐的免疫反应的完成。我院从2012年5月至2013年6月应用负载自体胃癌细胞裂解物DC-CIK细胞免疫治疗31例胃癌患者，取得了良好的疗效。现将治疗全过程中细节上心得体会介绍如下：1治疗过程术前，向病人详细介绍治疗过程，并签署治疗同意书。术中留取肿瘤组织，放-80°C冰箱中冻存，病理确诊后，在无菌条件下，将癌旁非肿瘤组织去除干净，浸于PBS溶液中，然后用眼科剪将组织块剪碎，加入5mlRPMI培养基研磨，经200目、1000网筛过滤后收取细胞悬液，然后用RPMI重悬细胞（l×107/ml）,装入5ml无菌冻存管，反复冻融5个循环

7、后，收集细胞裂解物并通过0.2μm滤器过滤，-80°C保存备用。肿瘤细胞裂解物采用BCA法测定蛋白浓度［1］。无菌条件下，使用血细胞分离机采集患者自体外周血单个核细胞（PBMC）,在本院GMP实验室中用淋巴细胞分离液分离单个核细胞，上清层收集制备自体血清，收集中间白膜层PBMC,用PBS溶液洗涤3次后重悬于GT-T551无血清培养基（加2%自体血清）中，置于37°C，5%CO2培养箱孵育2h,贴壁细胞用于培养DC细胞，加入rhGM-CSF100ng/ml和rhlL-430ng/ml（GM-CSF可促进髓系细胞