艾滋病实验室危害评估

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1、艾滋病实验室危害评估贵州省艾滋病确认中心实验室刘勇一、危险程度分类(一)分类危险度分级传染病管理(二)实验室操作与生物安全防护实验室级别要求二、背景资料:(一)一般生物学特性1.病原学特性2.培养特性(二)艾滋病毒对外界环境的稳定性1.自然环境中的稳定性与对温度的敏感性2.化学因子的敏感性3.对紫外线等的敏感性二、背景资料(三)HIV的致病性(四)HIV的传播途径(五)艾滋病的预防、诊断和治疗1.预防2.诊断3.治疗三、拟从事实验活动的危险性分析及相应的预防措施四、工作人员的预防接种和工作人员素质五、评估结论(一)实验活动的防护措施(二)感染的控制和健康

2、监护一、危害程度分类(一)分类危险度分级传染病管理根据2006年中华人民共和国卫生部制定的《人间传染的病原微生物名录》《实验室生物安全通用要求》(GB19489-2004)WHO《实验室生物安全手册》(第三版.2004),Humanimmunodeficiencyvirus(HIV)typy1and2virus人类获得性免疫缺陷病毒(艾滋病毒I型和II型)属于危害程度第二类的病原微生物,其危险度Ⅲ级。根据2006年《中华人民共和国传染病防治法》,艾滋病属于乙类传染病。微生物危害程度分级等级危害Ⅰ(低个体危害,低群体危害):不会导致健康工作者和动物致病、的

3、):能引起人或动物发病,但一般情况下对健康工作者、细菌真菌、病毒和寄生虫等生物因子危害等级Ⅱ(中等个体危害,有限群体危害群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室导致严重疾病,具备有效治疗和预防措施,并且传播风险感染有限微生物危害程度分级危害等级Ⅲ(高个体危害,低群体危害):能引起人类或动物严重疾病,或成严造重经济损失,但通常不能因偶然接触而在个体间传播,或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的病原体危害等级Ⅳ(高个体危害,高群体危害):能引起人类或动物非常严重的疾病,一般不能治愈,容易直接或间接或因偶然接触在人与人,或动物与人,或人与动物,或动物与动物间

4、传播的病原体运输包装分类AUN2814(仅病毒培养物为A类)BUN3373(诊断标本、临床标本、生命物质)(二)实验室操作与生物安全防护实验室级别要求1.病毒培养BSL-32.动物感染实验ABSL-33.未经培养的感染材料的操作BSL-24.灭活材料及无感染性材料的操作BSL-1。二、背景资料(一)一般生物学特性1.病原学特性人免疫缺陷病毒分两型,即HIV-1和HIV-2。两者均能引起艾滋病,均为单链RNA病毒,分类上属于逆转录病毒科(Retroviridae),慢病毒亚科(Lentivirus)。本病毒为圆形或椭圆形,直径约90—140nm,外层为类脂

5、包膜,表面有锯齿样突起,内有圆柱状核心,由RNA逆转录酶、DNA多聚酶和结构蛋白等组成。病毒的包膜是糖蛋白gp120及gp41。gpl20为外膜蛋白,gp41为透膜蛋白(transmem—braneprotein),起协助HIV进入宿主细胞的作用。结构蛋白包括p24核心蛋白和p18基质蛋白。HIV有9个基因,其中3个基因编码结构蛋白,即群抗原基因(groupspecificanti-gen,gag)编码核心蛋白p24,多聚酶基因(polymerase,pol)编码多聚酶,包膜蛋白基因(envelope,env)编码包膜蛋白gpl20和gp41。尚有3个调

6、节基因,即反式激活因子(transactivator,tat)对HIV基因起正调控作用,病毒蛋白表达调节因子(regulatorofexpressionofvirionproteins,rev)能增加gag和env基因对结构蛋白的表达,和负因子(negativefactor,nef)具有抑制HIV增殖作用。另外还有四个基因即病毒感染因子(virioninfectivityfactor,vif),其作用是在一些细胞因子协同下促进HIV在细胞内复制,R蛋白(viralprotein,R.vpr),能使HIV在巨噬细胞中增殖;U蛋白(viralprotein,

7、U.vpu)仅存在于HIV-1中,它能促进HIV-1从细胞膜上释放。HIV-2核苷酸序列中近40%一50%与HIV-1相同,在基因组中,不存在vpu基因而有X蛋白(viralprotein,X.vpx),这是HIV-2在淋巴细胞和巨噬细胞增殖时所必需,且能促进病毒粒子的形成。HIV-2毒力较弱,临床上潜伏期较长,进展为AIDS所需时间亦较久。根据env基因V3段碱基排列的不同,HIV-1可分为9个亚型即A、B、C、D、E、F、G和O亚型。HIV既有嗜淋巴细胞性又有嗜神经性,主要感染CD4+T淋巴细胞,也能感染单核巨噬细胞、B细胞和小神经胶质细胞、骨髓干细

8、胞等。HIV侵入人体后虽然能刺激机体产生抗体,但中和抗体很少,且作用极弱。在血清

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