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时间:2018-10-07
《人体组织解剖学生理实验课件_1》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、一、坐骨神经——腓肠肌标本制备目的要求:1、学习生理学实验基本的组织分离技术2、学习蛙类动物双毁髓的实验方法。3、学习蛙类坐骨神经-腓肠肌标本制备基本操作技术实验原理:蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳动物有近似之处,若将其离体组织器官放在任氏液中,其兴奋性可以在室温下,于一段时间内保持不变,其实验条件较易控制,来源也较丰富。因此,在实验中常用坐骨神经-腓肠肌标本观察神经、肌肉的兴奋性、刺激以及反应的规律以及肌肉收缩的特点等。实验动物及器材:牛蛙、蛙板、玻璃板、粗剪刀、手术剪、探针、玻璃分针、蛙钉、镊子、线、滴管、培养皿、Zn-Cu弓、任氏液实验步骤:1、双毁髓:枕骨大孔
2、处,向前毁脑,向后毁脊髓。2、去皮和制作下肢标本:于腋窝下处横断脊柱,并将头及前肢连同所有内脏一起剪去,由断面将皮肤及肌肉分离,去皮。3、分离两后肢:用粗剪刀沿脊柱和耻骨联合的中线,将标本纵剖为两半。4、分离坐骨神经:用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经并向下分离,挑开背侧梨状肌,再循坐骨神经沟纵向暴露并分离坐骨神经,勿牵拉神经。5、游离腓肠肌:分离腓肠肌的跟腱,结扎跟腱,于结扎以下剪断,剪去小腿骨和其上肌肉,再剪去股部肌肉,留长约1~2cm的股骨。6、检验标本兴奋性:用蘸任氏液Zn-Cu弓的两端轻触及坐骨神经,若腓肠肌收缩,则此标本的兴奋性良好,说明标本制备成功。注意事项:1、不可
3、将剥皮的标本与内脏等弃物放一起。2、剥皮的后肢不可用自来水冲洗。3、凡标本只能用玻璃分针。4、制备标本过程中随时用任氏液润湿标本。实验结果及分析:思考题:1、剥皮的后肢能用自来水冲洗吗?为什么?2、如何检查脊髓是否毁彻底?二、血红蛋白含量测定及血型的鉴定(一)血红蛋白含量的测定目的要求:掌握测定血红蛋白含量的基本方法——比色法实验原理:测定血红蛋白的方法很多,种沙里(sahli)比色法是其中一种。血红蛋白本身的色泽,常随所结合的氧量多少而改变,不便于比色。沙里比色法是用少许稀盐酸加入一定量血液中,酸不仅使红细胞膜破坏,而且使原来位于红细胞内亚铁血红素转变成高铁血红素,后者呈较
4、稳定的棕色。将其用蒸馏水稀释后与血红蛋白测定计的标准色进行目测比色,即得每100ml血液所含的血红蛋白数或百分率。实验器材:血红蛋白计、采血针、蒸馏水、0.1MHCL、一次性20ul定量毛细取血管、滴管、玻璃棒、75%酒精棉球、乙醚实验方法与步骤:1、了解血红蛋白计的构造:a、标准比色架b、血红蛋白稀释管2、用蒸馏水将血红蛋白(Hb)稀释管洗净,干燥备用。3、用滴管加0.1MHcl于血红蛋白稀释管内,到刻度“2%”或“10%”处。4、采血:常规消毒指尖,用一次性刺血针刺破无名指尖。拭去第一滴血,待第二滴血流出一大滴时,用一次性毛细取血管吸血至刻度20ul(0.02ml即20m
5、m3)处。5、血液与盐酸完全反应:使Fe2+Fe3+(置10分钟)。6、透光比色7、加蒸馏水至颜色同标准色柱注意事项:1、吹血液入稀释管及洗净吸管时,应插入液面内,吹时不宜用力过猛,以免产生气泡。2、蒸馏水逐滴加,以免过量稀释,玻璃取出比色。3、一定要准确掌握进入稀释管内血液量(20ul)。不可将剥皮的标本与内脏等弃物放一起。实验结果及分析:附:我国成年人Hb正常值:男:120~160g/L或12~16g/100ml血液女:110~150g/L或11~15g/100ml血液新生儿含量可达20g/100ml以后减少,2~3个月最低,达9.5g.思考题:1、测定Hb含量实际意义?
6、Hb具有什么功能?(二)血红蛋白含量的测定目的要求:1、学习鉴定血型的方法2、观察红细胞凝集现象,掌握ABO血型鉴定的原理实验原理:血型是指红细胞的血型,是根据存在于红细胞膜外表面特异性抗原(镶嵌于红细胞膜上特异性糖蛋白)来确定的,这种抗原或凝集原由遗传基因决定。血清中抗体或称凝集素,可与红细胞膜上不同的相应抗原结合,产生凝集反应,最后发溶血。由于这种现象,临床上在输血前必须进行鉴定血型,以确保安全输血。人类红细胞上已发现20多种血型系统。其中最常用最重要的是ABO血型系统,其次为Rh系统。本次实验介绍ABO血型鉴定。实验器材:采血针、双凹玻片、记号管、75%酒精棉球、牙签、
7、A型和B型标准血清、生理盐水、显微镜实验步骤:玻片法1、先取双凹玻片,标好姓名、A、B,然后滴加抗A、抗B血清各一滴,取牙签一支,用其两头蘸血分别在A、B血清中搅拌,置0~15分钟后观察凝血现象。A抗BB抗A姓氏第一字母结果:抗A凝集抗、B不凝集A型血因红细胞上有A抗原抗B凝集、抗A不凝集B型血因红细胞上有B抗原抗A、抗B凝集AB型血因红细胞上有A、B抗原抗A、抗B不凝集O型血因红细胞上无抗原注意事项:1、注意消毒,防止穿刺部位皮肤感染。2、肉眼看不清楚凝集现象时,应在低倍显微镜下观察。3、红细胞悬液和
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