霉菌大肠菌群金黄色葡萄球菌课件

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1、霉菌、大肠菌群、金黄色葡萄球菌检测中常见问题的分析主要内容霉菌大肠菌群金黄色葡萄球菌霉菌霉菌：不是分类学上的名词，而是一些丝状真菌的通称，属真菌的一部分.其对人类的作用具有双重性:有利的方面是它可以用来酿造、工业发酵、抗生素和酶制剂的生产等;不利方面是它能引起农副产品、食品、原料及器材的腐烂，也感染并引起人类和动、植物的多种疾病.少数种类，如黄曲霉，能产生黄曲霉毒素，黄曲霉毒素是一种致癌物质，危害人、畜的健康和生命。因此，霉菌的检测对于食品的安全性很重要。食品中常见的霉菌:毛霉属、根霉属、曲霉属、青霉属等

2、霉菌在孟加拉红琼脂上的菌落特征酵母菌在孟加拉红琼脂上的菌落特征※检测中的注意事项：1、取样的代表性。2、取样工具的无菌。空气中霉菌的孢子含量很高，所以，取样的工具、容器等要经过严格的高压灭菌。3、检样的操作。（1）由于霉菌易被携带，所以，检样时操作人员应尽量避免自身携带的可能。（2）样品的均质及充分振摇。因为有些孢子是连成串的，故均质和振摇能使其充分散开，同时，在各梯度连续稀释时，也要用灭菌吸管反复吹吸几次，使孢子充分散开。4、培养温度和时间。培养温度25-28℃培养，3天后观察，需培养观察一周。※霉菌检验中

3、常用的培养基：孟加拉红琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、察氏琼脂、高盐察氏琼脂等。※检样中常见的问题：1、不同稀释度计数结果相同。2、不生长或生长很好连成片无法计数。※原因：（1）稀释时未经反复振摇，吹吸，导致孢子未充分散开，影响了计数的结果。（2）由于培养基不适宜，PH值低等，致使生长较慢。（3）观察时间的掌握。真菌生长较慢，故需3d后才能观察出结果。每天都要观察结果。大肠菌群大肠菌群：是只一群能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏无芽孢杆菌。该菌主要来源于人畜粪便。检测该菌的方法主要有MPN法，平板计数法。

4、MPN法中主要用到的是LST、BGLB、EC肉汤等。平板计数法主要用DC、VRBA等。※在检测该菌时易出现的问题：1、LST、BGLB、EC等在灭菌时小倒管中气泡排不尽。2、气泡不易观察。3、VRBA、DC平板上菌落特征不易辨认。※原因：1、在分装LST、BGLB、EC时，小倒管中有水柱；此外，高压灭菌时，需急排气，灭菌后迅速冷却。2、观察气泡时，要对光倾斜试管，使小倒管紧贴在试管壁上，便于观察。3、熟悉大肠杆、大肠菌群在上述平板上的特征,必要可做一些阳性的对照。有些食物残渣会影响观察结果，这样需要我们在培养

5、前仔细观察平板的状态，大的食物残渣可以做一些标记。大肠菌群在LST中的生长情况大肠菌群在DC上的菌落特征金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌：是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、败血症等，其毒性的强弱取决于产生的毒素和侵袭性酶，例溶血素酶、杀白细胞素、血浆凝固酶、脱氧核糖核酸酶。B-P琼脂上金黄色葡萄球菌有黑色的菌落中心，周围有半透明的卵磷脂沉淀环。甘露醇卵黄琼脂上的特征是菌落黄色，周围也有卵磷脂沉淀环。甘露醇高盐琼脂上的菌落特征与甘露醇卵黄琼脂上的菌落特征相同，不过，菌落周围没有卵磷脂

6、沉淀环。金黄色葡萄球菌在B-P上的菌落特征※检样中常见的问题：1、平板的状态：透明、有絮状物。2、凝固酶实验的观察。※原因：1、不同的厂家的培养基平板制好后的状态有所不同，主要取决于亚碲酸钾卵黄增菌液的不同。我们公司采用的鸡蛋是山鸡蛋，卵磷脂含量较高，因此制备好的平板一般透明度较好，接种金黄色葡萄球菌后，菌落特征较易观察。2、在添加亚碲酸钾卵黄增菌液时，温度的掌握，不宜太高，过高易使卵黄变性，也不应太低，太低琼脂易凝固。3、将金黄色葡萄球菌接种到兔血浆上后，每半小时观察一次，观察凝固时，将血浆轻轻倾斜或慢慢倒

7、置，如有流动，既证明没有凝固。如若不明显，可补做DNA酶实验。血浆凝固酶实验观察谢谢在微生物操作中常见问题的讨论与分析青岛海博生物技术有限公司姜文生2004-12-24主要内容1、划线获得单个菌落的方法2、涂布和倾注的区别3、培养基配制时应注意的问题4、平板的保存5、产品的保存6、观察时间的掌握6、观察时间的掌握7、添加剂的添加8、培养温度的掌握9、接种方法10、革兰氏染色方法11、生化实验12、关于杀菌的几个概念1、划线获得单个菌落的方法。划不出单个菌落的原因：（1）平板上有过多的水分（2）划线时接种环未经

8、反复灼烧（3）多区划线，三区或四区划线四区划线的方法2、涂布和倾注的区别：涂布利于观察，但由于涂布棒上会带有少量的菌液，影响计数的准确性。涂布更为准确，但不利于观察菌落的状态。3、培养基配制时应注意的问题（1）灭菌温度要严格控制，按照要求灭菌，尤其含糖量较高的培养基温度不应太高，过高会导致糖分焦化，影响质量。（2）琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分。（3）培养基不能反复灭菌，反