医学课件输血科常用实验及工作体会

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1、输血科常用实验及工作体会山东省立医院输血科王玉芝前言血型鉴定、交叉配血、抗体筛选试验是输血科目前最常用的试验，也是每个输血工作者应该熟练掌握的试验，根据工作经验我们认为在试验过程中一些细节容易被忽略，值得注意，现将工作中的一些体会与大家一起探讨交流，请大家提出宝贵意见。ABO血型鉴定1、鉴定原理：根据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原及血清中有无相应抗体将血型分为A型、B型、AB型和O型四种正定型（细胞定型）反定型（血清定型）2、方法：试管法、微柱凝胶法、玻片法均为凝集试验ABO血型鉴定（试管法）1、试验材料：正定试

2、剂：抗-A、抗-B（是否质控？质控要求？记录？）抗-AB确认弱A、B抗原，与弱A、B抗原亲和力强,会产生较强反应。抗-H用于检查亚型及孟买型。抗-A1用于A亚型检测。ABO血型鉴定（试管法）反定试剂A1细胞（为什么？）、B细胞，自制细胞的质控O细胞检查是否存在ABO系统以外抗体干扰ABO反定型。自身对照用于确认正反定型结果的有效性,排除自身抗体对定型的干扰(如冷凝集等)。A2细胞用于A亚型的鉴定（有些A亚型产生抗-A1抗体而不产生抗A2）。ABO血型鉴定（试管法）2、试验方法：正定：1滴2~5%被检者红细胞+1~2

3、滴标准血清混匀，3400转15秒（转速的选择）反定：2滴受检者血清+1滴标准红细胞混匀离心ABO血型鉴定（试管法）3、结果判定：摇动力度，细胞扣边缘情况，弱凝集的判断（亚型尤其重要）正定预期结果3+~4+，如果出现弱凝集应该考虑是抗原减弱还是亚型，不能轻易错过。血型判定并记录正反不一致的思考与解决？关键在于认识发现问题ABO血型鉴定（试管法）4、正反不一致的原因分析实验人员技术操作错误红细胞标本的相关问题血清标本的相关问题ABO血型鉴定（试管法）技术操作错误试剂浓度与配比，一般问题不大，但是比例不合适可能漏检亚型忘

4、记加试剂，试剂工作中有可能出现结果判定，尤其对溶血结果的认识，如果是血清标本可能遇到，56度破坏补体验证记录错误，实际工作中对于错误报告占很大比例标本错误ABO血型鉴定（试管法）红细胞问题：ABO亚型！使正定凝集较弱，也是发现亚型的关键所在白血病或其它恶性疾病使患者红细胞的A、B抗原减弱！！患者近期输入了ABO不同型红细胞，或ABO不同型的骨髓移植，可能出现混合视野。红细胞获得性或遗传性异常，如获得性B抗原、T/Tn多凝集红细胞。某些疾病（如腹腔癌）导致血浆中存在大量的型物质，中和抗-A或抗-B抗体，引起正定型为假

5、阴性或弱阳性。患者血清中的高效价自身冷凝集素使红细胞发生凝集！！ABO血型鉴定（试管法）血清标本相关问题新生儿抗体阴性或很弱、老年人抗体减弱！！白血病、淋巴瘤及使用免疫抑制剂的患者、先天丙种球蛋白缺乏的患者、免疫缺陷的患者抗体减弱！！ABO不同型骨髓移植患者。使用血浆或凝固不完全的血清会形成很小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块！！患者血清中有不规则抗体或自身冷凝集素！！某些疾病（多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、何杰金淋巴瘤等）导致球蛋白水平增高，引起缗钱状凝集；纤维蛋白原水平增高，会引起缗钱状凝集；血浆增容剂（葡聚糖、PVP

6、）也会引起缗钱状凝集导致假阳性结果。ABO血型鉴定（试管法）5、正反不符处理程序：患者的年龄患者的病史患者的近期输血史患者的近期用药史患者是否进行了骨髓移植患者以前的血型家系调查处理细胞、血清、改变试验条件增加试验（洗涤细胞、改变比例、反应温度、吸收放散、血型物质测定）ABO血型鉴定（试管法）常见问题解决ABO亚型正定：抗-A、抗-B、抗-AB、抗-A1、抗-H反定：A1c、A2c、Bc、Oc、自身对照吸收放散唾液型物质检测有条件者可作家系调查ABO血型鉴定（试管法）A、B抗原减弱延长孵育时间、4℃孵育酶处理红细胞

7、吸收放散唾液型物质检测既往血型调查ABO血型鉴定（试管法）抗体减弱延长孵育时间、4℃孵育加大血清用量（很实用)既往血型调查酶处理试剂红细胞ABO血型鉴定（试管法）冷自身抗体将血清和红细胞分别在37孵育后再混合用37℃温盐水洗涤红细胞、45℃热放散3分钟巯基试剂(DTT)处理红细胞自身吸收去除血清中的自身冷抗体ABO血型鉴定（试管法）室温反应的同种抗体用谱细胞做抗体鉴定选择没有相应抗原的A、B细胞做反定型ABO血型鉴定（微柱法）1、原理：是生物化学凝胶过滤技术和免疫学抗原抗体反应相结合的产物，通过调节凝胶的浓度来控制

8、凝胶间隙的大小。使其间隙只能允许游离的RBC通过，从而使游离RBC与聚集RBC分离。如果通过离心RBC沉积在凝胶管底部，则表明RBC未发生凝聚凝集，是阴性反应，若RBC聚集在凝胶带上部，则表明RBC发生凝集，呈阳性反应。其本质仍是凝集试验（凝胶可能不同，长春为葡聚糖。）基本概念：特异性胶、中性胶、抗人球蛋白试剂胶ABO血型鉴定（微柱法）2、试验材料：比较单一