实验操作基本技能讲解和种子萌发课件

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1、遗传学实验S201&S203黎双飞1392659701766701726535432sfli@szu.edu.cn细胞遗传学实验（染色体实验5次）经典遗传学(果蝇为材料4次）基础分子遗传学实验（DNA提取2次）数量形状遗传学实验（1次）实验一实验操作基本技能讲解和种子萌发一实验目的1了解实验室常规仪器使用和操作注意事项；2掌握常见植物种子萌发方法；3掌握种子有丝分裂根尖取材及处理过程。二实验内容（一）实验室安全和注意事项；（二）熟悉显微镜、离心机和移液器的使用；（三）熟悉常用染料、缓冲液的配制；(四）实验报告格式（五）种子萌发，处理根尖

2、；1CX21显微镜双目观察筒，镜筒倾角为30°，瞳间距48-75mm显微镜的使用：1.将所需观察的标本放在载物台，上卡夹住。2.将标本移动到载物台中间，先用低倍物镜观察。3.将显微镜亮度调节钮调至最小，接通显微镜电源，打开显微镜电源开关。4.把亮度调节钮移至适当位置，转动粗调手轮将载物台，上升到能见到标本的影形，转动微调手轮即可得到清晰的物象。5.使用完毕转动粗调手轮将工作台下降到底，再将亮度调节钮移到最小亮度处。6.关闭电源开关。注意事项：1.打开显微镜电源开关前一定要将亮度调节钮调至最小2.先用低倍物镜观察，再换高倍物镜，如果使用油镜观察

3、，注意镜头的转动方向和使用后用清洁剂去除干净香柏油。3.转换物镜时，手握转换器，而不是物镜。离心机：操作程序：把离心机放置于平面桌或平面台上，检查离心机是否放置平稳。打开门盖，将离心管平衡后放入转子体内，离心管必须对称放入。关上门盖，检查门盖是否关紧。插上电源插座，按下电源开关。设置转速和时间：时间为倒计时，转速为由低到高且不能超过规定转速。当转子停转后，打开门盖取出离心管。关断电源开关，离心机断电。注意事项：离心管必须平衡，且不能超过规定容量；如果是小体积的1.5mlEP管，则必须是加入相同体积的液体；离心管必须对称放入；门盖一定要关紧；设

4、置转速时要由低到高。电子电平使用注意事项1了解安装条件、安装步骤、电源条件;2熟悉具体使用首先要清洁天平；接着平衡；然后称量；最后清洁、复原。注意：工作台水平干净；不能超出陈量范围；药品轻放、慢放；剧毒或腐蚀药品注意防护。移液枪的使用移液枪的操作方法设置移液体积：手柄的显示窗清楚地显示移液器所移液量。移液量通过顺时针或逆时针旋转操作按钮来设置。装配吸头：在装配吸头前要保证移液嘴连件的清洁。将吸头紧紧按在移液器吸液嘴连件上，确保密封完好，其标志是在吸头与黑色吸液嘴连件形成清晰的密封圈。吸液和放液：吸液时移液器保持竖直，吸头尖端没入液面下3毫米

5、以下进行吸液。放液时吸头尖端可靠在容器内壁。慢吸慢放，始终用拇指控制按钮运动，以保证连贯一致。丢弃吸头：移液后，用力向下按动推出器推出吸头，将吸头丢弃到废物缸中。放置好移液器：移液枪用完之后要归到最大计量的位置，并放置在移液器架之上。移液枪的使用注意事项：(1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。(2)为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层”液膜”，造成排液量偏小而产生误差。(3)浓度和粘度大的液

6、体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。(4)可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1mL蒸馏水20℃时重0.9982g.移液枪的使用(5)移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的，长期操作会使内部零件松散而损坏移液器。(6)移液器未装吸头时，切莫移液。(7)在设置量程时，请注意旋转到所需量程数字清清楚楚在显示窗中，所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程，否则会卡住机械装置，损坏了移液器。(8)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体（如浓酸、浓

7、碱、有机物等）。(9)严禁使用移液器吹打混匀液体。(10)不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度。同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作。(三）常用染色液或稀释溶剂的配置（每天来前10的同学免费提供纸质材料）1）常用固定液纯酒精（或甲醇）可固定细胞质中的蛋白质，穿透组织的速度快，但易引起组织变硬和收缩。而醋酸（又名乙酸，由于在16.7℃以下的温度即凝固成冰状固体，故又名冰醋酸。）可固定染色质，又可使细胞膨胀，所以与酒精（或甲醇）混合使用时，它们的作用可以互补。常用配方：纯酒精（或甲醇）3份或纯酒精（或甲

8、醇）2份冰醋酸1份冰醋酸1份（三）常用染色液或稀释溶剂的配置1）常用染液1铁醋酸洋红45%的醋酸100毫升，加入1-2克洋红（carmine）煮沸，冷却后过滤。然后