植物染色体研究进展

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1、植物染色体技术的研究进展琼州学院生物科学与技术学院海南三亚572000摘要:染色体是遗传信息的载体,通过对植物染色体技术的研究,包括分带技术、核型分析,荧光原位杂交技术、光谱核型等,对于植物分类、进化过程、以及属种间关系具有重要的应用价值。关键词:植物;染色体;分带技术;核型分析ResearchProgressinPlantChromosomeTechnologySchoolofBiologicalScienceandTechnology,QiongZhouUniversity,SanyaHainan,572000ChinaAbstract:Chromosomes

2、arethecarrierofgeneticinformation,throughthestudyofplantchromosometechnology,includingbanding,karyotypeanalysis,fluorescenceinsituhybridization,spectralkaryotyping,Italsohasagreatapplicationvalueintheresearchofplantstaxonomy,evolutionandtherelationshipofdifferentgenus.Keywords:Plant;C

3、hromosome;Banding;Karyotypeanalysis染色体最早是由德国生物学家弗莱明在1879年发现的,但它的正式命名是在1888年由瓦尔德第一次提出。对于当时的技术,人们并不确定染色体的具体结构与功能,在之前的1883年,美国学者也只是提出了遗传基因在染色体上的学说。而1902年美国生物学家沃尔特·萨顿和鲍维里通过观察发现细胞的减数分裂时染色体与基因具有明显的平行关系,也只是推测基因位于染色体上。直到1928年摩尔根通过果蝇杂交实验,才最终证实了染色体是基因的载体,他也因此获得了生理医学诺贝尔奖。染色体在显微镜下呈圆柱状或杆状,主要由脱氧核糖核

4、酸和蛋白质组成,在细胞发生有丝分裂时期容易被碱性染料着色,如龙胆紫和醋酸洋红。7染色体是遗传物质的载体,它具有贮存和传递DNA、控制基因活动和调节基因重组的作用,研究染色体的形态、结构是基因定位与基因图谱研究的基础工作[1]。1常规制片技术1.1取材制片多以初生根的根尖为材料,因为根尖分生区的细胞分裂旺盛、集中、容易辨别,也有少数实验取植物的花粉母细胞[2]、花蕾、愈伤组织[3]、次生根[4]或幼嫩的叶片等,这些取材部位要根据所进行的研究对象要在充分了解其组织结构和生长发育规律的基础上,有针对性地取样才能获得合适的材料[5]。另外注意的一点就是取样时间,一般选在细

5、胞分裂中期最为合适,研究表明,植物细胞分裂中期高峰一般出现在上午8:30-11:30。1.2预处理合理的预处理能得到分裂相高,形态好的中期染色体。实际操作中常用的方法有物理方法和化学方法[6]。物理方法是用低温对植物材料进行预处理,处理温度一般在0~8℃,或用冰水混合物直接对材料进行预处理[7]。化学方法预处理常用的试剂有:秋水仙素、对二氯苯、8-羟喹啉、α-溴荼和风油精等。根据不同的材料选择合适的试剂,秋水仙素毒性较强,价格较高,处理效果好,但处理时间不能过长;对二氯苯预处理的效果与秋水仙素相当,也具有较强的毒性,价格较低;8-羟喹啉较适宜处理较大染色体的植物;

6、α-溴荼对禾本科和水生植物的非离体材料处理效果较好;风油精处理的特点是经济、安全[6]。为了使不同方法的优点结合起来,有些实验采用复合方法,如用秋水仙素和8-羟基喹啉溶液对材料进行预处理[8]。1.3固定固定的目的是用渗透力强的固定液将材料迅速杀死,使蛋白质沉淀,并尽量使其保持原有状态。通常用卡诺液无水(酒精:冰醋酸=3:1)对材料固定24h左右。也有人用甲醇冰醋酸溶液(甲醇B:冰醋酸=3:1)来固定材料,但此方法极少使用[5]。1.4解离7材料解离方法有酶解法和酸解法。酶解法是用低浓度的果胶酶(1%~2%)和纤维素酶(1%~5%)的混合液解离材料,解离时间一般在

7、室温下2~5h。酸解法一般是将材料放入预热60℃的1mol/LHCl中解离,解离时间视不同的材料而定,一般为几分钟到十几分钟或更长[9]。1.5制片染色染色体制片方法主要有常规压片法和去壁低渗火焰干燥法[10]。常用的染色剂有醋酸洋红、改良石碳酸品、红铁矾-苏木精、Schiff试剂、品红、改良的卡宝品红等,染色时根据不同的材料选择合适的染色剂,但染色时要保证细胞质不染色或染色浅,以免影响观察效果[11]。2分带技术染色体分带是一项用特殊的染料经一定程序对不同染色体染色,使其出现深浅不一的带纹的技术。特定的染色体有特定的条纹,因此分带技术可作为鉴别染色体组和单个染色

8、体的手段,

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