第六章 实验动物实验室的生物安全防护要求课件

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1、第六章实验动物实验室的生物安全防护要求主要内容第一节实验动物的护理和使用原则第二节实验过程的行为规范第三节实验动物使用程序和要求第四节动物生物安全实验室设施与防护要求第五节无脊椎动物使用安全原则第一节实验动物的护理和使用原则实验动物是经过科学的育种、繁殖生产，遗传背景清楚，携带的微生物状况明确，并对其生态学、生物学、生物化学、形态结构了解的特殊动物，因此，对其护理和使用也有严格的要求。1.实验动物饲养和使用应遵守国家有关法律和规定。2.应明确使用实验动物的理由和目的。3.明确实验所使用动物的种类和数量，动物的数量应满足统计学的要求。4.完善操作规程，避免或减轻因实验对动物

2、造成的不适和痛苦。包括使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法；禁止不必要的重复。5.严格按程序实施实验后动物的处理，包括麻醉、止痛、实验后的护理或用麻醉方法处死。6.实验过程中要求保证实验动物的良好生活条件，包括饲养环境、符合需求的饲料及细心的护理等。7.研究人员和实验动物操作人员应接受实验动物的基本知识和操作技能等方面的培训。8.使用过程中要求保证周围环境和实验人员的安全。第二节实验过程的行为规范实验过程的行为规范物理限制手术操作饮食的限制废弃物和尸体处理一.物理限制指在实验过程中（包括检查、收集标本、给药、治疗或实验操作等），用手或工具限制动物活动的过程。根据实验内容不同，限制时间

3、有差异，但要求尽量缩短限制时间。有些动物，如狗和灵长类动物可以通过简单的训练达到目的。1.限制的工具不能作为常规的饲养工具。2.工具的设计应合理，不要仅考虑实验的便利，主要考虑尽量减少动物的不适，避免伤害。3.尽量减少限制的时间，以达到实验目的为基准。4.在限制过程中，如果发生损伤或严重的行为改变，应暂停或禁止限制，并给予处理或治疗。5.保证实验人员和周围人员的安全。物理限制的主要原则和要求有些实验需要对动物进行手术，即打开或刺穿动物的身体，对动物的物理或生理机能产生较大的损害，同时，实验人员也容易被血液/体液污染或被器械、针头刺伤，存在潜在生物污染的威胁，因此必须做到：1.操

4、作一定要使用适当的镇静、镇痛或麻醉方法。2.禁止不必要的重复操作。3.不提倡一个动物进行多个手术实验，但为充分利用动物资源，经动物伦理委员会许可，在可能的条件下可以实施。4.严格实验操作规程，防止发生血液/体液外溅和针刺伤，避免生物污染。5.手术后的动物、标本及所用器具材料等须按规定程序处置。二.手术操作实验用动物原则上要求随时饮食，如果一些实验需要动物限制食物或水的摄入量，应保证动物存活所需要的最低需求量。根据研究的目的，食物的限量应经过科学的论证，其限量的标准应容易操作，如正常摄入量的百分比或动物体重的百分比。对于水分的限量摄入，一定要防止动物发生脱水现象，并要保持动物的膳

5、食平衡。三.饮食的限制1.血液和体液标本的处理用于抗体、抗原、病原微生物、生化指标等检查的血液和体液，按照要求进行处理并检测，检测后的标本经121℃，30min高压消毒处理。2.动物脏器组织的处理动物器官组织，尤其是用于病原微生物分离的组织按照标准程序进行处理；用于病理切片的组织，均需要经过甲醛固定后再进行切片。剩余的组织经121℃，30min高压消毒处理。四.废弃物和尸体处理(1)3．动物尸体的处理安乐处死后的动物尸体，取材完毕后，经121℃30min高压灭菌处理后，集中送环保部门处理。朊病毒感染动物的处理原则参见第9章。动物生物安全三级（ABSL-3）实验室及以上级的实验室

6、的感染动物尸体需经高压蒸汽灭菌，才能移出实验室。4.动物咽拭子的处理用于病原分离和PCR检测的咽拭子，按照各自的要求处理后，进行病毒分离和PCR检测，剩余的标本经121℃，30min高压消毒处理。5.病原分离培养物的处理病原分离的培养物，不论是阳性还是阴性结果，均需经121℃，30min高压消毒处理。四.废弃物和尸体处理第三节实验动物使用程序和要求感染动物实验室的生物安全实验动物的来源（本底的调查和检测、饲养）实验室动物进入实验室动物实验操作感染动物的观察、饲养与清洁死亡动物废气动物、动物尸骸与废弃物品处理一.实验动物的基本使用程序和要求1.实验室如需要使用实验动物，应首先向生

7、物安全和伦理委员会提出申请，填写申请表（见附件“实验动物使用申请表”）。2.使用实验室得到认可后，根据申请表中申请的动物种属和数量，安排实验动物的饲养和使用。3.实验动物必须在指定的区域内饲养和使用，禁止在实验室饲养动物。实验操作结束时，动物须返回指定的饲养区域内，不能在实验室内过夜。4.动物实验应在实验室内指定的区域进行。1.涉及感染性材料的操作要在生物安全柜中进行，并防止泄露在安全柜底面。操作包括感染动物的解剖、组织的取材、采血及动物的病原接种。2.动物笼具在清洗前先做消毒处理。3.污物