早期糖尿病大鼠心肌NOS系统与胶原纤维演变的实验研究.doc

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1、早期糖尿病大鼠心肌NOS系统与胶原纤维演变的实验研究【摘要】目的：观察不同时期糖尿病（diabetesmellitus,DM）大鼠血清、心肌组织中NO、NOS水平及心肌胶原纤维的变化，探讨NO与心肌胶原纤维的相关性。方法：应用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立SD大鼠糖尿病模型，设立正常对照组（1个月、2个月和3个月）和模型组（1个月、2个月和3个月）。测定各组大鼠血清、心肌匀浆中的NO含量及NOS活性，利用VanGieson氏胶原纤维染色法观察各组大鼠心肌胶原纤维的变化。结果：DM大鼠血清、心肌中的NO、NOS水平较正常组显著降低（P<0.05）并随着糖尿病病程的延长不断降

2、低，心肌胶原纤维在糖尿病组明显增生，而且也随着病程的延长不断加重。结论：DM大鼠心肌胶原纤维的增生与细胞中NO及NOS水平的减少有关。【关键词】心肌病变一氧化氮（NO）糖尿病链脲菌素胶原纤维AbstractObjective:ToobservingthelevelsofNOandNOSandofbloodserumandcardiacmuscleindiabersmellitus,duringdifferentperiodsandstudythecorrelationbetweenNOandcollagenfibersincardiacmuscle.Methods:SDratsw

3、eredividedintonormalgroup(onemonth,twomonthsandthreemonths)andmodalgroup(onemonth,twomonthsandthreemonths).Modalratswereinjectedintointraperitoneallybystreptozotocin(STZ).ThentotestthelevelsofNOandNOSeseinallgrouprats.Atlast,toobservethechangesofcollagenfibersinallgroupratsincardiacmusclebyVa

4、nGiesoncollgenfiberdye.Results:ThelevelsofNOandNOSinDMbloodserumandcardiacmuscledecreasenoticeablycomparedtonormalgroups(P<0.05).What’smorewiththeextensionofDM,thelevelscontinuetodrop.Also,collagenfibersincardiacmuscleincreaseevidentlyinDMgroupsandcontinuetogrowasDMlastsalongertime.Conclus

5、ion:TheincreaseofcollagenfibersincardiacmuscleisrelatedtothedropofthelevelsofNOandNOSincells.KeywordsDiabeticcardiomyopathy(DC)；Nitricoxide(NO)；Diabetesmellitus(DM)；Streptozotocin(STZ)；Collagenfibers(CF)糖尿病心肌病变（diabeticcardiomyopathy,DC）是糖尿病常见的一种并发症，临床表现为心力衰竭，心律失常，心源性猝死，是糖尿病主要死亡原因之一。近年来的研究发现胶

6、原纤维增生是引起糖尿病心肌病变的原因之一。已往对胶原纤维的研究多在缺血再灌注方面，而NO对胶原纤维的影响方面研究的较少，因此，我们就这方面进行了研究，现报导如下。1材料与方法41.1材料1.1.1药物与试剂：链脲佐菌素（美国SANLAN),NO、NOS试剂盒（南京建成生物工程研究所）、三氯化铁（上海星山化工厂）、苏木精（上海化学试剂公司进口分装）、苦味酸（上海化学试剂公司）、酸性品红（上海新中化学厂）。1.1.2动物：SD雄性大鼠42只，体重180g～200g由福建医科大学实验动物中心提供,合格证号：闽物质检号（2002-2006）。1.2方法1.2.1动物分组与模型：SD雄性大

7、鼠42只适应性喂养1W，随机取出21只为正常对照组（腹腔注射等体积生理盐水1个月、2个月、3个月各7只），另外21只大鼠腹腔注射STZ60mg/kg，72h后尾静脉采血测定血糖，血糖大于16.7mmol/L者为糖尿病模型动物。成型模型组分为三组①糖尿病1个月组②糖尿病2个月组③糖尿病3个月组（按250mg/kg，1次/d灌胃）各7只（糖尿病3个月死亡1只，糖尿病1个月死亡1只）。各组大鼠均以颗粒饲料喂养，自由进食、饮水。1.2.2取血和制备心肌匀浆：分别在1个月、2个月和3个月后