基础理论genericppt课件

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1、液相色谱基础理论美国瓦里安技术中国有限公司液相色谱基础理论培训课程大纲1液相色谱法发展史与分类2色谱方法基本原理3流动相及色谱柱的选择4样品分析方法开发1液相色谱发展历史与分类1.1色谱的起源1.2色谱的发展历程1.3色谱的定义1.4色谱中的分离过程1.5色谱的分类1.6色谱仪介绍1.1色谱的起源(1903)Chromatography色谱M.S.Tswett1.2色谱的发展历程1.2色谱的发展历程1.3色谱的定义IUPACdefinitionofchromatography(1993):Chromatographyisaphysicalmethodofsepar

2、ationinwhichthecomponentstobeseparatedaredistributedbetweentwophases,oneofwhichisstationarywhiletheothermovesinadefinitedirection.固定相(stationaryphase):在色谱分离中固定不动、对样品产生保留的一相。流动相(mobilephase):带动样品向前移动的另一相。色谱法:是一种物理化学分离方法,它利用不同组分与两相(固定相和流动相)之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,样品在两相中做相对移动时,各组分在两相间进行多次

3、平衡,使不同物质达到相互分离。定性定量样品纯化分离1.4色谱中的分离过程组分为何需要分离???1.4色谱中的分离过程咖啡流动相固定相利用混合物中各组份在不同的两相中溶解、分配、吸附等化学作用性能的差异,当两相作相对运动时,使各组分在两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离按流动相的物态分:–气相色谱(GasChromatography,GC):用气体作为流动相(又叫载气)–液相色谱(LiquidChromatography,LC):用液体作为流动相(又叫洗脱剂)?按固定相的形态分:–平面色谱?纸色谱?薄层色谱–柱色谱?按流动相和固定相的相对极性–正相色谱(No

4、rmalPhaseChromatography)固定相的极性大于流动相–反相色谱(ReversedPhaseChromatography)固定相的极性小于流动相1.5色谱的分类1.5色谱的分类色谱流动相:气体(气相色谱)液体(液相色谱)超临界流体固定相:液体固体液体固体吸附剂键合相凝胶固定相柱柱柱平面平面柱柱柱柱柱外形:名称:毛细管电泳气液色谱气固色谱液液色谱薄层色谱液固色谱键合相色谱离子色谱体凝积胶排色阻谱色谱超临界流体色谱毛细管区带电泳毛细管电色谱离子交换树脂毛细管等速电泳毛细管等电聚焦毛细管凝胶电泳胶束电动色谱微乳电动色谱纸色谱反相色谱目前应用最普遍液相和气

5、相色谱目前最常用HPLC与GC的应用差异HPLC与GC的应用差异挥发非挥发疏水性亲水性糖环氧化合物多氯联苯脂肪酸甲酯芳香酯C2/C5碳氢化合物无机离子氨基酸糖类衍生物香精油聚合物单体甘油三酸酯磷脂亚硝胺有机磷杀虫剂酒精多环芳烃芳族胺脂溶性维生素抗体天然食用色素类黄酮抗生素腈类抗氧化剂乙二醇脂肪酸磺胺类挥发性羧酸醛酮类甘草膦合成食用色素苯酚黄曲霉毒素酶糖醇吸附法固定相为固体硅胶和氧化铝是最常用的固定相因一连串吸附/脱附步骤形成分离不同物质与固定相之间的吸附程度不同造成分离分配法溶质基于在两相之间的分配系数而分离保留时间长的物质与固定相亲和力较强两种基本操作模式正相:

6、极性固定相、非极性流动相反相:非极性固定相、极性流动相分子排阻法依照分子大小分离固定相具有不同大小孔径大分子先流出,因其走的路径较短应用在判定聚合物、蛋白质分子量及其范围离子交换法固定相表面带与分析物相反电荷一般使用弱离子交换树脂因电荷相互作用力的强弱产生分离1.6色谱仪介绍ProStar和PrepStar产品从分析、半制备到生产规模制备液相色谱的专业公司半制备液相色谱中试规模制备色谱工业规模制备色谱分析液相色谱HPLC模块泵:ProStar210单泵,二元高压泵,ProStar230(三元泵),ProStar240(四元泵),PrepStar218,SD-1,S

7、D-2检测器:ProStar325UV/VIS检测器,ProStar335二极管阵列,ProStar363荧光检测器,ProStar355示差检测器,ProStar370电化学检测器,ELSD,MS,MS/MS自动进样器:ProStar400,410,420,430组分收集仪:ProStar701,704柱温箱:ProStar500,Metertherm循环系统:Prostar530液相色谱的应用瓦里安高效液相色谱产品系列传输泵自动进样器检测器质谱2.色谱方法基本原理色谱基本理论色谱的主要理论热力学理论以相的平衡观点研究色谱过程塔板理论为代表(Martin&Syn

8、ge)动力

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